Способ определения антибиотической активности препаратов Советский патент 1987 года по МПК C12Q1/04 G01N33/48 

113

Изобретение относится к медицине, в частности к способам испытания химических соединений с использованием микроорганизмов и ферментов, и может быть применено в медицинской промышленности и медицине для определения .биологической активности низких концентраций антибиотиков.

Цель изобретения - повышение чувствительности способа при определении активности тетрациклина, окси- тетрациклина и рифампицина.

Поставленная цель достигается благодаря тому, что в качестве тест- организма используют периодическую культуру Photobacterium leignathi в стадии нарастания интенсивности свечения, а активность антибиотиков определяют по изменению интенсивности свечения после добавления в пробу антибиотика.

На чертеже показана зависимость изменения нарастания интенсивности свечения от концентрации добавляемого тетрациклина, окситетрациклина и рифампицина.

Способ осуществляется следующим образом.

Из культуры Photobacterium leignathi штамм 1715, выращенной в течение .ночи на твердой полусинтетической среде, делают засев в колбу объемом 250 мл, содержащую жидкую полусинтетическую среду, культивируют в течение 2 ч при 29°С на качалке до стадии экспоненциального нарастания интенсивности свечения, Затем 1 мл этой культуры разводят в 50 раз свежей полусинтетической средой и выдерживают еще 30 мин на качалке, дважды измеряя интенсивность люминесценции. Убедившись в высокой удельной скорости нарастания свеченияр используют данную культуру в качестве индикаторной.

5

0

Пробы культуры объемом 0,9 мл разливают по кюветам люминометра, регистрируют свечение от всех кювет (I,,), добавляют в кюветы по 0,1 мл стандартного раствора антибиотика (каждая концентрация в трех повторах). В три кюветы д.обавляют испытуемый препарат, активность которого нужно определить. Регистрируют свечение всех кювет спустя 30 мин с момента контакта антибиотика с тест-культурой () . Вычисляют отношение усредняют по повторностям и строят калибровочную зависимость по концентрациям стандартного препарата.

Определение активности испытуемого препарата проводят по калибровочному графику, на котором находят точку, соответствующую среднему значению

опустив перпендикуляр находят соответствующую концентрацию антибиотика,

испытуемого образца, а,

на ось абсцисс.

Активность тетрациклина и окситетрациклина можно определять в диапазоне 10 -10 ед/мл, -активность рифампицина - в интервале 10 - 2 ед/мл.

Формула и з.о б р е т е н и е

Способ определения антибиотической активности препаратов путем ин- кубации их с Photobacterium leignathi с последующей оценкой активности по .снижению интенсивности сбечения бактерий, отличающийся тем,-что, с целью повышения чувствительности при определении активности тетрациклина, окситетрациклина и рифампицина, используют периодичес- . кую культуру бактерий, а добавление препарата проводят в стадии нарастания свечения культуры.

2,0 1,8 i 1,6

1, f.2

a

0,002 0,004 q006 0,OOQ

0,5 /

Составитель Л, Сабурова Редактор И, Горная Техред В.Кадар Корректор А. Обручар

Заказ 4018/22 Тираж 499Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

E edf/i/J

, ед/мл

1,5 2

Изобретение относится к области медицины. Для повышения чувствительности способа при определении активности тетрациклина, окситетрациклина и рифямпицина в качестве тест-организма используют периодическую культуру Photobacterium leignathi в стадии нарастания интенсивности свечения. Активность антибиотиков определяют по иэмеиени интенсивности свечения после их добавления в пробу культуры. Активность тетрациклина и окситетрациклина определяют в диапазоне ед/мл, активность рифам- пицина-в интервале ед/мл. 1 ил. оэ о:) сд СП о: со