Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии.
Целью изобретения является ускорение способа.
Цель достигаешься проведением им- мунопреципитации в жидкой фазе в присутствии 0,033%-ного сернокислого кадмия.
Способ осуществляется следующим образом.
Реакцию преципитации проводят в объеме 0,5 мл физиологического раствора, содержащего 0,033% сернокислого кадмия. Исследуемый образец вносят в реакционную систему в объеме 0,005 МП (при исследовании сыворотки или плазмы крови их следует развести в 2-2,5 раза, спинномозговую жидкость, перитониальные и другие экссудаты исследуют неразведенными). Сухую моноспецифическута анти- сыворотку против определяемого иммуноглобулина растворяют в 0,5 МП дистиллированной воды и вносят в реакционную систему в,объеме 0,02 мп. Готовят следующие .контроли: 0,5 мп О,033%-ного раствора сернокислого кадмия (Е); 0,5 мл О,033%-ного раствора сернокислого кадмия и 0,005 м исследуемого образца (Е), 0,5 мп О,033%-ного раствора сернокислого кадмия и 0,02 мл антисыворотки (Е,)
Всё пробы и контроли несколько раз встряхивают, выдерживают 1 ч при комнатной температуре и спектрофото- метрируют в кювете с длиной оптического хода 0,6 см при дпине волны 340 мкм.
Величину экртин11 1и преципитата, характеризующего содержание иммуноглобулина в исследуемом образце (Е у) , определяют следующим образом.
Экстинция опыта Е складывается из экстинции растворителя Е, экстин- ции исследуемого образца (Е - Е,), зкстннции антисыворотки (Е j - Е ) и экстинции образовавшегося преципитата Е, или Е о Е + Е ,+ Е, отсюда Е X Е о - Е г ,.+ Е
В жидкой преципитирующей системе с избытком антител и при их постоянном количестве величина образующегося преципитата линейно зависит от содержания антигена в системе и может быть описана уравнением у ах + + b (см).
Таким образом, количественную оценку результатов определения имму- ноглобулийов турбидиметрическим способом проводят как в условных единицах оптической плотности (экстинции), так и в метрических единицах, при этом предварительно находят с помощью эталонных образцов иммуноглобу- линов значения коэффициентов линейной функ1: 1И а и Ь.
Сравнительные измерения концентрации иммуноглобулинов в эталонных сыворотках способом Манчини и предлагаемым способом дали следующие результаты (фиг.1-2).
Выпи использованы эталонные сыворотки, содержащие, мг/мл: А 1,7;. М 1,3; I 21,76, серия 9, контроль 2545, производства ЦНИИ вакцин и сывороток им И.И.Мечникова;А 1,51; М 1,10; 18,82, серия 2, контроль № 1782, производства Горьковского НИИЭМ.
Каждую эталонную сыворотку раз- в 2 и 4 раза физиологическим раствором таким образом, что дпя построения графика использовалось от 4 до 6 точек. Параллельно ставили j)eакцию радиальной иммунодиффузии по Манчини с использованием тех же эталонных сывороток.
Величины, полученные предлагаемым способом, хор ошо укладываются в
линейную зависимость с небольшими отклонениями от ожидаемых значений: для А отклонения от заданных эталоном составили 1,3-7,9%, для М - на 3,8%, дпяя - на 5,7%.
Данные, полученные способом Манчини, отклоняются от эталонных более значительно: для А - на 5,9-12,5%, дпя М - на 5,8-25%, для I - на 2,6- 83,7%.
Время проведения реакции 1 ч вместо 48 ч. Формула изобретения
Способ количественного определе- ния иммуноглобулинов в сыворотке крови человека путем постановки реакции преципитации с моноспецифическими антисыворотками против иммуноглобулинов, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, реакцию иммунопреципитации проводят в жидкой фазе в присутствии О,033%-ного сернокислого кадмия.
fx
о,ш
o,m
0,107 OflSl
0,75 S,IS
{Нахождение с отидоенвй teauvuHOv H07,S /,(i,i,9HiiH/i и 1,51 т/мл)
ue с отидоемои tejH/vuHit} на 1,зУ, (f,7fMt/ftff uO,7SHt/fM)
1,40 f,511,70 Фиг.
CjjA
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА | 1991 |
|
RU2008688C1 |
| СПОСОБ ОЦЕНКИ МИКРОБИОЦЕНОЗА ПОЛОСТИ МАТКИ У ЖЕНЩИН С ПОЛИПАМИ ЭНДОМЕТРИЯ В ПОСТМЕНОПАУЗАЛЬНОМ ПЕРИОДЕ | 2010 |
|
RU2430365C1 |
| Способ определения стадии обострения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки | 1985 |
|
SU1364989A1 |
| Способ определения иммуноглобулинов в биологических жидкостях "иммунокап | 1985 |
|
SU1312484A1 |
| Способ получения иммуногемосорбента | 1990 |
|
SU1797896A1 |
| Способ диагностики диабетической микроангиопатии | 1988 |
|
SU1564553A1 |
| Способ определения антигена | 1980 |
|
SU1146051A1 |
| Способ определения концентрации иммуноглобулинов в биологической жидкости | 1987 |
|
SU1603301A1 |
| СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕТАЛЬНОГО ГЕМОГЛОБИНА ЧЕЛОВЕКА | 2006 |
|
RU2310204C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ С1-ИНАКТИВАТОРА ЧЕЛОВЕКА | 1992 |
|
RU2068693C1 |
Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - ускорение способа. Моноспецифическую антисыворотку и исследуемый образец вносят в реакционную систему с сернокислым кадмием и подвергают спектрофотомет- рии. Затем определяют величину экс- тинции преципитата. Время проведения реакции сокращается до 1 ч. 2 ил. 00 О5 со СП
.UOlfl.S /.)
Vsi 70jisgjfif/Bf g
Фи.е.г
Составитель А.Агуреев Редактор И.Рыбченко Техред Л.Сердюкова Корректор М.Пожо
Заказ 6398/34 Тираж 776Подтшсное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР
по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
C3gt HtlHt
