Способ получения 5-винил-2-тиооксазолидона из семян рапса Советский патент 1987 года по МПК C07D207/00 

113

Изобретение относится к селекции, животноводству, кормопроизводству, маслоперерабатывающей промышленности ветеринарной и медицинской санитарии

Целью изобретения является упроще- ние способа.

Способ заключается в том, что предварительно обезжиренные диэтило- вым эфиром измельченные семена рапса гидролизутот в присутствии фермента мирозиназы в растворе фосфатного буфера при рН 7 и при температуре 60°С до максимального выделения целевого продукта.

Выбранные условия гидролиза являются оптимальными для получения 5-ви- нил-2-тиооксазолидона и позволяет исключить образование примесей нитрилоЁ и изотиоцианатов, затрудняющих очист- ку целевого продукта.

Оптимальные условия для очистки эфирного раствора, содержащего 5-ви- нил-2-тиооксазолидон, подобраны методом хроматографии на двух колонках, наполненных силнкагелем марки КСК отечественного производства. Силика- гель предварительно обрабатывают ) 1%-ным водным раствором грщроксида натрия.с последующей промывкой дис- тиллированной водой и активацией его при 120°С в течение 8 ч.

Важной характеристикой является также размер частиц силикагеля. Пред- лагаемьш размер частиц силикагеля 0,25-0,1 мм является оптимальным, так как при более крупных частицах силикагеля разделение не происходит, а более мелкие частицы замедляют процесс разделения и увеличивают расход элюента. Двухкратное разделение смеси, содержащей целевой продукт, на фракции с проверкой чийтоты и количества целевого продукта на спектрофотометре позволяет получить чистый целевой продукт. При пропускании через первую колонку удается избавиться от основных примесей, а при пропускании фракций через вторую колонку, содержащих целевой продукт, удается Получить чистый продукт, который способен закристаллизоваться при охлаждении. Даже небольшие количества примесей препрятствуют образованию кристаллов, а полученное при этом масло трудно поддается идентификации ,

Прим ер, 200 г обезжиренной диэтиловым эфиром муки рапса помещают

Q 5

n

5

5

0

5

0

5

в стакан, прибавляют водньш раствор фермента мирозиназы, прибавляют ... 250 мл фосфатного буфера, поддерживающего гидролиз при рН 7. Полученную вязкую кашу ставят на термобаню при 60°С на 2 ч при периодическом перемешивании. Прогидролизованную массу помещают в большом бумажном пакете в аппарат Сокслета и проводят экстракцию эфиром, свободным от перекисей на протяжении 5-6 ч. Эфирный раствор упаривают при 45°С на водяной бане. Полученную массу растворяют в 5 мл эфира и пропускают через колонку (400 мм), заполненную си- ликагелем марки KCIC (фракция 0,25- 0,1 мм, водная - щелочная), активированным предварительно при 120°С 8 ч. Элюирование проводят эфиром. Сначала идет прозрачный раствор, потом интенсивно-желтые, светло-желтые и наконец практически прозрачные фракции. Все фракции проверяют на спектрофотометре СФ-26, для чего из пробирок отбирают зтробы одну каплю каждой полученной фракции разбавляют эфиром в кювете. Замеры проводят при трех длинах волн 230,248 и 266 нм. При этом отбирают фракции, дающие пик при 248 нм, и отбрасывают все остальные. Из 12 полученных фракций отбрасывают первые три, объединяю с четвертой по девятую и остальные отбрасывают. Объединенные растворы упаривают, растворяют в 5 мл эфира, свободного от перекисей, и пропускают еще раз через другую такую же колонку. Все фракции проверяют на спектрофотометре, как и в предьщущем этапе. Фракции, дающие пик при 248 нм, объединяют, а остальные отбрасывают. Таким образом, удается разделить эфирный раствор на чистые фракции целевого продукта, которые упаривают, полученную маслянистую массу растворяют в 5 мл эфира и этот раствор погружают в охладительную смеси из соли и льда при -10°, оставляя: в морозильной камере холодильника на 48 ч. В результате медленного испарения эфира при низкой температуре на стенках пробирки образуются большие прозрачные кристаллы (пластинки) ,которые повторно Крис тализуют из эфира, При этом из раствора выпадают белые кристаллы с температурой плавления 49-50 С Л)Ь(ход 0,125г 60%от содержащегося в семенах ,Макси1чум поглощения. 248 нм (f(g 4,23).

313

Экономический эффект от применения предлагаемого способа позволит поставить точные методы контроля его количества в семенах и кормах (жмыхе, шроте), выводить новые сорта рапса с минимальным содержанием 5-винил-2- тиооксазолидона и контролировать уровень его в продуктах питания (молоко, яйца, рапсовое масло). Эффективность предлагаемого способа состоит также в возможности непосредственного изучения влияния целевого продукта на организм животных, что позволит определить его вредное воздействие.на организм, достоверно установить предельно допустимую концентрацию и безопасн5та норму потребления для животных, позволит обезопасить здоровье человека и одновременно широко использовать высокопродуктивные и перспективные сорта рапса в сельском хозяйстве.

Формула изобретения

Способ получения 5-винил- -тиоок- сазолидона из семян рапса, предусмат ривающий ферментативный гидролиз исходного сырья до максимального выде- ления целевого продукта, экстракцию диэтиловым эфиром полученного гидро- лизата и его о чистку, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве исходного сырья используют предварительно обезжиренные диэfилoвьw эфиром измельченные семена рапса, процесс ферментативного гидролиза ведут в присутствии фосфатного буфера при рН 7 и температуре 60°С с последующей очисткой целевого продукта пропусканием его эфирного раствора через две колонки , заполненные силикагепем с размером частип от 0,25 до О,1 мм.

Изобретение относится к селекции, животноводству, кормопроизводству, маслоперерабатывающей промышленности, ветеринарной и медицинской: санитарии, где 5-винил-2-тиооксазоли- дон используется в качестве зталона для обнаружения его в кормах и пищевых продуктах. Целью изобретения является упрощение способа. Способ за- . ключается в том, что предварительно обезжиренные диэтиловым эфиром измельченные семена рапса гидролизуют в присутствии фермента мирозиназы в растворе фосфатного буфера при рН 7 и при температуре до максимального выделения целевого продукта. Полученный гидролизат после экстракции диэтиловым эфиром подвергают очистке для выделения целевого продукта пропусканием его эфирного раствора через две колонки, заполненные сили- |кагёлем. Выход целевого продукта .составляет 60%. (Л со ел ел 9д