СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ Советский патент 1995 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и предназначено для диагностики злокачественнных новообразований различной локализации.

Целью изобретения является ускорение и исключение травматичности способа за счет определения в смыве с кожи содержания уроканиновой кислоты.

Способ осуществляется следующим образом.

В бюксе с определенным диаметром наливают 3 мл 0,02 М раствора калийфосфата буфера рН 7,2, плотно прижимают бюкс к передней поверхности предплечья и смывают плавными кругообразными движениями пот с поверхности кожи в течение 5-7 мин (рука до локтя должна быть вымыта с мылом за сутки до сбора пота). Полученный смыв прогревают 2-3 мин на кипящей водяной бане, охлаждают до комнатной температуры и добавляют в него 0,05-0,1 мл фермента уроканиназы с удельной активностью 150 нмоль/мг белка в 1 мин. На спектрофотометре ОФ-26 определяют плотность раствора при длине волны 277 нм. Смесь инкубируют при 37-38^оС в течение 15-20 мин и снова спектрофотометрируют, и при содержании уроканиновой кислоты менее 0,5 мкн/см² диагностируют злокачественное новообразование, а при содержании 0,6-1,5 мкг/см² и выше констатируют отсутствие злокачественного новообразования.

П р и м е р 1. Больная У-на. Поступила с предварительным диагнозом узловая мастопатия слева. Обследование на содержание уроканиновой кислоты на коже проведено следующим образом. В бюкс диаметром 35 мм наливают 3 мл 0,02 М калий-фосфатного буфера рН 7,2, плотно прижимают бюкс к передней поверхности предплечья и смыв производят кругообразными движениями в течение 5 мин. Полученный смыв прогревают 2 мин в кипящей водяной бане, охлаждают до комнатной температуры и в эту же пробирку добавляют 0,1 мл раствора уроканиназы с удельной активностью 150 нмоль/мг белка в 1 мин. На спектрофотометре определяют плотность раствора при 277 нм (Е₁ 0,728). Пробу инкубируют при 37^оС в течение 20 мин и снова спектрофотометрируют (Е₂-0,590).

Количество уроканиновой кислоты, выраженное в микрограммах на 1 см² кожи, рассчитывают по формуле
x где Е₁-Е₂ разность экстинций до и после инкубации; раствор 22 мкг уроканиновой кислоты в 3 мл при рН-7,2 имеет плотность 1,00 (коэффициент молярной экстинции 18800);
S площадь поверхности кожи, захватываемая бюксом (S π r², диаметр бюкса 35 мм, r 17,5 мм 1,75 см; π r² 1,75² + +3,14 9,62 см²); следовательно,
x 0,31
Содержание уроканиновой кислоты на поверхности кожи равно 0,31 мкг/см² кожи. По результатам определения поставлен вопрос о неточности предварительного диагноза, что вследствие подтвердилось гистологическим исследованием N 60625-30 инфильтрующая карцинома.

П р и м е р 2. Больная М-ва. Диагноз рак молочной железы справа. Обследование на содержание уроканиновой кислоты проведено следующим образом. В бюкс с диаметром 35 мм наливают 3 мл 0,02 М калий-фосфатного буфера рН-7,2; плотно прижимают бюкс к передней поверхности предплечья и смыв производят кругообразными движениями в течение 7 мин. Полученный смыв прогревают 3 мин в кипящей водяной бане, охлаждают до комнатной температуры в эту же пробирку добавляют 0,1 мл раствора уроканиназы с удельной активностью 150 нмоль/мг белка в 1 мин. На спектрофотометре определяют плотность раствора при 277 нм (Е₁-0,638). Пробу инкубируют при 37^оС в течение 15 мин и снова спектрофотометрируют (E₂-0,420). Рассчитывают количество уроканиновой кислоты:
x 0,50
Содержание уроканиновой кислоты 0,50 мкг/см² кожи. Диагноз подтвержден гистологическим исследованием.

Количественное определение уроканиновой кислоты предлагаемым способом занимают 40 мин.

Результаты обследования 67 онкологических больных (рак толстой кишки, рак тонкой кишки, рак молочной железы, рак желудка) показали, что содержание уроканиновой кислоты на поверхности кожи не превышает 0,5 мкг/cм² у 62 больных.

У 84 обследованных без опухолей содержание уроканиновой кислоты на всех случаях было выше 0,6 мкг/см². Разница показаний у больных со злокачественными опухолями (максимальное значение 0,5 мкг/см²) и у обследованных без опухолей (минимальное значение 0,6 мкг/см²) статистически достоверна (р<0,05).

Как показано выше, процент выявления случаев со злокачественными новообразованиями различной локализации с помощью определения содержания уроканиновой кислоты составляет 92% (в прототипе 90%).

Изобретение относится к медицине и касается диагностики злокачественных новообразований разной локанизации. Цель изобретения - ускорение способа и исключение травматичности за счет определения в смыве с кожи содержания уроканиновой кислоты. Для этого полученный смыв с кожи пациента прогревают 2-3 мин в бюксе с 0,02 М раствором калий-фосфатного буфера pH 7,2 на кипящей водяной бане, охлаждают и добавляют в него 0,05-0,1 мл фермента уроканиназы с удельной активностью 150 нмоль/мг белка в 1 мин. На спектрофотометре ОФ-26 определяют плотность раствора при длине волны 277 нм. Смесь инкубируют при 37-38°С 15-20 мин и вновь спектрофотометрируют. При содержании уроканиновой кислоты менее 0,5 мкг/см² диагностируют злокачественное новообразование, а при показателях от 0,6 до 1,5 мкг/см² и выше констатируют отсутствие злокачественного новообразования.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ путем биохимического исследования кожи, отличающийся тем, что, с целью ускорения и исключения травматичности способа, смывание с поверхности участка кожи проводят буферным раствором, в полученном растворе определяют содержание уроканиновой кислоты с помощью уроканиназы и при значении этого показателя менее 0,5 мкг/см² кожи диагностируют злокачественное новообразование.