Способ определения неспецифической резистентности организма к условиям высокогорья Советский патент 1988 года по МПК G01N33/48 

,

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления индивидуальных значений этого показателя у пациентов.

Целью изобретения является повышение точности способа.

В предлагаемом способе, включающем забор крови, разведение ее цит- ратно-тфизиологическим раствором, ин- кубацию в термостате при комнатной температуре взвеси эритроцитов, центрифугирование и определение экстинк ции супернатанта, инкубируют одновременно две пробы, одну в термоста- те при температуре (+41) - (+43)°С, другую в холодильнике при (+4) - (+10)°С в течение 30-60 мин при этом цельную кровь разводят цитрат- но физиологическим раствором до. кон- центрации , и после центрифугирования определяют экстинкцию над- осадочной лсидкости (супернатанта), по которой судят о степени гемолиза и соответственно резистентности организма.

Пример 1. У исследуемой М.Л.И., 25 лет, рост 163.см, вес 57 кг, средней степени тренированности произведен забор крови из пальца Пробы крови разводят цитр тно-буфер- но-физиологической смесью до концентрации 5-10%, центрифугируют при 1800 об/мин в течение 10 мин. При помощи пастеровской пипетки суперна- тант переносят в кювету емкостью 1 мл и на Спеколе определяют экс- тинкцию при длине волны 536 ммк. Е( .пробы 1 О.,05; Е пробы 2 0,05. Супер натант из кюветы осторожно сливают обратно в пробирку с осадком эритроцитов, после чего путем встряхивания и пипетирования восстанавливают однородность суспензии. Обе пробы инкубируют одновременно, одну в термо- стате при (+42) - (+41) с, другую в холодильнике при в течение 30 мин, затем при комнатной темпера:- туре +18°С в течение 30-60 мин. Проб центрифугируют при 3000 об/мин в те- чение 5 мин после чего определяют экстинкцию супернатанта в пробах при той же длине волны Е пробы 1 - ТГ 0,065; Еа пробы 2 - ХГ 0,095. В каждую пробирку доливают дистилли рованную воду до 5 мл, после чего осадок эритроцитов пипетируют и ге молизируют в течение 15 мин. После центрифугирования при 3000 об/мин в

течение 10 мин гемолизат дополнительно разводят в 2 раза и определяют экстинкцию на спектрофотометре, например Спеколе, при длине волны 536 ммк: Ef пробы 1 - 0,17 х 10; Eg пробы 2 0,16x10. Производят рас- счет спонтанно-механического, теплового и холодового гемолиза эритроцитов.

Е(+Еа

X 100

СМГ

2(10Е5 + 10ЕбТГЕ +Ег

(Е + Е) X 100 10

lOEj+lOEg+E,+EJ 3,4

2,9%;

Е, X 100 0,065 X 100 10Еу+ Ej

10x0,17+0,065

6,5

0,1765

3,1%;

vr - Ец. X 100 0,065x100

Л.1 -

10Еб + Ед 10x0,16+0,095

0,5

и,1603

5,6%.

Параллельно производят определение перекисной резистентности эритро цит.ов: Е, 0,08; Е 0,07; Е, 0,34; Е 0,04.

Производят рассчет показателей перекисной резистентности эритроцитов:

ПРЭ

- -Е,) X 100 Е, - Е4

(0,075-0,04)х100 0,035x100 0,34-0,04 0,3

11,6%.

После курса тренировки при помощи кратковременной острой гипоксииИ вызываемой гипоксической 10,3%-ной смесью кислорода с азотом, в течение 5 сут при дыхании по 1 разу в 1 сут в течение 20 мин произведеио повторное обследование и определение всех перечисленных вьппе показателей.

При определении экстинкции на Спеколе при той же длине волны.

что ив предьщущий раз, получены следующие данные: Е, 0,04; Е, 0,05; Е, 0,085; Е 0,160; Е 0,17 X 10; Eg 0,17 X 10.

Е, X 100 ЮЕу + Е,

8,5 . . 17785

ХГ

Е X 100

10Еб + Е.

.

Е, X 100 15

ЮЕу + Е,

1,86

8,0%;

Е X 100 lOEg + Е.

14

1,84

7,6%.

Наряду с этим определяют nokasa- 10 тели перекисной резистентности эрит роцитов; Е, 0;09; Е 0,07, Ej . 0,35, Е. 0,05.

Изобретение относится к медици не, предназначено дня выявления индивидуального значения показателя неспецифической резистентности орга низма к условиям высокогорья у пащ1- «нтрв, :Цель изобретения - повышение точности способа. Для этого изводят забор крови, разведение ее цитратно-физиологическим раствором, инкубацию в те1 юстате при комнат-, ной температ фе взвеси эритроцитов, центрифугирование и определение эк- стинкции супернатанта. Инкубируют одновременно две пробы - одну в мостате при температуре 42-44 С, другую в холодильнике при в течение 30-90 мин и затем обе пробы иикубируют при комнатной температуре 18-22 С в течение 30-60 мин. Цельную кровь разводят цитратно-буферно - физиологическим раствором до концентрации 5-10% и затем после центрифугирования определяют экстинкцию иадосадочной жидкости, по которой судят о степени гемолиза и соответственно резистентности эритроцитов. (П

3,49

2,6%.

Определены также показатели перекисной резистентности эритроцитов в соответствии с указанной выше методикой: ЕЧ 0,09; ЕЗ 0,12; Е, 0,37; Е 0,05.

ПРЧ ( 0-.05) X 100 0,37 - 0,05

0,05 X 100 ..„ 0,32

Исследуемая М.Л.Й. подъем на высоту 3200 м в условиях Тян-Шаня перенесла хуже, чем остальные испытуемые. Предъявляла жалобы на головную боль, слабость, головокружение.

Приме.р 2. У исследуемой Д.Г.И., 28 лет, 167 см ростом, весом 64 кг, средней степени тренированности произведен забор крови из локтевой вены в количестве 9 мл, к ней добавлен 1 мл 3 8%-кого раствора цитрата натрия. В пробирки разлит буферно-физиологический раствор по 1,1 мл и добавлена кровь по 0,1 мл.

Последующие операции выполнялись в той же последовательности, что и в примере 1.

На Спеколе определена степень спонтанно-механического, теплового и холодового гемолиза эритроцитов: Е( 0,07; Е,, 0,09; Е (ТГ) 0,15; Е4 (ХГ) 0,15,- EJ 0,17 10; Е (f,17 10.

смг

100

3,4 + 0,16

Производят рассчет показа-телей пе 15 рекисной резистентности эритроцитов:

ПРЭ

0,08-0,05 X 100 3 0,35 - 0,05 0,30

10%.

После тренировки при помощи кратковременной острой гипоксиии (условия

аналогичные примеру 1) произведено повторное определение произведенных выше показателей спонтанно-механического, теплового и холодового гемозш за эритроцитов: Е 0,06; Е

0,08; ЕЗ (ТГ) 0,20; Е (ХГ) 0,12; Е;. 0,16; Е 0,18 10.

35

СМГ. .,,9г;

40

6,2%.

Наряду с этим определяют показатели перекисной резистентности эри- троцитов: Е, 6,08; Е,, 0,08; Е, 0,08; Е4, 0,04.

Производят рассчет показателей перекисной резистентности эритроци тов:

50

ПРЭ

(0,08-0,04) X 100 0,37 - 0,04

55

- X 100

оТзз

22% Испытуемая Д.Г.И,.подъем на высоту 3200 м перенесла удовлетворитель-

обычные сдвиги со стороны дыханий и

513777326

но. Жалоб на плохое самочувствие не П р и м е р 3. Использована предъявляла. Объективно: отмечень кровь исследуемой Д.Г.И., температу ра и время выдержано такое же, как в примере 2. И зменял рацию эритроцитов:

СМГТГХГ

0,020,100,09

0,040,130,11

0,050,160,1:2

0,060,150,14

0,080,150,18

кровообращения, характерные для этой призере 2. Изменяли только концент- высоты.

Концентрация эритроцитов, %

2 , , . . - .; 5 . . 10 15 20

Таким образом, оптимальной является концентрация 10%, граничным 5 и 15%..

Как .видно из приведенных примеров, при концентрации эритроцитов 0,2% падает величина экстинкдии, при 20% ингиб1фуется холодовой гемо« ЛИЗ эритроцитов, т.е. при этих условиях указанная вьше закономерность не выявляется. Форму л а и 3 о б р е т ей и я

. Способ определения неспецифической резистентности1организма к условиям высокогорья, включающий инкуба-

ции пробы цитратной крови, центрифугирование и определение экстинкции с последующим расчетом, от л и - ч а ю щ и и с я тем, что, с целью повышения точности способа, инкубируют две пробы крови, одну при (f4l )- (НЗ)С, другую при () - ( + 10) С в течение 30-90 мин, затем обе пробы дополнительно инкубируют при (-ИВ) - (+22)С, при этом перед первой инкубацией пробы разводят до концентрации 5-15% далее рассчитывают коэффициенты тепловой и холодовой резис- тентности.эритроцитов, а о резистеи- тности организма судят по соотноше нию рассчитаяных величин.