Способ получения BoLA типирующих сывороток Советский патент 1988 года по МПК G01N33/50 A01K67/02 

13649882

Изобретение относится к биологии, пиентов. Титр достигает пика к 21

дню и сохраняется значительное время, В тех случаях, когда титр антител после трансплантации бывает низкий,

в частности к иммуногенетике, и может быть использовано для получения типи- рующих моно- и олигоспецифических реагентов с высокими титрами, необходимых для идентификации серологически определяемых антигенов I класса Главного комплекса гистосовместимости крупного рогатого скота - системы BoLA (Bovine Leucocytes antigens).

Целью изобретения является повышение титров сыворотки.

Способ осуществляется следующим образом.

Для иммунизации подбирают родственные пары донор-реципиент, в т,ч, мать-сын, мать-дочь и полусибсы по отцу. Доноры - полновозрастные коровы или молодняк в возрасте 6- 8 мес.

Перед взятием трансплантатов доноров обездвиживают рампуном, у коров операционное поле готовят на спине позади лопатки, у молодняка - на середине шеи. Из центра операционного поля вырезают овальный полнослой- ный лоскут кожи размером 5-7 см, помещают в стерильных физиологический раствор на 20-30 мин, а затем лоскут помещают реципиенту в верти- кальНый разрез в области шеи. Реципиента готовят к операции так же, как донора. Края раны реципиента раздвигают и к каждому четырьмя стежками подвешивают соответствующий край трансплантата. Рану смазывают йодом и покрывают коллодийной повязкой на три дня. Вертикальные разрезы и кол- лодийные повязки не препятствуют свободному оттоку серознбй жидкости и исключают развитие гнойно-воспалительных процессов, что повьш1ает эффективность метода,

Через 7-10 дней после трансплантации определяют титр антител у реци10

проводят повторную иммунизацию, используя метод имплантации. Принцип метода заключался в следующем. Делают разрез кожи до подкожной клетчатки, в разрез, не препарируя, вставляют кусочек кожи размером 0,8-1 см, который удерживают в ране наложением нескольких стежков узловатого шва, Раневые края обрабатывают 5%-ной на- 15 стойкой йода и покрывают коллодийной повязкой, швы и повязки снимают на 6-й день, к этому времени наступает заживление раны. Количество кусочков кожи при имплантации 3-4.

20

25

При проведении иммунизации предлагаемым способом на 14-21 день получают антилимфоцитарные сыворотки с титрами антител от 1:64 до 1:512. Иммунные антисыворотки пригодны для пробных и массовых абсорбции.

30

35

40

45

Формула изобретения

Способ получения BoL А типирующих сывороток, 9ключающий подбор животных: реципиента и донора, отбор у донора кожных лоскутов и пересадку их реципиенту с последующим отбором крови у реципиента и получением сыворотки, отличающийся тем, что, с целью повьш1ения титров сыворотки, подбор реципиента и донора осуществляют из родственных пар, кожные лоскуты размером 0,8-1 см отбирают у донора со спины позади лопатки или с середины шеи, пересадку осуществляют одновременно 3-4 кожньгх лоскутов, после чего дополнительно проводят имплантацию.

проводят повторную иммунизацию, используя метод имплантации. Принцип метода заключался в следующем. Делают разрез кожи до подкожной клетчатки, в разрез, не препарируя, вставляют кусочек кожи размером 0,8-1 см, который удерживают в ране наложением нескольких стежков узловатого шва, Раневые края обрабатывают 5%-ной на- стойкой йода и покрывают коллодийной повязкой, швы и повязки снимают на 6-й день, к этому времени наступает заживление раны. Количество кусочков кожи при имплантации 3-4.

При проведении иммунизации предлагаемым способом на 14-21 день получают антилимфоцитарные сыворотки с титрами антител от 1:64 до 1:512. Иммунные антисыворотки пригодны для пробных и массовых абсорбции.

Формула изобретения

Способ получения BoL А типирующих сывороток, 9ключающий подбор животных: реципиента и донора, отбор у донора кожных лоскутов и пересадку их реципиенту с последующим отбором крови у реципиента и получением сыворотки, отличающийся тем, что, с целью повьш1ения титров сыворотки, подбор реципиента и донора осуществляют из родственных пар, кожные лоскуты размером 0,8-1 см отбирают у донора со спины позади лопатки или с середины шеи, пересадку осуществляют одновременно 3-4 кожньгх лоскутов, после чего дополнительно проводят имплантацию.

Изобретение относится к области биологии, в частности к иммуногенети- ке, и может быть использовано для получения типирующих моно- и олигоспе- цифических реагентов с высокими титрами, необходимых для идентификации серологически определяемых антигенов I класса Главного комплекса чисто- совместимости крупного рогатого скота системы BoL А. Целью изобретения является повышение титров сывороток. Для этого среди родственников подбирают реципиента и донора, у донора со спины позади лопатки или с середины шеи отбирают 3,4 кожных лоскута размером 0,8-1 см и пересаживают их одновременно донору, после чего дополнительно проводят имплантацию. Ф (f.