Способ получения производных пиранонов Советский патент 1987 года по МПК C07D309/30 A61K31/365 A61P3/06 A61P9/10 

11318162

Изобретение относится к способу полухшния новых производных пиранонов общей формулы I

с л

О

шс

где пунктирные линии X и Z представ- ляют две двойные связи или две одинарные связи, проявляющих антигипер- холестеролемическую активность.

Целью изобретения является получение соединений, обладающих более высокой активностью.

Соединение I, получаемое при помо- щи нового способа, может быть использовано в качестве антигиперхолесте- рролемического агента для лечения атеросклероза, гиперлипемии и других поИзоляция и анализ на HMG-CoA-редук- тазу.

}5 Микросомы получали из печени крыс, которым добавляли в корм холестирамин в течение 7 дней. НМО-СоА-редуктазу подвергали сольюбилизации из микро- сом методом Геллера и Шрюсбери и затем очистке через стадию осаждения вторичным сульфатом аммония. Препарат фермента хранили при температуре в виде 100 / л проб и она оставалась стабильной в течение по крайбодных заболеваний человека. Его мож- й мере 3 мес. Перед использованием но применять стоматическим или парен- фермент активировали при 37 С в тече- теральным способом в виде капсул, ие 30 мин. Осуществляли анализ,при

котором реакционная смесь содержала в пересчете на 100 ( 0,14 М буфе- 30

таблеток, препаратов для инъекций. Предпочтительным является стоматический способ. Дозы могут варьироваться в зависимости от возраста пациента, его состояния, веса и других покаЭа- телейо Дневная доза для взрослого пациента изменяется от 2 до 2000 мг (предпочтительно от- 10 - 100 мг) и может быть разделена на три или четыре приема. Можно применять более высокие дозы.

Как соединение II формулы

О k.(5

35

НзС

СНз

енз

pa фосфата калия, рН 6,8, 0,18 М КС1; 3,5 мМ ЭДТК, рН 7,0, 10 мМ дитиотрей- тола, альбумин бычьей сыворотки с концентрацией 0,1 мг/мл, 0,02ft Ки С HMG - СоА с указанной концентрацией, 0,3 /и г частично очищенного фермента (удельная активность 100- 150 нмоль. мин ) с ингибитором.- Спустя 5 мин инкубирования с ингибитором и НАДПГ при реакцию иници40 ировали при помощи 0,2 мМ НАДПГ (12,5 М, 5,5ft Ки/|tt моль) . Реакцию прерывали при помощи 20 р- л 5 М раствора НС1. После дополнительного инкубирования в течение 15 мин при 27°С

45 WT-Я того, чтобы дать возможность закончить полную лактонизацию продукта, смесь пропускали через колонну 0,5х х5 см, содержащую Био-Рекс в виде порошка 100-200 меш (диаметр частиц

н,

известное под названием мевинолин, так и предлагаемое соединение проявляют антигиперхолестеролемическую активность. Однако последний более активен, показателем чего является ферментно ингибирующая активность HCjc :

HCjo ,нМ 8,5

6,5

связи отсутствуют)3,1 Соединения быпи исследованы в форме соли натрия разомкнутой окси-кис- лоты. Они были приготовлены в виде растворов 4 мг/мл в 10% этанола. Перед проведением анализа препарации разбавляли в ДМСО-диметилсульфоксиде.

определяли с использованием пяти концентраций для каждого ингибитора в анализе HMG - СоА-редуктазы.

Изоляция и анализ на HMG-CoA-редук- тазу.

Микросомы получали из печени крыс, которым добавляли в корм холестирамин в течение 7 дней. НМО-СоА-редуктазу подвергали сольюбилизации из микро- сом методом Геллера и Шрюсбери и затем очистке через стадию осаждения вторичным сульфатом аммония. Препарат фермента хранили при температуре в виде 100 / л проб и она оставалась стабильной в течение по крайкотором реакционная смесь содержала в пересчете на 100 ( 0,14 М буфе- 0

5

pa фосфата калия, рН 6,8, 0,18 М КС1; 3,5 мМ ЭДТК, рН 7,0, 10 мМ дитиотрей- тола, альбумин бычьей сыворотки с концентрацией 0,1 мг/мл, 0,02ft Ки С HMG - СоА с указанной концентрацией, 0,3 /и г частично очищенного фермента (удельная активность 100- 150 нмоль. мин ) с ингибитором.- Спустя 5 мин инкубирования с ингибитором и НАДПГ при реакцию иници0 ировали при помощи 0,2 мМ НАДПГ (12,5 М, 5,5ft Ки/|tt моль) . Реакцию прерывали при помощи 20 р- л 5 М раствора НС1. После дополнительного инкубирования в течение 15 мин при 27°С

5 WT-Я того, чтобы дать возможность закончить полную лактонизацию продукта, смесь пропускали через колонну 0,5х х5 см, содержащую Био-Рекс в виде порошка 100-200 меш (диаметр частиц

0 0,149-0,074 мм) в хлоридной форме, который уравновешивали дистиллированной водой. При помощи этой смолы непрореагировавший CJ НМС-СоА адсорбировался, а продукт элюировали при помощи 3 мл дистиллированной воды непосредственно в ампулы для ана-, лиза сцинтилляций. После добавления 10 мл Аквазола II измеряли радиоактивность проб при помощи счетчика .

5

3.13

сцинтилляций типа Пакард Б2450. Испытуемые ингибиторы превращали в соли натрия.

Острое ингибирование синтеза холестерина у крыс.

Самцы белых крыс Гольцмана имели вес 100-110 г. Их выдерживали на диете Пурина Формула6-5008 в течение 1 недели. На седьмой день крыс разделили на семь или девять групп по 10. животных с одинаковым средним весом (приблизительно 160 г) в группе, кормление на основе диеты Формулэб продолжали. По 10 животных помещали в клетки, дно которых было изготовлено из проволоки, клетки помещали в комнату с кондиционированным воздухом. В 8 ч 30 мин на следующий день корм удаляли из клеток и каждой группе крыс давали через трубку, введенную в желудок одну дозу испытываемого соединения, суспендированного в 5%- ном Эмульфоре в соляном растворе. Контрольная группа получала только суспендирующий носитель. Спустя 1 ч после введения соединения крысам внутрибрюшинным способом вводили 1- С -ацетат натрия (26,7 Ки/мл, удельная активность 23,1/и. Ки/мг) в дозе 80(иКи/кг. Через 50 мин брали 4 мл крови через иглу, вставленную в сердце, при этом животные предварительно подвергались легкой анестезии при помощи пентобарбитала, затем полученные пробы помещали в пробирки, содержащие 0,2 мл 0,4 М раствора цитрата натрия. Плазму, полученную при центрифугировании, подвергали гидро- лизации, а холестерин экстрагировали |в петролейном эфире. Для измерения содержания холестерина в плазме 2 мл раствора в петролейном эфире выпаривали до сухого состояния в 8-миллиметровых ампулах с делениями при умеренном нагревании, а затем остаток переносили в 5 мл Аквазола-2 и содержание определяли с использованием жидкостного счетчика сцинтилляций типа Приас ПЛД.

Исследование на собаках.

Чистопородных самцов гончих помещали отдельно друг от друга и кормили измельченным кормом на основе диеты Пурина Лэб Кейнин в расчете ЗОг/кг в день. Перед началом эксперимента у собак брали кровь дважды в неделю из шейной вены и определяли содержание холестерина плазмы до тех пор.

18162 4

пока полученные значения не станут стабильными. Для того чтобы определить воздействие мевинолина и соединения I на холестерин плазмы, соба- - кам давали соединение в расчете 8 мг/кг в день. Его подмешивали в корм собакам. При этом продолжали брать пробы крови два раза в неделю еще в течение 4 недель и определяли

fO содержание холестерина плазмы.

Острое ингибирование синтеза холестерина у крыс.

Не было возможности установить ги похолестеролемическую активность у

J5 крыс при использовании Ш-236Б иначе как только после обработки препарато Тритон WR-1334. Однако после стоматического введения одной дозы испытуемых ингибиторов синтез холестерина

20 из ацетата у нормальных крыс заметно ингибировался на 2-8 ч после обработки. Предварительные эксперименты как с мевинолинатом натрия, так и с соединениями I показали, что

25 ингибиторная активность проявлялась у крыс очень быстро. Спустя 1 ч посл применения соединений внутрибрюшинным способом вводили ацетат (80 Ки/кг), а спустя 50 мин опреде30 ляли содержание С холестерина пламы, которое и служило мерой синтеза холестерина. Соль натрия соединений I быпа приблизительно в 2 раза более активна по сравнению с солью натрия

j мевинолината, причем дозы с 50%-ным ингибированием составили 0,046.

Пример 1. 6/R/- 2-/8 /S/-2 2 -диметилбутирилокси-2 /8/,6 /К/-ди- метил 1 , 2 , 6 , 7 , 8, 8 а /R/40 гексагидронафтил-1 /5/-этилj-4/R/- окси 3,4,5,5-тетрагидро-2Н-пиран-2-он Стадия А. Получение 6/R/- 2- 8 /S/ окси-2 /5/, 6 /К/-диметил Г, 2, 6 , 8, 8 а (R)-гексагидронафтил-1

45 /S//этил -4(R)-окси-3,4,5,6-тетрагид- .ро-2Н-пиран-2-она (IV).

Смесь 8,0 г (19,78 ммоль) продукта МК-803 (ИТа, R -метил) и 8,31 г

50 (197,8 ммоль) гидрата гидроокиси лития в 600 мл воды перемешивают при температуре кипения с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 56 ч. Реакционную смесь охлаж55 дают до о С, а затем обрабатывают с перемешиванием 20 мл концентрированной соляной кислоты. Далее эту смесь подвергают трехкратной экстракционной обработке 250-миллиметро5131S1626

выми порциями диэтилового эфира и объ - комнатной температуре, после изоля- единенные экстрак ты последовательно ции и сушки воздухом получают 13,7 промывают тремя 200-миллилитровыми белого хлопкообразного твердого ве- порциями воды и затем 200 мл насыщен- щества. Маточный раствор упаривают . ноге рассола. После сушки над сульфа- з яо объема 250 мл и дополнительные том магния этот органический раствор кристаллы изолируют после того, как профильтровывают и растворитель вы- раствор вьдерживают при температуре паривают в вакууме с получением мае- 0°С в течение ночи. Общий выход лоподобн ого остатка. Остаток раство- 17,13 г (69%) целевого соединения в ряют в 200 мл толуола и выдерживают 10 виде белого хлопкообразного твердого при температуре кипения с обратным вещества, температура плавления 142- холодильником в атмосфере азота в те- 144 С (вакуум).

чение 2 ч при непрерывном отделении ЯМР (CDClj ) : 0,10 (с, 6(СН)81), воды с целью обеспечить повторную 0,90 (с, 9, (CHj)jCSi), 1,19 (д. 3, лактонизацию. В результате выпарива- 5 j 7 Гц, CHj) ; 2,58 (д,2, Гц,CJH ния толуола и растирания остатка в пирана)J 4,3 (м , 2, С4Н пирана и гексане получают 5,15 г (81%) ука- СдН нафталина); 4,70 (м, 1, С Н пи- занного соединения IV (К -метил) в рана); 5,57 (м, 1, нафталина); виде белого твердого продукта, кото- 5,58 (дд, 1, J 6,10 Гц, нафта- рый не требует дальнейшей очистки. 20 лина); 6,03 (д, 1, J 10 Гц, С4Н

Аналитическую пробу получают пе- нафталина).

рекристаллизацией части этого продук- Рассчитано: С 69,08, Н 9,74. та из бутилхлорида, в результате че- С .го образуются сгустки с т.пл. Найдено: С 69,46, Н 9,83. 128-131 С (в вакууме). Стадия С. Получение 6/R- 2-/8 /S/5ШР ( 0,87 (д,3, Гц,. -2 2 -диметилбутирилокси-2 /S/6 /R/- CHj); 1,16 (д,3, Гц, СНз); 2,64 диметил-1 , 2, 6 , 7 , 8, 8 а /II/- (м,2,пиран CjH-группы); 4,27 (brm,1, -гексагидронафтил-1 /5//-этил -4/К/- нафталин CgН); 4,37 (м, 1, пиран -/диметил-трет-бутилсилилокси/-3,4, 4,71 (м, 1, пиран ), 5,56 (м,1, -30 5,6-тетрагидро-2Н-пиран-2-она. нафталин ); 5,79 (дд, 1, J 6, 2,7 г 2,2-диметилбутирилхпорида 10 Гц, нафталин Сз4) dl , 6,03 (1,J (20 ммоль) добавляют в перемешивае- 10 Гц, нафталин ).мый магнитной мешалкой раствор 2,17 г

ИК (CHClj): 8400 (ОН), 1725 (), (5 ммоль) спирта со стадии В и 74 мг 1240, 1120, 1080 .35 4-пирролидйнпиридина в 25 мл пиридиСтадия В. Получение 6/R 2-/8 (S)- на. Эту реакционную смесь перемещи- -окси-2 /S/-6 /К/-диметил-1 , 2 , б , вают при в атмосфере азота 4ч., 7., 8 , В а/К/-гексагидронафтил-1 Реакционную смесь разбавляют 250 мл /5//этил -4(К)-диметил-трет-бутилси- простого эфира и промывают.1 N ра- лилокси/-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-пиран- 40 створом НС1 до тех пор, пока промы- .вочная жидкость не станет кислотной,

а затем соляным раствором (3x50 мл).

Смесь спирта со стадии А (18,3 г. После сушки над сульфатом магния 57,1 ммоль), 21,5 г (142,8 ммоль) раствор фильтруют и выпаривают, в ре- трет-бутилдиметилхлорсилана и г 45 зультате чего получают 3,9 г оранже- (285,6 ммоль) имидазола в 200 мл N,N - масла. Это масло подвергают хро- диметилформамида перемешивают при матографии в колонне 6x15 см на сили- 20 С в атмосфере азота в течение 18ч. кагеле (230-400 меш или с размером Затем реакционную смесь разбавляют частиц 0,068-0,037 мм). В результа- при помощи 1500 мл простого эфира и 50 те элюирования (при атмосферном дав- промывают последовательно водой, 2%- лении) смесью простой эфир-гексан ным водным раствором хлористоводород- (I; „о объему) получают 2,7 г сое- ной кислоты, водой и насыщенным ра- динения в виде вязкого желтого масла. створом бикарбоната натрия. Эфирный j (CDCl, ),: 0,08 (с, 6, (СН,), раствор сушат над сульфатом магния, 55 si); 0,9 (с, 9, (СН,), CSi), 1,12 (с, фильтруют и выпаривают до объемар .

1 л. После добавления 600 мл гекса- i 6, (), 2,50 (д, 2, J 4 Гц, на объем уменьшают до 600 мл в паро- пирана), 4,33 (м, 1, СдН пирана) J вой бане. Продукт кристаллизуют при 4,63 (м, 1, CgH пирана); 5,43 (м-.

713

С.Н нафталина); 5,57 (м, 1, CjH, нафталина); 5,76 (дд, 1, J 6 Гц, 10 Гц CjH нафталина)) 6,03 (д, 1, J 10 Гц С Н нафталина).

Стадия D: Получение 6/И/-Г2-/8 /S/-2 ,2 -диметш1бутирилокси-2 /S/ 6 /К/-диметил-1 , 2 , 6 , 7, 8 , в а/К/-гексагидронафтил-1 /5//-этил -4/R/-OKCH-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-пи- ран-2-она.

Раствор 2,7 г (5 ммоль) силилово- го простого эфира, 1,2 г (20 ммоль) уксусной кислоты и 4,7 г (15-ммоль) в 25 МП ТГФ перемешивают при окружающей температуре в течение 18 ч. Реакционный раствор разбавляют 300 мл простого эфира и про- мьгоают последовательно 2%-ным водным раствором НС1 и насыщенным соляным раствором. После сущки (сульфат магния) и фильтрации раствор вьшаривают с тем, чтобы получить 2,8 г оранжевого масла. Это масло подвергают хроматографии на колонне 6x15 см с си- ликагелем (230-400 меш или с размером частиц 0,068-0,037 мм). В результате элюирования при атмосферном давлении смесью ацетон-метилен хлорид (1:9 по объему) получали 1 г (48%) целевого соединения в виде бесцветного твердого вещества, которое подвергают кристаллизации из н-ВгС1- гексана, в результате чего получают бесцветное твердое вещество с т.пл. 135-138 С.

ЯМР (CDClj ),/ : 0,83 (т, 2, J 7 Гц, СН СНгССОг), 0,90 (д, 3, J 6, Гц, СзСНз нафталина), 1,07 (д, 3, J 6 Гц, нафталина); 1,12 (с, 6, (СПз)2ССО); 2,67 (м, 2, CjH. пирана); 4,36 (м, 1, С4Н пирана); 4,60 (м, 1, пирана); 5,37 (м, 1, CjH нафталина) ; 5,53 (м, 1, нафталина); 5,76 (дд, 1, J 10 Гц, CjH нафталина); 6,03 .(д, 1 Гц, С4Н нафталина).

Рассчитано: С 71,73, И 9,15.

Найдено: С 71,90, Н 9,54.

П р и м .е р 2. Получение 6/R/- t2- 8/S//2, 2 -диметилёутирилокси- /2- /5/,6/8/-диметил-1 , 2 , З , 4 , 4 a/S/ 5 , 6 , 7 , 8 , 8 а/-декагид- ронафтил-1 /S/ этил -4/К/-окси-3,4, 5,6-тетрагидро-2Н-пиран-2-она.

Стадия А. Получение 6/R/- 2-/8 / 8/окси-2 /S/6 /3/диметил-1 , 2 , 3 , 4 , 4 a/SA, 5 , 6 , 7 , 8, 8 &/S/1628 .

декагидронафтнл-1 /5//этил -4/R/-OK- си-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-пиран-2-она.

Раствор 2,0 г (6,2 ммоль) спирта из примера 1 (стадия А) в 100 мл

этилацетата подвергают гидрогенизации в присутствии окиси платины (1 г) при давлении 2,813 атм до тех пор, пока не будет зафиксировано выделение 2 моль-экв водорода. Кристаллы

0 удаляют фильтрацией, а фильтрат выпаривают до сухого состояния, в результате чего получают белое.твердое вещество (1,9 г), которое подвергают хроматографии на колонне 6x20 см с

5 силикагелем (230-400 меш или с размером частиц 0,068-0,037 мм). В результате элюирования при атмосферном давлении смесью ацетон-метиленхлорид (3:7 по объему получают 1,0 г (50%)

0 целевого соединения в виде бесцветного твердого вещества.

Аналитические пробы получают при помощи рекристаллизации порции этого материала из хлороформа, в результате чего Получают белое хпопкообраз- ное твердое вещество с т. пл. 166- 168 С.

Рассчитано: С 70,33, Н 9,94, 30 С.зН.О,

Найдено: С 69,97, Н 10,05.

Стадия В.Получение 6/R/t2-/8 /S/- -окси-2 /S/,6 /3/-диметил-1 , 2 ,

35 3, 4 , 4 a/S/, 5 , б , 7 , 8 , 8 а /5/-декагидронафтил-1 /5/-этил 4- /5/-/диметил-трет-бутилсилилокси/3, 4,5,6-тетрагидро-2Н-пиран-2-она.

Раствор спирта со стадии А (1,0 г,

40 3,1 г ммоль), имидазола (1,05 г,

15,4 ммоль) и трет-бутилдиметилхпор- силана (1,16 г, 7,7 ммоль) в 20 мл- N,N-димeтилфopмaмидa перемешивают при 20 С в атмосфере азота в течение

45 18 ч. Реакционный раствор разбавляют при помощи 200 мл простого эфира и промывают последовательно водой, 2%-ным водным раствором хлористоводородной кислоты и соляным раствором.

50 Эфирный раствор сушат над сульфатом магния и выпаривают, в результате чего получают белое твердое вещество (1,8 г), которое подвергают хроматографии на колонне 6x20 см с двуокисью

55 кремния (230-400 меш или с размером частиц 0,068-0,037 мм). В результате элюирования при атмосферном давлении смесью ацетон-метиленхлорид (1:19 по объему) получают 1,0 г (74%) целевого

HsC

НзС

где пунктирные линии X и двойные связи или две оди отличающийся

9131816210

соединения в виде белого твердого вещества с т. пл. 1 47-148°С.

Ра.ссчитано: С 68,44, Н 10,5.

.sio Найдено: С 68,64, Н 10,81. Стадия С. Получение 6/R/-{,2 8 /S //2, 2 -диметилбутирилокси/-2 /S/6 /8/-диметил-1 , 2, 3 , 4 , 4 а, 5 ,

6, 7, 8, 8 а /S/-дeкaгидpoнaфтил- I /о /1 / /т. / , и т л и ч а (и 1ц г. I-I V, .

-1 /8/ этил}-4/К//диметил-трет-бутш1-10 „ „„ение общей формулы

СИЛИЛОКСИ/-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-пиран-2-она.

Используя процедуру, описанную в примере 1 (стадия С), но применяя при этЬм аналог декагидронафтила со ста- 15 дии В примера 2 в качестве исходного материала, получают маслянистое соединение с 60%-ным выходом, которое непосредственно используют на следующей стадии без изучения его свойств.

Стадия D. Получение 6/R/- 2 f8СН

/S//2 , 2 -диметилбутирилокси/-2 /S/, 6 78/-диметил-1 , 2,-3 , 4, 4 а, /S/, 5, 6 , 7, 8, 8 а /S/- -декагидронафтил-1- /8//этил l|-4/R/- -окси-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-пиран 2- -она.

Аналогично примеру 1 (стадия D), но используя при этом аналог декагидронафтила со стадии С примера 2 в качестве исходного материала, получают целевое соединение с 94%-ным выходом. Аналитическая проба имеет т.пл, 159-160 С.

Рассчитано: С 71,05, Н 10,02.

C2sH4lOj

Найдено: С 70,88, Н 10,36.

Формула изобретения

Способ получения производных пира- нонов общей формулы

Hj,C И

где X и Z имеют указанные 20 подвергают взаимодействию бутилдиметилхлорсиланом в ле в инертной атмосфере п ной температуре в присутс зола, полученное при этом 25 тилдиметилхлорсилоксисоед лируют хлорангидридом кис лы

О

II

30

Н,С

jv. ,

в пиридине в инертной атм присут.ствии 4-пирролидинп

j качестве катализат-ора в р ле при с последующи силильНой группы путем пе реакционной смеси при ком пературе в тетрагидрофура

40 сутствии 3-х эквивалентов аммонийфторида и 4-х экви сусной кислоты на эквивал ного производного.

HsC

НзС

где пунктирные линии X и Z - две двойные связи или две одинарные связи, отличающийся тем, что

и т л и ч а (и 1ц г. I-I V, .

„ „„ение общей формулы

СНз

15

Hj,C И

где X и Z имеют указанные значения, 20 подвергают взаимодействию с трет- бутилдиметилхлорсиланом в. растворителе в инертной атмосфере при комнатной температуре в присутствии имида- зола, полученное при этом 4-трет-бу- 25 тилдиметилхлорсилоксисоединение аци- лируют хлорангидридом кислоты .формулы

О

II

Н,С

С1

jv. , 5

в пиридине в инертной атмосфере в. присут.ствии 4-пирролидинпиридина в

j качестве катализат-ора в растворителе при с последующим удалением силильНой группы путем перемешивания . реакционной смеси при комнатной тем- пературе в тетрагидрофуране. в при40 сутствии 3-х эквивалентов тетрабутил- аммонийфторида и 4-х эквивалентов уксусной кислоты на эквивалент силиль- ного производного.

Изобретение касается производных пиранонов о но НзС СН CH-J о х:г° (в частности общей формулы, где пунктирные линии X и Z - две двойные или две одинарные связи), которые проявляют антигиперхолестеролемическую активность и могут быть использованы в медицине. Цель - создание более активных веществ указанного класса. Получение новых производных пиранона ведут из трет-бутилдиме илхлорсилана и соответствующего пиринона в среде растворителя в инертной атмосфере при ;комнатной температуре в присутствии имидазола. Затем обрабатывают хлоран- гидридом кислоты в пиридине в инертной атмосфере в присутствии 4-пирро- лидинпиридина как катализатора в растворителе при . Далее удаляют силильную группу при перемешивании реакционной смеси в тетрагидрофуране в присутствии 3 эквивалентов на эквивалент силильного производного. В сравнении с известным мевиноли- ном новые вещества более активны в отношении ингибирования холестерина , плазмы крови. .. § О) 00 оо

Составитель Р.Марголина , Редактор М..Циткина Техред Н-.Глущенко Корректор М.Демчик

Заказ 2439/57 Тираж 372Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„, д. 4/5

.Производственно-полиграфическое, предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4