Способ диагностики функциональной недостаточности эндометрия при привычном невынашивании беременности Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 

11298667

Изобретение относится к медицине, а именно акушерству.

Цель изобретения - повьпиение точ- ности способа.

Способ осуществляют след лощим образом.

Биоптат эндометрия получают путем взятия цуга эндометрия Хаммеровской кюреткой с передней поверхности стенгистологическом исследовании на 24 день цикла - фаза секреции. В анамнезе 3 беременности, закончившиеся самопроизвольными выкидышами в сроке 8-9 недель. Консервативная терапия во время беременности бьта неэффективной. Предлагаемым способом установ лено, что удельная активность креатин

фосфокйназы в гомогенате эндометрия ки матки на 21-24 день менструального на 24 день цикла составила

{цикла. Биоптат многократно отмывают Б физиологическом растворе. После отмьгоания ткань гомогенизируют и центрифугируют при 3000-8000 об/мин в течение 10-15 мин. В супернатанте определяют активность креатинфосфоки- назы и концентрацию белка.

Определение креатинфосфокиназы осуществляют по изменению оптической плотности субстрата при 340 нм в течение 1 мин при 25°С.

Для определения активности креатинфосфокиназы реакционная смесь содержит 20 мкл исследуемого образца гомогената эндометрия к 525 мкл-субстрата, содержащего tOO ммоль 3-эта- ноламннового буфера, рН7,0, 35 ммоль/л креатинфосфата, 20 ммоль/л глюкозы, 9 ммоль/л глютадиона, 10 ммоль/л уксуснокислого магния, 1 ммоль/л АДФ, 0,6 ммоль/л НАДФ, 10 ммоль/л АМФ., 1,2 кЕ/Л МИн глюкозо-6-фосфадегидро- геназы, 1,2 кЕ/л-мин гексокиназы. Полученную смесь перемешивают и инкубируют при 25 С в течение 5 мин. Затем при 340 нм измеряют изменение оптической плотности в 1,0 см кювете через 1,0 мин в течение 3 мин. Активность фермента рассчитывают по формуле А/мин-3524 и выражают в мкмоль/минмл.

Для определения содержания белка в гомогенате используют метод Лоури выражают в мг/мл. Удельную активность креатинфосфокиназы в гомогенат эндометрия выражают в мкмоль/мин.мг.

Пример 1. Больная Н., групп крови А (II), резус положительный, муж 28 лет, группа крови А (II), резус положительньй. По данным тестов функциональной диагностики гормональной недостаточности не выявлено, ба зальная температура двухфазная, при

ВНИШШ Заказ 883/47Тираж 777 Подписное

Произв.-полигр. пр- д ие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

гистологическом исследовании на 24 день цикла - фаза секреции. В анамнезе 3 беременности, закончившиеся самопроизвольными выкидышами в сроке 8-9 недель. Консервативная терапия во время беременности бьта неэффективной. Предлагаемым способом установлено, что удельная активность креатин5

54,3 мкмоль/минмг, что свидетельствует о функциональной недостаточности эндометрия. Диагноз подтвержден независимыми диагностическими методами. Проведено патогенетическое лечение. Наступившая беременность закончилась рождением живого доношенного ребенка.

Пример 2, Больная К., в анамнезе 6 самопроизвольных выкидышей в сроки от 5 до 27 недель беременности, одни преждевременные роды Нертвым плодом. Несовместимости по резус-факторз и системы АВО с мужем не выявлено Ректальная температура двухфазная. При гистологическом исследовании на 22 день менструального цикла - фаза секреции. Исследование гомогената эндометрия по предлагаемому способу показало, что уровень удельной активности креатинфосфокиназы составляет 20,3 мкмоль/мин-мг, что свидетельствует о функциональной недостаточности эндометрия. Правильность диагноза бьта подтверждена не- 5 зависимыми диагностическими методами, Проведено патогенетическое лечение. Последующая беременность закончилась рождением здорового доношенного ре0

5

0

40

б€ нка. Форм

ула изобретения

45

50

Способ диагностики функциональной недостаточности эндометрия при привычном невынашивании беремен ности путем исследования гомогената эндометрия, отличающи йся тем, что, с целью повышения точности способа, в гомогенате эндометрия определяют креатинфосфокиназу и при величине удельной активности более 20 мкмоль/миН МГ диагностируют функциональную недостаточность эндометрия .

Изобретение относится к медицине, точнее к акушерствз . Цель изобретения - повышение точности способа. Для этого берут биопт ат эндометрия на 21-24-ый день менструального цикла. Биоптат многократно отмывают в физиологическом растворе, гомогенизируют и центрифугируют 15 мин при 3000-8000 об/мин. В супернатанте определяют активность креатинфосфокиназы (КФК) и концентрацию белка. Для определения КФК берут 20 мкл исследуемого гомогената эндометрия к 525 мкл субстрата, содержащего 100 ммоль 3-эталонаминового буфера, рН 7,0, 35 ммоль/л креатинфосфата, 20 ммоль/л глюкозы, 9 ммоль/л глютадиона, 10 ммоль/л уксуснокислого магния, 1 ммоль/л АДФ, 0,6 ммоль/л НАДФ, 10 ммоль/л АМФ, 1,2 кЕ/л мин глюкозо- -6-фосфатдегидрогеназы, 1,2 кЕ/л мин гексокиназы. Смесь инкубируют при 5 мин. Затем при 340 им измеряют изменение оптической плотности в 1,0 см кювете через 1,0 мин в течение 3;-х мин. Активность фермента рассчитывают по формуле А/мин-3524, выражают в мкмоль/мин-мл. Методом Лоури определяют содержание белка и выражают в мг/мл. Удельную активность КФК выражают в мкмоль/мин-мг. При величине удельной активности КФК более 20 мкмоль/мин.мг диагностируют функциональную недостаточность эндометрия. § (Л ю со 00 О5 О5