ГЛУТАМАТ П-АМИНОМЕТИЛБЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ, ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ И АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1994 года по МПК C07C229/24 C07C229/38 A61K31/195 

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно к глутамату n-аминометилбензойной кислоты формулы I
HOOC-CH₂CH₂COO^-·H₃N⁺-CHCOOH обладающему антифибринолитической, противовоспалительной и антимикробной активностью, который может найти применение в экспериментальной биологии и медицине.

Цель изобретения - изыскание новых производных глутаминовой кислоты, обладающих более высокой антифибринолитической, противовоспалительной и антимикробной активностью.

Поставленная цель достигается соединением формулы I.

П р и м е р. 7,35 г (50 ммоль) глутаминовой кислоты и 7,55 г (50 ммоль) n-аминометилбензойной кислоты растворяют при кипячении в течение 10 мин в 50 мл воды. Полученный раствор кипятят 5 мин с 1 г активированного угля и фильтруют. Выпавший при охлаждении фильтрата белый кристаллический осадок отфильтровывают, промывают 70%-ным водным этанолом и сушат.

В итоге получают 12,8 г (87%) I с т.пл. 204-205^оС.

Элементный анализ.

Найдено, %: С 52,6; Н 6,0; N 9,1.

Вычислено для C₁₃H₁₇N₂O₆, %: C 52,3; H 5,7; N 9,4.

Полученное соединение было изучено на антифибринолитическую, противовоспалительную, антимикробную и антиагрегационную против тромбоцитов активность.

Исследование проводилось в сравнении с известным структурным аналогом - глутаматом ε-аминокапроновой кислоты (II).

Антифибринолитическая активность исследуемых соединений была изучена в опытах in vitro на модели экспериментального фибринолиза, активированного стрептокиназой. С этой целью в кювету тромбоэластографа "Тромб-2" помещали 0,21 мл донорской плазмы, 0,05 мл вероналмединалового буфера с рН 7,4 (контроль) или 0,05 мл раствора исследуемого соединения и 0,04 мл раствора стрептокиназы активностью 1500 МЕ/мл в вероналмединаловом буфере. Запись тромбоэластографии производили по общепринятой методике с определением показателей, характеризующих активность начальной фазы: P - тромбопластинообразование; МА - максимальная амплитуда; L - время фибринолиза; наличие следов фибриногена в содержимом кюветы после окончания регистрации процесса свертывания. На основании полученных данных рассчитывали относительную активность (данные контроля приняты за I). Полученные результаты представлены в табл. 1.

Противовоспалительную активность соединений I и II изучали на модели острого воспалительного отека, вызванного субплантарным введением медиатора воспаления. Противовоспалительная активность исследуемых соединений оценивалась по способности ингибировать отек, вызванный введением гистамина или трипсина в заднюю лапу крысы. Соединения вводили перорально в дозе 50 мг/кг через 30 мин после введения медиатора воспаления. Отечность исследовалась в течение 3 ч после введения препаратов.

Полученные результаты представлены табл. 2.

Антимикробную активность соединений I и II изучали методом последовательных серийных разведений на жидких питательных средах (мясопептонный бульон, среда Хоттингера) с учетом минимальной подавляющей концентрации, соответствующей максимальному разведению препарата, при которой наблюдается полное подавление роста бактерий при нормальном росте в контроле. Исследование проводилось с использованием 20 штаммов патогенных микроорганизмов: 2 стандартных штамма St. aureus 209 P. E. coli M-17 и 18 штаммов, выделенных от больных остеомиелитом.

Полученные результаты представлены в табл. 3.

Влияние соединений I и II на коагуляционную активность тромбоцитарной донорской цитратной плазмы было изучено методом тромбоэластографии. С этой целью на тромбоэластографе "Тромб-2" производилась графическая запись процесса коагуляции донорской плазмы в присутствии и отсутствии исследуемых соединений. Соединения использовались в концентрации 10^-3 М.

Полученные результаты представлены в табл. 4.

Кроме того, было изучено влияние соединений I и II на агрегационную способность тромбоцитов. С этой целью было проведено автоматическое регистрирование процесса агрегации тромбоцитарной плазмы в присутствии АДФ при различных концентрациях исследуемых соединений (10^-3-10^-6 М).

Полученные результаты представлены в табл. 5.

Острая токсичность соединения I была изучена на мышах при внутримышечном введении 20%-ного водного раствора. Учет выживших животных проводили через 24 ч. В результате проведенных исследований установлено, что описываемое соединение является малотоксичным и имеет величину ЛД₅₀ более 2000 мг/кг.

В результате проведенных исследований установлено, что глутамат n-аминометилбензойной кислоты (I) по антифибринолитической и противовоспалительной активности превосходит, а по антимикробной активности сопоставим с известным структурным аналогом-глутаматом ε-аминокапроновой кислоты (II). Кроме того, описываемое соединение в отличие от своего структурного аналога обладает антиагрегационным по отношению тромбоцитов действием.

Изобретение относится к производным глутаминовой кислоты, в частности к глутамат n - аминометилбензойной кислоты, который обладает антифибринолитической, противовоспалительной и антимикробной активностью. Цель - выявление новых соединений указанного класса, обладающих повышенной активностью. Получение целевого соединения ведут из глутаминовой кислоты и n - аминометилбензойной кислоты при кипячении в водной среде. Выход 87 %. Т. пл. 204 - 205 °С. Брутто фор-ла C₁₃H₁₇N₂O₆·LD₅₀>2000 мг/кг . Испытания показывают, что полученные соединения, кроме указанных свойств, обладают антиагрегационным действием. 5 табл.

Глутамат п-аминометилбензойной кислоты формулы
HOOC-CH₂CH₂COO^-·H -CHCOOH
обладающий антифибринолитической, противовоспалительной и антимикробной активностью.