Способ получения производных цефалоспорина Советский патент 1987 года по МПК C07D501/46 A61K31/546 

Изобретение относится к области производных цефалоспорина, в частности к способам получения новых производных цефалоспорина общей формулыS ст)

ij |-c-coNH-r- eii

QR сНз

где R - метил, этил, изопропил или аллил,

JJ C-COOC H

I 2 ОН

нЪс

10

TrHN

Tn

AS/ N

OH

OR

TrHN- T

C-COOH

OR

rHN S

N-r-CЛ

coOCH(Ph)2 .

S C-CONH-r-f

р -ЪГх|ЛсН2С1 COOCH(

laai

9

OR

N- C-CONH-T-r

.J ,

ЪГ 0

2. OR

COOCH(Ph

C-CONH

N

г OR

S

проявляющих высокую антибактериальную активность, которые могут быть использованы в медицине.

Целью изобретения является создание на основе известных методов способа получения новых соединений общей формулы I, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Способ осуществляют согласно следующей схеме:

11

in

IV

OR

VI

Vll

1.

COOCH(Ph)2

НзС-iQ

2. ДЕБЛОКИРОВАНИЕ

T-r 1 ©x )ij

coo CH

Реакцию соединения VII с N-метил- пирролидином проводят в неводном органическом растворителе, таком как метиленхлорид, хлороформ, диэтиловый эфир, гексан, этилацетат, тетрагидро фуран, ацетонитрил и т.п., или смеси таких растворителей, при температуре от -10 до +50 С, предпочтительно при комнатной температуре. На один моль соединения VII следует использовать не менее одного моля N-метилпирроли- дина; предпочтительно использовать 50-100%-ный избыток N-метилпирроли- дина.

Карбоксил-защитные группы, при- годные для использования в указанной реакции, включают аралкильные группы такие как бензил, п-метоксибензил, п-нитробензил и дифеиилметил (бенз- гидрил); алкильные группы, такие как трет-бутил; галоалкильные группы, такие как 2,2,2-трихлорэтил, и другие карбоксил-защитные группы. Все они легко удаляются при обработке кислотой. Особенно предпочтительны- ми карбоксил-защитными группами являются бензгидрил и трет-бутил.

Амино-защитные группы, пригодные для использования в реакции, включаю тритил и ацильные группы, такие как хлорацил. Предпочтительны амино-за- щитные группы, которые легко удаляются при обработке кислотой, например, тритил.

Синтез 1:

N-Г

дТ

TrHN S

с-соос н

N

OR

Этиловый эфир (г)-2-метоксиимино- -2-(2-тритиламинотиазол-4-ил) уксусной кислоты (III а).45

Смесь этилового эфира (Z)-2-гидpoк сиимино-2-(2-тритиламино-тиазол-4- -ил) уксусной кислоты (II) (5,00 г, 10,9 ммоль), CHjJ (2,04 мл, 32,8ммол и K,jCO (4,54 г, 32,8 ммоль) в сухом 50 диметилсульфоксиде (DMCO) (100 мл) перемешивают при комнатной температуре на протяжении ночи, а затем выливают в воду (250 мл). Образуюшийся осадок собирают фильтрованием, про- 55 мывают водой и сушат с получением целевого соединения (5,15 г, количественный выход). Т.пл. (с разл.).

03029

W

ЯМР:5(СВС1 ), 1,32 (ЗН,т); 3,98 (ЗН, с); 4,30 (2Н, кв); 6,42 (1Н, с); 7,2 (1Н, м); 7,25 (15Н, с).

Соединения Illb, IIIc и Illd получают по той же общей методике, но с заменой метилиодида подходящим иодидом. Их показатели приведены в табл. 1.

Синтез 2:

С-СООН IV

N

OR,

5 0 5

0

5

0

5

0 5

(г)-2-Метоксиимино-2-(2-тритш1- аминотиазол-4-ил) уксусная кислота (IVa).

Сложньй этиловый эфир Ilia, полученный в синтезе 1 (6,00 г, 12,7 ммоль) в этаноле (120 мл), обрабатывают 2н. NaOH (12,7 мл) при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь доводят до рН 8 добавлением порошкового сухого льда, и растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде (100 мл), и раствор подкисляют добавлением 1н. НС до рН 2, а затем экстрагируют этилацетатон ( мл). Скомбинированные экстракты промывают насыщенным раствором NaCl, осушают и упаривают. Остаток кристаллизуют из этилацетата - гексана с получением 5,56 г (выход 98%) целевого продукта. Т.Ш1. 138-143 С (с разл.). ЯМР: В(свС1з), млн : 3,89 (ЗН, с); 6,52 (1Н, с); 7,2 (15Н, с).

Соединения IVb, IVc и IVd получают по этой же общей методике. Их характеристика дана в табл. 2.

Синтез 3.

Бензгидриловый эфир 3-гидроксиме- тил-7-фенилацетамидо-3-цефем-4-к арбо- новой кислоты (VIII).

К перемешиваемой суспензии фосфатного буфера (рН 7, 162,5 ил) и пшеничных отрубей (20 г сухого вещества) при комнатной температуре добавляют натриевую соль 7-фенилацетамидоцефа- лоспорановой кислоты (5 г, 12,1 ммоль) в виде одной порции. Протекание реакции контролируют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления до окончания гидролиза (5ч). Суспензию фильтруют для удаления пшеничных отрубей, и фильтрат охлаждают до 5-10 С для проведения эксрактивной этерификации. К охлаждаемому раствору добавляют метиленхлорид (32 мл) с последующим добавлением 0,5 М раствора дифенилдйазометана в метилеихлориде (24 мл). Затем рН доводят до 3,0 добавлением 28%-ной фосфорной кислоты. Спустя 1 ч реакционной смеси дают возможность прогреться до 20 С. Медленно добавляют гептан (56 мл), и целевой кристаллический продукт выделяют фильтрованием. Выход целевого продукта 3,0 г (50%).

Синтез 4,

Бензгидриловый эфир 7-амино-З- -хлорметил-З-цефем-4-карбоновой кислоты (V).

К суспензии РСЕ (7,3 г, 40 ммоль) в СН CI (100 мл) добавляют пиридин (3,2 г, 40 ммоль), и смесь перемешивают 20 мин при 20°С. К смеси добавметилсилил)-ацетамидом (БСА, 4,00 мл, 15 16,6 ммоль) при комнатной температуре в течение 50 мин, получая прозрачный раствор. К этому раствору добавляют раствор хлорангидрида кислоты, который получают из (Z)-2-MeT- 20 оксиимино-2-(2-тритиламинотиазол-4- -Ш1)-уксусной кислоты (IVa) (2,04 г, 4,60 ммоль) и РСЕ(1,15 г, 5,52 ммоль) в метиленхлориде (20 мл) , Смесь перемешивают при комнатной темляют бензгидриловый эфир 3-гидрокси- 25 пературе 30 мин, выливают в холодную метил-7-фенш1ацетамидо-5-цефем-4- у (200 мл) и экстрагируют этилаце30

-карбоновой кислоты, полученный по методике синтеза 3 (5,1 г, 10 ммоль), при перемешивании при -40°С в виде одной порции. Смесь перемешивают при -10°С 15 мин и оставляют на 7 ч при (-10) - (-15)°С. К охлажденному раствору (-20°С) добавляют пропан-1,3- -диол (10 мл), и смесь оставляют на 16 ч при -20°С, а затем перемешивают 20 мин при комнатной температуре. Полученный раствор промывают льдом- водой (220 мл) и насьш1енным водным раствором NaCl (10 мл), сушат над MgSO и концентрируют в вакууме. Ре- зиноподобный остаток (12 г) растворяют в смеси CHCtj и н-гексана (2:1) и хроматографируют с использованием колонки с силикагелем (200 г) и тем же растворителем в качестве элюента. Содержащие целевое соединение фракции упаривают в вакууме, и остаток растирают с н-гек- саном, получая целевой продукт (2,1 г, 51%). Т. пл. 110 С (сразл.)

ИК-спектр: У, КВг: 3400, 2800, 1785, 1725 смтатом (З ЮО мл). Скомбинированные экстракты промывают водным NaCl, сушат и упаривают. Остаточный сироп (4 г) хроматографируют на силикагеле (150 г) в колонке элюированием смесями 10:1 и 3:1. толуола и этилацетата, последовательно. Фракции, содержащие требуемое соединение, комбинируют и 35 упаривают с получением 2,61 г (68%) соединения VI в виде аморфного порошка.

40

ОН

1/,

265 нм; Е, 160

ЮМ

УФ-спектр: А

-dg -«-COCfa 5ШР: 5(ОМСО„,„-, ), млн

МАИ

ЯМР: S (CDClj), млн- : 3,50 (2Н, с); 4,02 (ЗН, с); 4,33 (2Н, с); 4,98 (1Н, д); 5,87 (1Н, кв); 6,65 (Н, с); 6,90 (1Н, с); 7,3 (25Н, м).

В. Бензгидриловый эфир 3-иодоме- тил-7- (г)-2-метоксиимино-2-(2-три- , тш1аминотиазол-4-ил)ацетамидо -3-це- фем-4-карбоновой кислоты (Vila).

Смесь 3-хлорметилового производного Via (1,50 г, 1,79 ммоль) и NaJ (1,34 г, 8,93 ммоль) в метил- этилкетоне (30 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение часа После отгонки растворителя остаток растворяют в этилацетате (100 мл) и промывают водой, водным Na S Си водным NaCl, сушат и упаривают с получением названного целевого соединения Vila (1,47 г, 89%) в виде аморфного порошка.

3,69 (2Н, с); 4,43 (2Н, с); 5,09 (Ш, д, ,5 Гц); 5,24 (Ш, д, ,5 Гц); 6.87 (1Н, с); 7,3 (10, м).

Пример 1. 7-(г)-2-Метокси- имино-2(2-аминотиазол-4-ил)ацетамидо- -3- (-метил-1-пирролидиний)метил - -З-цефем-4-карбоксилат (1а).

А. Бензгидриловьм эфир 3-хлорме- тил-7-(Е)-2-метоксиимино-2-(2-три- тиламинотиазол-4-ил)ацетамидо -3- -цефем-4-карбоновой кислоты (На).

Бензгидриловый эфир 7-амино-З- -клорметил-3- цефем-4-карбоновой кислоты, полученный по методике синтеза 4 (2,29 г, 5,52 ммоль), в СН CN (57 мл) обрабатывают бис- (триметилсилил)-ацетамидом (БСА, 4,00 мл, 16,6 ммоль) при комнатной температуре в течение 50 мин, получая прозрачный раствор. К этому раствору добавляют раствор хлорангидрида кислоты, который получают из (Z)-2-MeT- оксиимино-2-(2-тритиламинотиазол-4- -Ш1)-уксусной кислоты (IVa) (2,04 г, 4,60 ммоль) и РСЕ(1,15 г, 5,52 ммоль) в метиленхлориде (20 мл) , Смесь перемешивают при комнатной температуре 30 мин, выливают в холодную у (200 мл) и экстрагируют этилаце

татом (З ЮО мл). Скомбинированные экстракты промывают водным NaCl, сушат и упаривают. Остаточный сироп (4 г) хроматографируют на силикагеле (150 г) в колонке элюированием смесями 10:1 и 3:1. толуола и этилацетата, последовательно. Фракции, содержащие требуемое соединение, комбинируют и упаривают с получением 2,61 г (68%) соединения VI в виде аморфного порошка.

ЯМР: S (CDClj), млн- : 3,50 (2Н, с); 4,02 (ЗН, с); 4,33 (2Н, с); 4,98 (1Н, д); 5,87 (1Н, кв); 6,65 (Н, с); 6,90 (1Н, с); 7,3 (25Н, м).

В. Бензгидриловый эфир 3-иодоме- тил-7- (г)-2-метоксиимино-2-(2-три- тш1аминотиазол-4-ил)ацетамидо -3-це- фем-4-карбоновой кислоты (Vila).

Смесь 3-хлорметилового производного Via (1,50 г, 1,79 ммоль) и NaJ (1,34 г, 8,93 ммоль) в метил- этилкетоне (30 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение часа После отгонки растворителя остаток растворяют в этилацетате (100 мл) и промывают водой, водным Na S Си водным NaCl, сушат и упаривают с получением названного целевого соединения Vila (1,47 г, 89%) в виде аморфного порошка.

71303029

ЯМР: S(CDCl), мли : 3,55 (2Н,

АВкв); 4,00 (ЗН, с); 4,25 (2Н, с);

4,97 (1Н, д); 3,80 (1Н, кв); 6,65

(1Н, с); 6,90 (Ш, с); 7,3 (25Н, м). С. 7-(Z)-2-MeTOKCHHMHHo-2-(2-аминотиазол-4-ил)ацетамидо -3-(1-метил-1-пирролидиний)метил -3-цефем-4-карбоксилат (1а),

Смесь соединения Vila (4,5 г,

4,83 ммоль) и N-метилпирролидина

fO

н

(0,65 мл, 6,28 ммоль) в (45 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 20 мин. К смеси добавляют эфир (300 мл) для выделения четвертичной соли заблокированного цефалоспорина, который собирают фильтрованием и обрабатывают 90%-ной трифторуксусной кислотой (ТФК) (40 мл) при комнатной темпераК перемешиваемому раствору 20,4 i (21,9 ммоль) соединения Vila в 150 мл сухого метиленхлорида добавляют 2,42 г (28,5 ммоль) 1-метилпирроли- дина в виде одной порции при комнат- ной температуре. Смесь перемешивают 5 мин и выливают в 1000 мл эфира при интенсивном перемешивании с образованием осадка, который отфильтровывают, промывают эфиром ( мл) и сушат в вакууме с получением 19,3 г блокированного продукта в виде бледно-желтого порошка. ИК-спектр: V Д;, ,

см : 3400, . J5 1780 (с), 1740, 1675, 1530.

ТСХ: растворитель - этанол/СНСГ, 1:3, ,30 (R 0,95 для соединения Vila).

Твердое вещество растворяют в туре в течение часа. Затем смесь упа-20 185 мл смеси трифторуксусной киспо- ривают при пониженном давлении и тем- ты и воды (99:1), перемешивают в те- пературе ниже 20°С.. Остаток растирают чение часа при комнатной температуре с эфиром, получая соль ТФК соединений и концентрируют до 30 мл при темпера- la (2,40 г), которую растворяют в туре ниже 10°С. Концентрат выливают метаноле (5 мл) и обрабатывают Ш 25 в 1000 мл эфира при энергичном перераствором натрий-2-этилгексоата (НЭГ мешивании с образованием осадка, ко- в этилацетате (8 мл) при комнатной торый отфильтровывают, промывают эфи- температуре в течение 30 мин. После ром (5it40 мл) и сушат в вакууме с добавления этилацетата (100 мл) об- получением 10,6 г бледно-желтого по- разующийся осадок (1,94 г) собирают 30 рошка. Порошок растворяют в 20 мл фильтрованием. Анализ с помощью жид- метанола и раствор фильтруют. К филь- костнрй хроматографии высокого давле- трату добавляют 45 мл 0,8 М НЭГ в ния (ЖХВД) показывает, что сырой этилацетате. Результирующую суспензию продукт имеет чистоту 7% при соотно- выливают в 400 мл этилацетата и фильт- шении между & -изомером и д -изомером 35 руют с получением 8,08 г твердого ве- 1:8. Очистку продукта с помощью ЖХВД щества, которое является смесью целе- повторяют трижды (Лихросорб RP-18, вого соединения и соответствующего мл), элюирование - 5%-ным вод- д-изомера (&.Vc. l:8) по данным

ЖХВД-анализа (Лихросорб RP-18, 10- 40 15% метанола, в 0,0 М фосфатном буным СНдОН или 0,01 М аммоний-фосфатным буфером (рН 7,2), содержащим 5% CHjOH, с получением 35 мл (1,5%) целевого продукта в виде бесцветного порошка. Оцениваемая чистота (ЖХВД) 90%. Т.пл. (с разл.),

ИК-спектр: V , см : 1770,

1660, 1620.

УФ-спектр: (фосфатный буфер, рН 7), нм, (Е): 235 (16200), 258 (15400),

ЯМР: S(D,0), млн- : 2,31 (4Н, м); 3,08 (ЗН, с); 3,63 (4Н, м); 4,09 (ЗН, с); 5,43 (1Н, д, ,8 Гц); 5,93 (Ш, д); 7,08 (1Н, с).

П р и м е р 2. 7-(г)-2-Метокси- имино-2-(2-аминотиазол-4-ил)-ацет- амидо -3- (I -метил-1 -пирролидиний)- метил) -З-иефем-4-кпрбоксилат ( I а) .

фере, рН 7). Второй опыт на 28,9 г ( ммоль) соединения Vila дает 16,0 г сырого продукта ( /Ci l:8), Выделение целевого л-изомера из

45 скомбинированного сырого продукта (24,08 г) с использованием препаративной ЖХВД (Система 500, фирма Уотерс Ассошиэйтс, ПрепПАК 500/С,/ , 5-10% СИ ОН) дает 769 мг соединения

50 Га.

П р и м е р 3. 7-(Z)-2-Meтoкcи- имино-2-(2-(2-аминотиазол-4-ил)ацет- амидо -3- (1-метил-1-пирролидиний)- 55 метил -3-цефем-4-карбоксилат (Та),

. Проводят серию экспериментов для определения влияния растворителя, количества растворителя и времени реакции на выход соединения Та и от8

К перемешиваемому раствору 20,4 i (21,9 ммоль) соединения Vila в 150 мл сухого метиленхлорида добавляют 2,42 г (28,5 ммоль) 1-метилпирроли- дина в виде одной порции при комнат- ной температуре. Смесь перемешивают 5 мин и выливают в 1000 мл эфира при интенсивном перемешивании с образованием осадка, который отфильтровывают, промывают эфиром ( мл) и сушат в вакууме с получением 19,3 г блокированного продукта в виде бледно-желтого порошка. ИК-спектр: V Д;, ,

см : 3400, . 1780 (с), 1740, 1675, 1530.

фере, рН 7). Второй опыт на 28,9 г ( ммоль) соединения Vila дает 16,0 г сырого продукта ( /Ci l:8), Выделение целевого л-изомера из

45 скомбинированного сырого продукта (24,08 г) с использованием препаративной ЖХВД (Система 500, фирма Уотерс Ассошиэйтс, ПрепПАК 500/С,/ 5-10% СИ ОН) дает 769 мг соединения

50 Га.

П р и м е р 3. 7-(Z)-2-Meтoкcи- имино-2-(2-(2-аминотиазол-4-ил)ацет- амидо -3- (1-метил-1-пирролидиний)- 55 метил -3-цефем-4-карбоксилат (Та),

. Проводят серию экспериментов для определения влияния растворителя, количества растворителя и времени реакции на выход соединения Та и от91303029 10

ношения в продукте реакции. Об- ЯМР: ё (CDC1 ), млн ч : 1,40 (ЗН, щая методика-сводится к следующему. т, ); 3,53 (2Н, АВкв., 2-СН);

К суспензии З-иодометилового про- изводнох о Vila (А5 мг, 0,048 ммоль) в указанном количестве указанного растворителя добавляют раствор N-ме- тилпирролидина (0,01 мл, 0,097 ммоль)

4,37 (2Н, с, -CH,jC); 4,60 (2Н, кв., -CHjCHj); 4,90 (1Н, д, 6-Н); 5,89 (1Н, д 7-Н); 6,88 (1Н, с, Н тиазола) 6,91 (1Н, с, СН бензгидрила).

В. Дифенилметиловый эфир 7-(Z)- -2-этоксиимино-2-(2-тритиламиноти- азол-4-ш1)ацетамидо -3-йодометил-3в эфире (0,1 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в теВ. Дифенилметиловый эфир 7-(Z)- -2-этоксиимино-2-(2-тритиламиноти- азол-4-ш1)ацетамидо -3-йодометил-3чение указанного периода. Реакцион- 10 -цефем-4-карбоновой кислоты (VII).

ную смесь разбавляют эфиром (5 мл) и результирующий осадок собирают фильтрованием и смешивают с 90% ТФК. Смесь перемешивают в течение часа и упаривают до сухого остатка при пониженном давлении и температуре ниже 20°С, получая целевой продукт. Отношение uVu для продукта определяют с помощью ЖХВД (Лихросорб RP-I8 ; дои и насыщенным водным NaCl, сушат подвижная фаза - 0,01 М аммоний-фос- 20 над MgSO и упаривают с получением фатный буфер (рН 7,2), содержащий 1,04 г (89%) соединения VII. 15% СН ОН; время удерживания, 6,60 мин, Д - 5,56 мин). Выход продукта и отношение изомеров для

Смесь соединения VIb примера 4А (1,07 г, 1,25 ммоль) и NaJ (562 мг, 2,75 ммоль) в ацетоне (20 мл) перемешивают в течение часа. Смесь филь 5 труют, фильтрат выливают в воду и экстрагируют этилацетатом.

Органический слой последовательн . промывают 5%-ным водным , во

ЯМР: S(CDClj), 3,55 (2Н, кв., 2-СН); 4,27(2Н, с, СН,-1); 5,02 (1Н, д, 6-Н); 5,87 (1Н, д, 7-Н 6,68 (1Н, с, Н тиазольного кольца); 6,93 (1Н, с, СН бензгидрила).

каждого эксперимента приведены в табл. 3.

П р и м е р 4. 7-(г)-2-Этокси- имино-2-(2-аминотиазол-4-ил)ацетам

(1-метил-1-пирролидиний)мет -З-цефем-4-карбоксилат (1).

А. Бензгидриловый эфир 3-хлорме- ТШ1-7-(г)-2-этоксиимино-2-(2-три- тиламинотиазол-4-ил)ацетамидо -3- -цефем-4-карбоновой кислоты (VI).

К раствору (г)-2-этоксиимино-2- -(2-тритиламинотиазол-4-ил)-уксусной кислоты (IV) (1,095 г, 2,4 ммоль) в

Смесь соединений VIIb примера 4В (333 мг, 0,35 ммоль) и N-метилпирро- лидина (60 мг, 0,7 ммоль) в ,j

(5 мл) перемешивают в течение полу- 35 часа при комнатной температуре, а затем упаривают в вакууме. Остаток промывают эфиром и растворяют в 90%-ной водной ТФК. После стояния в течение получаса при комнатной температуре дихлорметане (20 мл) добавляют пяти- 0 смесь концентрируют при пониженном хлористый фосфор (500 мг). После пе- давлении. К концентрату добавляют ремешивания в течение часа при ком- эфир для отделения четвертичного про- натной температуре смесь в виде одной дукта, который собирают фильтровани- порции добавляют к охлаждаемому на g „ растворяют в небольшом количе45 стве метанола. Раствор хроматографи- . руют в колонне НР-2 (40 мл). Элю- ирование 30%-ным водным с последующей лиофилизацией дает 0,062 г смеси изомеров А и л ( :1) . 50 Смесь очищают с помощью ЖХВД (Лих /inn ч Росорб RP-18, 8300 мм, 15% метаэкстрагируют с помощью СНСЦ (100 мл). и .целевой Г -изомер (Ib) вьще- Экстракт промывают водой, сушат над бледно-желтого порошка MgSO и упаривают при пониженном дав- 4 9 мг С2 77) лении.55

Остаток хроматографируют в Колонке

на силикагеле. Элюирование CHCt дает УФ-спектр:Л окс (фосфатный буфер, названное соединение VIb в виде рН 7), нм, (): 235 (15000) 258 аморфного порошка, 1,76 г (86%). (14000).

льде раствору бензгидрилового эфира 7-амино-3-хлорметш1-3-цефем-4-карбо- новой кислоты (1,083 г, 2,4 мoль) и БСА (1 мл) в дихлорметане (20 мл). После перемешивания в течение получаса реакционную смесь выливают в 10%-ный водный NaHCO. (200 мл) и

О

ЯМР: ё (CDC1 ), млн ч : 1,40 (ЗН, т, ); 3,53 (2Н, АВкв., 2-СН);

4,37 (2Н, с, -CH,jC); 4,60 (2Н, кв., -CHjCHj); 4,90 (1Н, д, 6-Н); 5,89 (1Н, д 7-Н); 6,88 (1Н, с, Н тиазола); 6,91 (1Н, с, СН бензгидрила).

В. Дифенилметиловый эфир 7-(Z)- -2-этоксиимино-2-(2-тритиламиноти- азол-4-ш1)ацетамидо -3-йодометил-3-цефем-4-карбоновой кислоты (VII).

дои и насыщенным водным NaCl, сушат над MgSO и упаривают с получением 1,04 г (89%) соединения VII.

Смесь соединения VIb примера 4А (1,07 г, 1,25 ммоль) и NaJ (562 мг, 2,75 ммоль) в ацетоне (20 мл) перемешивают в течение часа. Смесь филь- труют, фильтрат выливают в воду и экстрагируют этилацетатом.

Органический слой последовательно промывают 5%-ным водным , водои и насыщенным водным NaCl, сушат над MgSO и упаривают с получением 1,04 г (89%) соединения VII.

ЯМР: S(CDClj), 3,55 (2Н, кв., 2-СН); 4,27(2Н, с, СН,-1); 5,02 (1Н, д, 6-Н); 5,87 (1Н, д, 7-Н); 6,68 (1Н, с, Н тиазольного кольца); 6,93 (1Н, с, СН бензгидрила).

С. 7-(2)-2-Этоксиимино-2-(2-ами- нотиазол-4-ил)ацетамидо -3-(1-метил- 1-пирролидиний)метил -З-цефем-4-карбоксилат (1Ь).

-карбоксилат (1Ь).

Смесь соединений VIIb примера 4В (333 мг, 0,35 ммоль) и N-метилпирро- лидина (60 мг, 0,7 ммоль) в ,j

(5 мл) перемешивают в течение полу- часа при комнатной температуре, а затем упаривают в вакууме. Остаток промывают эфиром и растворяют в 90%-ной водной ТФК. После стояния в течение получаса при комнатной температуре смесь концентрируют при пониженном давлении. К концентрату добавляют эфир для отделения четвертичного про- дукта, который собирают фильтровани- g „ растворяют в небольшом количеII130302912

ЯМР: &(), млн- : 1,43 (ЗН, т); получением 494 мг (90%) названного 2,33 (4Н, м,); 3,10 (ЗН, с); 3,64 целевого соединения.

(4Н, м); 4,36 (2Н, кв); 5,44 (1Н, д); 5,95 (1Н, д); 7,08 (1Н, с).

П р и м е р 5. 7-t(Z)-2-(2-npon- оксиимино)-2-(2-аминотиазол-4-ил)- ацетамидо -3-С(I-метил-I-пирролиди- ний)метил7-3-цефем-4-карбоксилат (1с),

А. Дифенилметиловый эфир 3-хлорИК-спектр: КВг, см : 3360 3040, 3020, 2960, 1785, 1720, 1680, 1600, 1520, 1500, 1450, 1370, 1300, 1230, 1150, 1115, 1080, 990, 900, 840, 750, 700.

.-. - УФ-спектр: i (EtOH), нм (): 240

метил-7-С(г)-2-(2-пропоксиимино)-2- 10 (24900),260 (19400} . -(2-тритиламинотиазол-4-ил)ацетамидоД- З-цефем-4-карбоновой кислоты (VI).

Смесь (г)-2-(2-пропоксиимино)-2- -(2-триэтш1аминотиазол-4-ил)уксусной кислоты (IVc) (707 мг, 1,5 ммоль) и

ЯМР: S(CDClj), млн : 1,30 (6Н, д, I 6Н); 3,37 и 3,70 (1Н, каждый д, I 16Н); 4,22 (2Н, с); 4,55 (Ш м, J 6Н); 4,95 (Ш, д, I 4,5 Гц 15 5,83 (1Н, д-д, I 4,5 Е 9 Гц, q для

), 6,66 (Ш, с); 6,87 (1Н, с);

7,25 (25Н, с).

С. 7-C(Z)-2-(2-Пpoпoкcииминo)-2- pe в течение часа и выливают в ряст- -(2-аминотиазол-4-ил)ацетамидо -3- вор бензилового эфира 7 амино-3-хлор- 20 - (1-метил-1-пирролидиний)метил -3пятихлористого фосфора (344 мг, 1,б5 ммоль) в дихлорметане (14 мл) перемешивают при комнатной температу-цефем-4-карбоксилат (1с).

метш1-3-цефем-4-карбоновой кислоты (677 мг, 1,5 ммоль) и БСА (1,1 мл, 4,5 ммоль) в дихлорметане (15 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение получаса, разбавляют этилацетатом (200 мл) и водой (3100 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают с получением 1,4 г (100%) названного соединения.

ИК-спектр: КВг, 3360, 3020, 3060, 2960, 1785, 1725, 1680, 1520, 1500, 1450, 1375, 1300, 1250, 1160, 1090, 1060, 1010, 990, 840, 740, 700.

-цефем-4-карбоксилат (1с).

Смесь соединения примера 5В (545 мг, 0,55 моль) и 1 -метилпирро- лидина (70 мг, 0,82 ммоль) в дихлор

25 метане (10 мл) перемешивают при ком натной температуре в течение получа са и разбавляют эфиром (100 мл). Результирующий остаток собирают филь трованием. Раствор осадка в 90% ТФК

30 (,5 мл) перемепшвают при комнатной температуре в течение получаса и упа ривают в вакууме. Остаток растирают с эфиром с получением 317 мг сырого продукта, который хроматеграфируют

УФ-спектр: Л (EtOH), нм (): 240 35 колонке НР-20 (50 мл), элюируют (24600), 260 (20700).

ЯМР: S, CDClj, млн : 1,35 (6Н, д, I Гц); 3,50 (2Н, с); 4,35 (2Н, с); 4,58 (1Н, м, I 6Н); 5,00 (1Н, I 4,5 Н); 5,91 (1Н, д-д I 4,5 и 40 ( /& 6/1), 100 мг которой очищают

водой (500 мл) и 30%-ным CHjOH (500 мл). Элюат в 30%-ном концентрируют и лиофилизуют с получением 109 мг смеси изомеров А и А з

9Н; q для J 4,3 Н); 6,68 (Ш, с); 6,88 (1Н, с); 7,25 25Н, с).

В. Дифенилметиловый эфир 3-йодо- метил-7-(Z)-2-(2-пропоксиимино)-2с помощью ЖХВД (Лихросорб RP-18, 15% МеОН), получая 5 мг (3%) целевого соединения Ic

УФ-спектр: (буфер), нм, (

-(2-тритиламинотиазол-4-Ш1)-ацетами- 45 (15100), 252 (14600). до 3-цефем-4-карбоновой кислотыЯМР: Ь(),млнЧ: 1,42 (6Н, д.

(VI1с).

Смесь (Z)-2-(2-пpoпoкcииминo)-2- -(2-триэтиламинотиазол-4-ил)-уксусной кислоты (500 мг, 0,55 ммоль) и йодида натрия (248 мг, 1,66 ммоль) в ацетоне (10 мл) перемешивают при

J 6 Гц); 2,33 (4Н, с); 3,10 (ЗН, с); 3,65 (4Н, с); 3,83 и 4,23 (1Н, каждый, д, J 17 Гц); 5,45 (1Н, д, 50 I 4,5 Гц); 5,95 (1Н, д, I 4,5 Гц) 7,05 (1Н, с).

П р и м е р 6. 7-(Z)-2-Aллилoкcи ймино-2-(2-амино тиаз ол-4-ил-)аце т- амидо -3-(1-метил- -пирролидиний)комнатной температуре 50 мин. После 55 гметш1-3-цефем-4-карбоксилат (Id), упаривания остаток промьшают водным А. Бензгидриловый эфир 7-t(Z)-2- тиосульфатом натрия (10 мл), водой -аллилоксиимино-2-(2-тритиламиноти- (10 мл) и водным NaCl (10 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают с

азол-4-ил)ацетамидо-З-хлорметил-3- -цефем-4-карбоновой кислоты (VId).

ИК-спектр: КВг, см : 3360, 3040, 3020, 2960, 1785, 1720, 1680, 1600, 1520, 1500, 1450, 1370, 1300, 1230, 1150, 1115, 1080, 990, 900, 840, 750, 700.

(24900),260 (19400} .

ЯМР: S(CDClj), млн : 1,30 (6Н, д, I 6Н); 3,37 и 3,70 (1Н, каждый, д, I 16Н); 4,22 (2Н, с); 4,55 (Ш, м, J 6Н); 4,95 (Ш, д, I 4,5 Гц); 5,83 (1Н, д-д, I 4,5 Е 9 Гц, q для

С. 7-C(Z)-2-(2-Пpoпoкcииминo)-2- -(2-аминотиазол-4-ил)ацетамидо -3- - (1-метил-1-пирролидиний)метил -3-цефем-4-карбоксилат (1с).

Смесь соединения примера 5В (545 мг, 0,55 моль) и 1 -метилпирро- лидина (70 мг, 0,82 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение получаса и разбавляют эфиром (100 мл). Результирующий остаток собирают фильтрованием. Раствор осадка в 90% ТФК

(,5 мл) перемепшвают при комнатной температуре в течение получаса и упаривают в вакууме. Остаток растирают с эфиром с получением 317 мг сырого продукта, который хроматеграфируют

колонке НР-20 (50 мл), элюируют

( /& 6/1), 100 мг которой очищают

водой (500 мл) и 30%-ным CHjOH (500 мл). Элюат в 30%-ном концентрируют и лиофилизуют с получением 109 мг смеси изомеров А и А з

( /& 6/1), 100 мг которой очищают

с помощью ЖХВД (Лихросорб RP-18, 15% МеОН), получая 5 мг (3%) целевого соединения Ic

УФ-спектр: (буфер), нм, () :

(15100), 252 (14600). ЯМР: Ь(),млнЧ: 1,42 (6Н, д.

J 6 Гц); 2,33 (4Н, с); 3,10 (ЗН, с); 3,65 (4Н, с); 3,83 и 4,23 (1Н, каждый, д, J 17 Гц); 5,45 (1Н, д, I 4,5 Гц); 5,95 (1Н, д, I 4,5 Гц); 7,05 (1Н, с).

П р и м е р 6. 7-(Z)-2-Aллилoкcи- ймино-2-(2-амино тиаз ол-4-ил-)аце т- амидо -3-(1-метил- -пирролидиний)гметш1-3-цефем-4-карбоксилат (Id), А. Бензгидриловый эфир 7-t(Z)-2- -аллилоксиимино-2-(2-тритиламиноти-

азол-4-ил)ацетамидо-З-хлорметил-3- -цефем-4-карбоновой кислоты (VId).

к суспензии бензилового эфира 7- -амино-З-хлорметил-З-цефем-4-карбо- новой кислоты (1,35 г, 3 ммоль) в метиленхлориде (20 мл) добавляют БСА (1-,1 мл, 4,5 ммоль), и смесь перемешивают в течение получаса при комнатной температуре с образованием прозрачного раствора. Смесь (Z)-2-aллил- оксиимино-2-(2-тритш1аминотиазол-4- -ил)уксусной кислоты (IVd) (1,40 г, 3,0 ммоль) и пятихлористого фосфора (690 мг, 3,3 ммоль) в метиленхлориде (20 мл) перемешивают в течение 15 мин при комнатной температуре и выливают в виде одной порции в раствор триме- тилсилированного соединения V, Смесь перемешивают 20 мин при комнатной температуре и разбавляют этилацета- том (200 мл), промывают водным бикарвают при пониженном давлении с получением названного соединения в виде аморфного порошка, который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. Выход 2,52 г (99%).

С. 7-1(Е)-2-Аллилоксиимино-2-(2- -аминотиазол-4-ил)ацетамидо -3-(1- -метил-1-пирролидиний)метил -3-це- фем-4-карбоксилат (Id).

10

f5

Смесь соединения примера 6В (4,8 мг, 0,5 ммоль) и N-метилпирроли- дина (0,05 мл, 0,5 ммоль) в метиленхлориде (5 мл) перемешивают 20 мин при комнатной температуре и разбавляют эфиром (50 мл) для осаждения четвертичного продукта (выход 500 мг). Смесь четвертичного продукта и ТФК (2 мл) оставляют стоять при комнатбонатом натрия и водой, осушают и от- 0ной температуре в течение полутора

гоняют при пониженном давлении. Мае- асов и разбавляют эфиром для осажделоподобный остаток очищают на сили-ния сырой соли ТФК продукта (выход

кагелё методом хроматографии.в колонке 65 мг) , которую хроматографируют на

колонке НР-20 (1,848 см). Колонку

(Вако-гель, С-200, 30 г). Колонку элюируют хлороформом и комбинируют фракции, содержащие целевой продукт. Отгонка при пониженном давлении дает целевой продукт (VId) в виде аморфного порошка, выход 2,32 г (83%). Т.пл. ЮО-ПЗ С (разл.).

ИК-спектр: КВг, см : 3990, 1790, 1730, 1680, 1530, 1380, 1250, 1160, 1020.

ЯМР: 5(CDCl5), млн : 3,50 (2Н, 2-н); 4,32 (2Н, с, 3-СН,); 4,6-6,1 (7Н, м, ,j 6,7-Н); 6,70 (Ш, с, Н тиазола); 6,90 (1Н, с, РЬ,СН); 7,1-7,6-(ЗОН и протоны фенила).

Рассчитано, %: С 64,05; Н 4,45; N 7,73; S 7,08; С1 7,82.

C gH Nj05S2Cl-l/3 СНС1,,

Найдено, %: С1 64,13: Н 4,61;

63,99; 4,64; N 7,50; S 6,85; С 7,55 7,30; 6,85; 7,46,

В, Бензгидриловый эфир 7- l(Z)-2- -аллилOK сиимино-2-(тритиламинотиа з ол- -4-ил)ацетамидо -З-йодометил-З-це- фем-карбоновой кислоты Vlld.

Смесь соединения (VId) примера 6А (2,30 г, 2,65 ммоль) и йодида натрия (2 г, 13,3 ммоль) в ацетоне (15 мл) перемешивают в течение часа при комнатной температуре, а затем упаривают при пониженном давлении. Раствор маслоподобного остатка в зтилацетате (200 мл) промывают 10%-ным тиосульфатом натрия и водой, упари

302914

вают при пониженном давлении с получением названного соединения в виде аморфного порошка, который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. Выход 2,52 г (99%).

С. 7-1(Е)-2-Аллилоксиимино-2-(2- -аминотиазол-4-ил)ацетамидо -3-(1- -метил-1-пирролидиний)метил -3-це- фем-4-карбоксилат (Id).

Смесь соединения примера 6В (4,8 мг, 0,5 ммоль) и N-метилпирроли- дина (0,05 мл, 0,5 ммоль) в метиленхлориде (5 мл) перемешивают 20 мин при комнатной температуре и разбавляют эфиром (50 мл) для осаждения четвертичного продукта (выход 500 мг). Смесь четвертичного продукта и ТФК (2 мл) оставляют стоять при комнат 65 мг) , которую хроматографируют на

колонке НР-20 (1,848 см). Колонку

5 элюируют водой и 30%-ным водным метанолом. Метанольный элюат упаривают при пониженном давлении и остаток лиофилизуют с получением аморфного порошка (выход 124 мг), который со0 держит целевой продукт (17%) и соответствующий д -изомер (83%). Смесь очищают с помощью ЖХВД { Лихросорб RO-18, 0,01 М ,jPO, (рН:СНзОН 85:15). Элюэт подкисляют до рН 3

г разбавленной НСt и хроматографируют на колонке НР-20 (1, см). Колонку элюируют водой, а затем 30%-ным водным метанолом. Метанольный элюат упаривают при пониженном давлении,

0 и остаток лиофилизуют с получением целевого соединения (Id) в виде аморфного порошка (выход 13 мг, 5,1%), Т.пл. 55 С (разл.).

ИК-спектр v) КВг, см : 36005 2800, 1770, 1670, 1610, 1530, 1200.

УФ-спектр,А маис (рН 7 буфер), нм, (): 235 (16600), 253 (15600).

HMPS(D,jO), : 2,1-2,5 (4Н, м, Н пирролидина), 3,10 (ЗН, с, СН );

0 3,4-3,8 (4Н, м, пирролидина); 5,95 (1Н, q 4Н, Z).

Соединения формулы I проявляют высокую антибактериальную активность в отношении грамположительных и

55 грамотрицательных бактерий и пригод- йы для лечения бактериальных инфекций животных, а также человека. Соединения формулы I могут быть использованы для приготовления препаративных

форм, предназначенных для употребления парентерально, обычным путем с применением известных фармацевтических носителей и экспиентов, и употребляться в виде единичных или многократных доз. Композиции могут быть представлены в виде растворов, суспензий или эмульсий в масляных или водных разбавителях с применением обычных диспергирующих, суспендирую- щих и стабилизирующих веществ; в виде сухого порощка, разбавляемого перед употреблением, например, стерильной водой, не содержащей пироген- ных веществ; в виде свечей, с использованием обычных для этой цели основ, например масла, какао или других глицеридов. При необходимости предлагаемые соединения могут быть предписаны в сочетании с другими антибиотиками, такими как пенициллины или другие цефалоспорины. Единичная . доза содержит 50-1500 мг активного ингредиента формулы 1. Для лечения взрослых людей дозировка составляет

Н2 S

N C-CCfNH-j-r Л JJ

N

OCHq

и цефтазидим формулы

500-5000 мг в сутки, в зависимости от частоты и способа приема. При внутримышечном или внутривенном введении взрослому человеку полная доза в норме обычно составляет 750-3000 мг в сутки в виде отдельных дозировок, хотя может потребоваться и более высокая суточная доза в случае инфекций бактериями рода Pseudomonas.

Предпочтительными являются соединения формулы I, в которых R, метил или этил. Наиболее предпочтительны соединения, где К -метил. Минимальную ингибирукщую концентрацию

(МИК) предлагаемых и двух известных соединений (цефотаксима и цефтазиди- ма) определяют методом двухкратного разбавления агара с использованием агара Мюллера-Хинтона для 32 штаммов

испытуемых организмов, разделенных на шесть групп. Геометрические средние значения МИК, определенные в этом эксперименте, приведены в табл. 4 и 5. Для сравнения используют известные

цефотаксим формулы

О

II

СИ2.0ССН

г

j И

k X

S

-сп

N

-CONH

О

ti

ti-T-Y .

СОО

НэС- V СНт

I

соон

Все испытуемые соединения более активны, чем цефотаксим, в отношении групп (G)-II и (С)-, причем наиболее предпочтительное соединение Та является явно более активным. Все испытуемые соединения более активны, чем цефтазидим в отношении групп (G)-Ia и (G)-Ib, причем наиболее предпочтительное соединение la явно активнее цефтазидима в отношении всех групп испытуемых организмов, за исключением (G)-III, которые несколько более чувствительны к цеф- тазидиму.

Абсорбцию соединения Та и известных соединений (цефотаксим и цефтазидим) определяют на мьщ1ах после однократной внутримьшечной инъекции испытуемого соединения (растворенного в р.1М-фосфатном буфере; рН 7) при дозировке 20 мг/кг. Пробы крови собирают из орбитальных синусов в обработанные гепарином капиллярные трубки и высевают на среду Мюллера- Хинтона с использованием Morganella Morganii А9695 в качестве испытуемого организма. Уровни содержания соединений в крови в различные промежут17I

ки времени, величина полупериодов (t 1/2) и площадь под кривыми (ППК), представлены в табл. 6.

Проводят также испытания для выявления организмов, резистентных к соединению формулы Та, цефотаксиму и цефтазидиму. Значения МИК для этих трех соединений в отношении 240 штам нов Euterobacteriaceae определяют в среде Мюллера-Хинтона, и значение МИК, равное или превьшающее 8 для не менее одного из испытуемых соединений, произвольно принимают за свидетельство резистентности организма. Из 240 штаммов 27 оказались резистентными не менее, чем к одному из испытуемых соединений. Результаты, приведенные в табл. 4, говорят о

N

C-C01 SH- II

,

OR

где R - метил, этил, изопропил или аллил,

заключающийся в том, что смесь бенз- гидрилового эфира 7-амино-З-хлорме- тил-З-цефем-4-карбоновой кислоты и бис-(триметилсилил)ацетамида подвергают взаимодействию с (Z)-2-(R-OK- сиимино)-2-(2-тритиламинотиазол-4- -ил) уксусной кислотой, где R имеет указанное значение, продукт конденIlia

Метил

100

Illb

Этил

67

IIIc Изопро- 26

Hid

Алл ил

- Сложный эфир подвергали гидролизу без выделения.

03029 том

и

что 3 организма резистентны к соединению 1а, 15 - к цефтазидиму и 18 - к цефотаксиму. Оно активнее цеф- тазидима в отношении всех групп грам- 5 положительных испытуемых организмов, исключая (G )111 Ps. aeruginosa, которые несколько чувствительнее к цефтазидиму.

to Таким образом, предлагаемым способом можно получать соединения общей формулы 1, обладающие ценными фармакологическими свойствами.

5 Формула изобретения

Способ получения производных це- фапострина общей формулы

-NN

- NV CH2-N( COO CH

э

сации обрабатывают йодистым натрием, полученное 3-йод-метильное производное подвергают взаимодействию с N-ме- тилпирролидином в органическом раст30 ворителе или смеси органических растворителей при комнатной температуре с последующим удалением защитных групп кислотным гидролизом и выделением целевого про3 дукта.

Таблица 1

115 (разл.) 120 (разл.)

97-98

51-55

Метил Этил

Изопро- пил

Аллил

98 138-143 1АО

85 140-145 Не сообщ.

85 166-169 170

66

170-178

170

Таблица 3

Общее число

резистентных

штаммов

27

15

18

Примечание: (G )-1а: (5 штаммов, чувствительных к пенициллину);

( (5 штаммов, чувствительных к пенициллину);

(G)-Ia: (2 штамма) + (1 штамм) и (2 штамма, чувствительных к цефалотину);

(G)-Ib: (3 штамма) и 3 штамма, резистентные к цефалотину;

(G)-II: (1 штамм, (2 штамма) и (2 штамма);

(G)-III:( 6 штаммов);

(а) - среднее значение по пяти экспериментам.

Таблица 6

Среднее значение для 2 испытании;

г

1 испытание;

Среднее значение для 3 испытаний.

Составитель Н. Нарьшгкова Редактор Н. Егорова Техред И.Попович Корректор М.Самборская

Заказ 1227/57 Тираж 372Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Лроектная, 4

Таблица 5

Изобретение касается производных цефапоспорина (ЦС), в частности способа получения соединений общей формулы N-C-C-0(0)NH J-J-5-1 H,M-C-S-C NORL.N-G J-CHi-NC®J |«/J4 r 7 C(0)0 CHi где R - CH j, С Hg, изо-СдН , аллил, которые проявляют антибактериальную активность и могут быть использованы в медицине. Дня изыскания веществ указанного класса с лучшими свойствами были получены новые производные ЦС. Синтез ведут из бензгидрилОБОго эфира 7-амино-3-хлорметил-3-цефем- -4-карбоновой кислоты и бис-(триме- тилсилил)ацетамида, которые подвергают реакции с (Z)-2-(R-oкcииминo)- -2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)уксусной кислотой. Продукт конденсации затем обрабатывают NaJ и далее N-метилпир- ролидином в среде органического растворителя при комнатной температуре с последующим удалением защитных групп кислым гидролизом и выделением целевого продукта. Испытания ЦС показывают, что они более активны, чем це- фантоксим и цефтазидим, в отношении всех групп грамположительных микробов. 1 ил., 6 табл. (У) с со о со § со см