Способ определения нарушений внешнесекреторной функции поджелудочной железы Советский патент 1988 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний поджелудочной .железы.

Целью изобретения является повы- шение точности и информативности способа путем определения скорости секреции холестеролэстеразы после гормональной стимуляции поджелудоч ной железы.

Пример 1. Больной К., 48 лет. Поступил с жалобами на тупые ноющие боли в левом подреберье с ир радацией в спину, тошноту. Из анализа известно, что в течение 5 лет страдает постоянными болями в верх ней половине живота опоясывающего характера. При осмотре: рост 168 см, масса тела 60 кг. При пальпации живот мягкий, печень и селезенка не пальпируются.

В анализе крови и мочи изменений Нет. Амилаза, липаза и трипсин в сыворотке крови в норме. При дуодено- графии отмечены косвенные признаки увеличения головки поджелудочной железы. УЗИ: повышение эхогенности поджелудочной железы. Проведено определение нарушений внешнесекреторной функции поджелудочной железы с опре- делением в дуоденальном содержимом холестеролэстеразы по предлагаемому способу.

Способ осуществляют следующим образом.

Исследование проводят после 14ч голодания. Дуоденальное содержимое получают двухканальным гастродуоде- нальным зондом (типа Лагерлофа). Положение зонда контролируют рентгено- логически. Оливу, указывающую на положение конца .дуоденального канала, устанавливают, в нижнегоризонтальном отделе двенадцатиперсной кишки. Непрерывно, раздельно откачивают желу- дочный сок, дуоденальное содержимое с помощью водоструйного отсоса. Пос ле полной аспирации желудочного сока в течение 20 мин в пробирку, помещенную в контейнер со льдом, собираю базальную порцию дуоденального сод«гр жимого (порция № 1). Затем проводят стимуляцию поджелудочной железы. В качестве стимулятора применяют пан- крерзимин внутривенно в дозе 2 ед/кг веса больного и секретин внутривенно в дозе 1 ед/кг -веса больного. После стимуляции панкреозимином собирают дуоденальное содержимое в течение

20 мин (порция № 2), а затем еще тр 20-минутные порции после введения секретина (порции № 3-5). Всего получают 5 порций дуоденального содержимого, измеряют объем каждой порции и во всех определяют активность холестеролэстеразы. Активность холе- стеролэстёразы дуоденального содержимого определяют флюориметрическим методом, используя в качестве субстрата холестериловый эфир 0-кумаровой кислоты. Растворяют 1 мг холестери- лового эфира и смешивают с 40 мкл тритона х-100. Добавляют 1 мл буферного раствора, содержащего 0,3 М фосфата калия и 5 мМ холата натрия (рН 6,6). Смесь тщательно перемешивают, избегая пенообразования. Полученная таким образом дисперсия субстрата стабильна в течение 1 сут, затем 0,02 мл субстратной смеси добавляют к О,, 2 мл указанного буферного раствора и 0,02 мл дуоденального содержимого. Инкубируют реакционную смесь при 37 С. Отбирают пробы по 0,1 мл и фиксируют их прибавлением 0,5 мл буферного раствора, содержащего 0,2 М KjCO, и 0,2 М н:,ВО.э(рН 10,4). Затем добавляют 5 мл дистиллированной воды и измеряют прирост интенсивности флюоресценции на флюо- риметро-БИАН-130 при 365-470 нм. В конце измерений добавляют 1 мкг О-, кумаровой кислоты в кювету с целью определить, какое количество 0-кума- ровой кислоты соответствует единице показаний флюориметра.

Измеряют прирост интенсивности флюоресценции на линейном участке кинематической кривой за 15 мин инкубации реакционной смеси. По измерению прироста интенсивности флюоресценции определяют активность холе- стеролэстеразы. За 1 ед. активности холестеролэстеразы условно принято такое количество фермента, которое за 15 мин инкубации приводит к образованию 1 мкг О-кумаровой кислоты в 0,1 мл инкубационной смеси.

Оценка результатов исследования активности холестеролэстеразы дуоденального содержимого проводится по показателям скорости секреции, определяемой по формуле CV/T, где С - концентрация фермента, ед.; V - объем порции, мл; Т - время, за кото рое получена порция, мин.

У больного К. скорость секреции холестеролэстеразы составляет 0,2 ед/мин, что соответствует гипо- секреции поджелудочной железы.

Следовательно, у данного больного скорость секреции холестеролэстеразы оказалась единственным измененным показателем, позволившим диагностировать хромический панкреатит с на- рушением внешнесекреторной функции поджелудочной железы.

Пример 2. Больной Т., 37 лет. В течение 5 лет страдает частыми рецидивами болей в левом под реберье. Поступил спустя 3 недели после очередного приступа с жалобами на тупые боли в левом подреберье, иррадиирующие в спину. При осмотре рост 174 см, масса тела 61 кг. Язык обложен белым налетом. Печень и селезенка не пальпируются. При пальпации живота отмечается болезненность в области проекции поджелудочной железы.

Анализ крови, мочи и кала - без изменений. В сыворотке крови - повышение уровня липазы 2,2 ед. (н. 0,5- 1,6 едХ, содержание остальных фер- ментов не изменено. Рентгенологическое исследование желудка и двенадца- типерсной кишки: к свенные рентгенологические признаки увеличения голов-

ки поджелудочной железы.

Проведено исследование ферментов также в дуоденальном содержимом. Выявлено повышение уровня липазы, амилазы, трипсина. При исследовании активности холестеролэстеразы установлено по методике, приведенной в примере 1, значительное повышение скорости секреции холестеролэстеразы (2,5 ед/мин). В предлагаемом способе

.определение скорости секреции холе- стеролэстеразы позволяет подтвердить диагноз хронического панкреатита с гиперсекреторной функцией поджелудочной железы. Формула из. обретения

Способ определения нарушений внешнесекреторной функции поджелудочной железы путем исследования активности ферментов в дуоденальном содержимом, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности и информативности, в дуоденальном содержимом определяют скорость секреции холестеролэстеразы с использованием в качестве субстрата холестерилового эфира 0-кумаровой кислоты и при уровне секреции 0,8 ед/мин и ниже определяют гипосекрецию поджелудочной железы, а при уровне 2,2 ед/мин и вьш1е - гиперсекрецию.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний поджелудочной железы. Цель изобретения - повышение точности и информативности способа путем определения скорости секре1цш холесте- ролэстеразы после гормональной стимуляции поджелудочной железы. Для этого исследование проводят натощак, двухканальным гастродуоденальным зондом, контролируемым рентгенологически. Непрерывно, раздельно откачивают желудочный сок, дуоденальное содержимое. Затем проводят стимуля- щпо поджелудочной железы (панкреози- мин в/в - 2 ед/кг веса больного и секретин в/в - 1 ед/кг веса больного). После стимуляции панкреозимином собирают дуоденальное содержимое (порция № 2), после введения секретина берут еще 3 порции (№ 3-5). Всего получают 5 порций, измеряют их объем и определяют активность холе- стеролзстеразы флюориметрически, используя в качестве субстрата холе- стериловый эфир О-кумаровой кислоты. По измерению прироста интенсивности флюоресценции определяют активность холестеролэстеразы. За ед. активности холестеролэстеразы условно принимают кол-во фермента, которое за I5 мин инкубации приводит к образованию 1 мкг О-кумаровой кислоты в 0,1 мл инкубационной смеси. (Л 00 vi 4