Способ определения патологии гастродуоденальной зоны у детей Советский патент 1988 года по МПК G01N33/92 

00

ч

4

СО

Изобретение относится к медицине а .именно к детской гастроэнтерологи и может быть использовано в дифференциальной диагностике,Целью изобретения является повышение точности и ускорение способа путем определения в слюне содержания эйкозопентаеновой кислоты.

Способ осуществляют следующим образом.

Собирают у больного слюну утром, натощак. Для анализа используют 1- 2 мл слюны, взятой после центрифугирования при 1500 об/мин в течение 15 мин.

Экстракцию липидов проводят смесью хлороформ - метанол в соотношении 2:1 по объему в расчете 10 мл смеси на 1,0 мл слюны, Раст- воры смешивают и встряхивают в течение 2-3 М1Ш. После расслаивания жидкостей верхнюю фазу, содержащую воду и обезжиренную слюну отсасьша- ют с помощью водоструйного насоса, органическую (нижнюю) фазу промываю 0,74%-ным раствором хлористого калия (в расчете 2 мл на 10 мл смеси) который после встряхивания и расслаивания жидкостей удаляют. Затем дважды проводят очистку органической фазы дистиллированной водой (2 мл на 10 мл смеси) путем встряхивания в течение 1-2 мин,

I

Отмытую таким образом органическую фазу упаривают под вакуумом (или под струей азота) до капли и проводят метилирование жирных кислот путем добавления 2,5 мл 5%-ного раствора серной кислоты в метаноле и двухчасовой инкубации при 80°С в сухом термостате в пробирках со шлифом. По истечении указанного времени пробирки охлаждают под струей холодной воды и проводят резкстрак- цию метиловых эфиров жирных кислот путем встряхивания смеси с водным раствором смеси гексан-- эфир 1:1 по объему в расчете 10 мл на 1 мл исходного материала (слюны). После расслоения жидкостей верхнюю фазу переносят в чистую пробирку и упаривают досуха под струей азота. Осадок растворяют в 10-20 мкл гексана и анализируют на газовом хроматографе серии Цвет-110 с ионизадионно- пламенным -детектором в двухметровых стеклянных колонках (внутренний диа

ю

15

20 25 0

35

до г

0

метр 3 мм), заполненных хроматоном- супер (0,125-0,160 мм) + 4,5% поли- диэтиленгликольсукцината при температуре испарителя 220 С, термостата колонок 185°С, скорости газа-носихе- ля (азот) 30 мл/мин, чувствительности усилителя 200 мм/ч,

В качестве внутреннего стандарта использовали метиловый эфир маргариновой (Ci7io ) кислоты 85% хрома- тографической чистоты. Расчет хрома- тограмм проводили с использованием метода внутренней нормировки. Результаты выражали или с мкмоль/л сум- мированньпс кислот, или в относительных процентах для каждой жирной кислоты.

Пример, Ира Д., 5 лет, В анамнезе острые респираторные заболевания до 5-6 раз в год. Жалобы на боли в животе, плохой аппетит. Отнесена к группе риска по гастро- энтерологическим заболеваниям, взята на диспансерный учет. Через 6 мес. проведено исследование слюны согласно предлагаемому способу. Установлено, что содержание в слюне эйкозопентаеновой кислоты (20:5) снижено до 5,0%, Больная госпитализирована. На основании комплексного лабораторного и инструментального обследования поставлен диагноз: хронический гастродуоденит, эрозивный буль- бит,

П р и м е р 2, Валера К., 5 лет. В анамнезе частые респираторные заболевания, аденоиды. При врачебном осмотре заподозрено наличие гастроэнтерологического заболевания на основании жалоб на боли в животе, не связанные с приемом пищи. При повторном обследовании проведено исследование слюны на содержание эйкозопентаеновой кислоты (20:5). Уровень кислоты составил 4,9%, на основании чего поставлен диагноз: гастродуоденит. Диагноз подтвержден при эндоскопическом обследовании больного амбулаторно. I

Пример 3. Гриша Б., 13 лет. Болен мальчик с раннего возраста. Периодически отмечались боли в животе, рвота. В течение последних двух лет боли в животе стали более постоянными. При поступлении в клини ку предъявлял жалобы на отрыжку, боли в животе. Объективно: живот при

пальпации мягкий, умеренно болезненный в эпигастральной области. Язык обложен белым налетом. Для определения характера патологии сог- ласцо предлагаемому способу больному было проведено исследование в фос- фолипидах слюны спектра жирных кислот. Выявлено снижение содержания эйкозопентаеновой кислоты до 4,5% (при норме выше 5%). Полученные данные позволили предположить заболевание гастродуоденальной зоны. Для уточнения диагноза дальнейшее обследование больного проводилось целе- направленно.

При фракционном желудочном зондировании с последующим исследованием желудочного сока установлено резкое повышение кислотно- и ферментообра- зующей функций желудка на фоне снижения защитных факторов - концентрации муцина в порциях желудочного сока до 37(1), 30 (II) и 23 (III) при нормах соответственно 57,72 и 59.

Гастрофиброскопическое исследование выявило признаки хронического смешанного гастродуоденита в фазе обострения, деформацию луковицы 12-перстной кишки и на нижней стенке ее 2 язвенных дефекта.

Окончательный клинический диагноз : язвенная болезнь желудка и 12-перстной кишки в фазе обострения

Использование предлагаемого способа диагностики заболеваний гастродуоденальной зоны у детей в педиатрической практике позволяет повысить точность диагностики путем повышения специфичности способа до 95%, сократить время обследования больного до одного дня, обеспечить воз можность экспресс-диагностики в необходт« к случаях, а также обеспечить новый патогенетический подход к диагностике и терапии гастродуо денальных заболеваний.

Формула изобретения

чСпособ оп ределения патологии гастродуоденальной зоны у детей путем определения жирных кислот в биологической жидкости методом газовой хроматографии, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, в слюне определяют содержание эйкозопентаеновой кислоты и при значении ее концентрации 5% и ниже диагностируют патологию гастродуоденальной зоны у детей.

Изобретение относится к медицине, точнее к детской гастроэнтерологии, предназначено для дифференциальной диагностики. Цель изобретения - повышение точности и ускорение способа путем определения содержания в cjBOHe зйкозопентаеновой кислоты. Для этого проводят газовую хроматографию, определяя содержание жирных кислот в биологической жидкости, к при концентрации-зйкозопентаеновой кислоты 5% и ниже диагностируют патологию гастродуоденальиой зоны у детей Предлагаемый способ позволяет сократить время обследования больного до одного дня, провести зкспресс-диагностику в необходимых случаях, обеспечить новый патогенетический подход к диагностике и терапии гастродуоденапьных заболеваний. (Л