Сукцинат моно @ /2-диметиламино/-этилового эфира @ янтарной кислоты,обладающий адаптогенным и стресспротективным действием Советский патент 1988 года по МПК A61K31/22 A61P43/00 

0

со

Изобретение откоситсм к: , химическому соединенгао,, -:. кменнс; к сукцикату моно (2-дике гп:ла С :)-ю)зт иСН о -СОл}Сн,СН.;н1с

сну--с;(он

обладакицему адаптогенны : и стрсс;; - протектнвным действием,, котсрый жет кайтк применеттие з зкслтерике.н- та.:1ьной биологии и ме;:п-/1Нг5е„

Цель изобретения - ; : hU какие /-к;-

ВЫХ производных KHTapHOi КВ --ЛО1Ч:., (б--л ад ающих в ьф аж е к KhiNS ад;;, 11 т о г е я ныт-г

и стресспротективнь м ,г;;;йствиам ;;i со-

четании с низкой r oKC ii i :1ос :; т п,

Поставленная цель дс :; о-:гае гс}: :::1)П- динением формулы I,

П р и м е у, 18„9 : 0, : .МОП-; моно (2 диметилами11:о) эт i,ojin -о .-;;;а янтарной кислоты pac r/voo aR : ревании в 100 мл этаио.:::. К nojiyuarr- ному раствору нриба. рлс:тнор 5,9 г (0,05 моль) ян гарлок .:;-:слс 1., в 50 мл этано:1а„ Реакд :; Г ;уда смес.ь оставляют на 12 ч гфи Z ), яг итавшргй белый ме.лкокриста.лличес:с; :й с садск отфильтровывают и П(2рек: 1-ст .г:лияс1:;:1ь:- вают из этано. В ито:: ; по.-д/чак -у 22,0 г (84%) I с т.,Ш, )64:,; R|: 0,37 (Склуфол i;v--25 r , ,.ь У1«:усная кислота - вод,а 5:;2;4)„

Найдено,,%: С 48,, 18;; :i 7,.7; N5,71;

C,,n,,N.,0,,, (О 3fo i (i „

Рассчитано5 и; С 48, ;8;; ii 7., 2 ;: N 5,64.

Лдаптогенное и стрес: ::.П1Хггоктнт;;10Р действие соединения I б-лпс ;-:зуч8 ;о h; опытах in viAro jia .x ./ -с.-ысах г;о целому ряду тестов,

Влияние на резистект JiocTii к Tp(v му X о л од о в о м у в о 3 д е и с ;: t s: i ;;; „

Исследование прсзоди. ;и на М иах- самдах, тетра У ибрклаХ; : г- ассой -- г пй 18-20 г в сразненкк с н:1вес Г;;ьЕ-1 структурным аналог ом - :-ioao I ; метиламино) этштовьпч эфиром ; .янтарной кислоты (тонибралом) и ..г/кдкнатом натрия.

Экснерименталы-ь.к лшэотньгх помещали в холодов ло камеру )и (-13)- -(17) С в отдельньйс ап.астмассовьк клеткаХ), несколько огра/гичивающих их активность, В опытах оценивали вь живаемость животных в условиях длительного (6 ч) хо.;тадово о воздейстфорьгу0

5

с;н2- со он

iiiiH , Исследз/ймые coeruiiieiniH вводкаи яиутрибрюлтин-(О sa 1 ч до гюмешения в холодовуро ка/-и;ру„ Ж -гвотньш контрольной грунп1, вчздили физиологический раствор,,

Полученные результаты нредставлены f; т а бл в 1 .

Влияние на содержание субстратов иергетичестсс гс cfi -icna н активность . тегидрог-а ;; ;- : м-;гокардс при /:;озирован- ом AO. h; u:: 3C - ;: o }jj,e:iCTBHH,

Иса юдг-мам-la ггрод одили на мкшах- :л.миа;,: -i;u;c:O 18--2 О г в сравнении с ггл ибралэ.; , ii,;( тедуамьге с; о единения 1-;;с;Я -;л: э;:1 1 i ло П(С цения экснери- ;с И ган:ькг Г ; лстмотньгх п холодовую каме- с ге псра : упо 1 --14 С;, Содержание с Остра : он о-т чргптическод о обмена и :ч;:т;шность де н;Т1;огеназ г- жокарде .1.:е.пялк мс,,ду 2 и 3 ;асом холодо- :гс воздайс лзия сбшепринктыки мето- coriepMii :ie г.аюкозы в крози - о-толудинс выс1 1-5е7одом5 Г1;икогена в и счени и I--:JT:Oкарде - по методике Ло и соавторов,, гда 1инозые нугслеотиды миокарда и К| еат гнфосфат определяли 3 |-::з -;мат -1ческ 1, активь ость дегидро- г-аназ о;леннчали на криос1 атньгх срезах Окарда об;цс 1ринятьь:и гкстохимичес мето.;1амя; СоединеннЕ; . вводили 5 доза 80 кг/кг, тонибрах: я дозе 54 мг/кг.

По.путтенные результать; представле- Hbi ц габл, 2 л 3,

Как В - Щно 13 .данных тзбл 2-3. продБарительнэе введение соединения I снособству« 7 большей ссхранности -:;сдер;ка.нил гл;окозы и гликогена Б миокарде, нояьпаа.1т содержание адеР1И.повьгх н У ч.пео : и;1ов v креаткнфосфата в миокарде существе :IHO повышает активность ключевьос ферментов вдюпа Кребса Этот фактор иметь существенное зна- чение при выж ваемости5, так как одной и.з причин гибели при остром охлаждении является сердечная недостаточность,.

Влияние на феномен адапташ и к хо- лодовому воздействию.

Исследование ВЛИЯЕ-;ИЯ соединения I на феномен адаптации к холодовому воздействию проводшти по методу Ла Бланка на мьпяах-самцах с массой тела 18-20 г.

Экспери 1енталу ньгх животньп/ помещали в холодовую камеру при -17°С на 10 мин ка;-кдый час на протяжении 9- 10 ч. Через 1 сут исследовали максимальную длительность жизни животных при -17 С, содержание глюкозь; з кров и гликогена в органах при дозированном (2,5 ч при -14 С) холодовом воздействии, I и тонибрал ввдили сразу после серии кратковременного холодового воздействия в дозах 80 и 64 мг/кг соотвотствен 1О-, Fs -;яст опытов соедине 1:ме 1 тшо/тили за 1 ч до тестргрз ющего холслозсго воздействия ,

По.пученные ре з :1ьтатр 1 представлен в табл. 4 и 5.

Как видно из дл., приведеита гх в табл, 4-5, введение соединения I существе1- но ууел ич гвает зф4)скт a;,ari тации, что гфоявляптск в уве.чгчешти длитель юсти жзгзии до замерзания и в зна чительно большей сохранности уровня глюкозы в крови и гликогена в органах при кратковременном (2,5 ч) холодовом воздейс т вии,

Стресспротект; в ;ая активность.

Стресспротективная активность предлагаемого соединения была изуче- на на модели двигательного стресса с использованием методики лишения

и воды в медленно вращающемся барабане Исследование проводт-ши на 42 беспородных крысах-самцах в сравнении с тонибралом и известным трапкливи- затором диазепамом. Параллельно исследовали 4 группы животных о I и II группы помещали на 48 ч в барабан, вршцающийся со скоростью 0,2 км/ч, а III и IV группы находились в обычных условиях и были лишень только ,пищи и воды,, Соединение I и тонибрал вводили внутрибрюшинно в дозе 10мг/кг 2 раза в сутки в объеме 2,5 мл в условиях двигательного стресса (I группа животных) и в обычных условиях (III группа). Контрольные животные - II группа (активныз контроль) и IV груп

па (пассивньш кор троль) получали физиологический раствор. Оценку эффективности соединения 1 тонибрала и деазепама, которьм ввод1-ши по той же

iU

5

проводили по 1. характернзуюП

30

(О

45

5

схеме в дозе 5 мг/кг

комплексу показателе,

niioc функциональную активность ЦНС,

физическую выносливость и развитие

основных гфоявленггй стресс-синдрома.

Пребывание контрольных животных в медленновраш.аю1 1емся барабане на протяжении 48 ч приводили к с ,1цест- вен;юму ухудшению всех исследуе 1ых показателейз особенно показателей высшей нервной деятельности ( ние) , и разв1-:ти10 стресс-С Лндрома. Состояние контрольных животных характе- рт зовалось сН)Е-кс5}1ием общей поведенческой активности по тесту открытое поле (37ti5%) от уровня пассивного контроля, с1Т-гже5П ом скорости }1ого рефлекса 1збйга 1ия (УГИ) в вод- иом л.10и;) (:;8-1:1т 0 уз слпчеш ем количества ог.л-гбок за обу-5ет я (175 + 2.%, сн;скег-1:ем предельной фи- 3H4Cc ;oi i выносливости по тесту гшава- ние с грузом, ратз; ьм 10% от ассы

70+17), гипертрофии надпочеч- 46+1бй) атрофией тплгуса и образо}за;;исм язв слизистой оболочки желудка (5 , 25+1 ,, 0%) .

Исследозание соединения I в условиях двигательного стресса выяв:.1ЧО его вь раженное действие в отно:аении как показателей функциональной актиБност jUiC, так и в отношении разв;ггия целого патоф11зи- олог - ческих проявлений стресс-С П1дро- ма, соед.инешья I повысядо общую поведе}1чсску;с активность (85+10%), физическлоо выносливость (143+28%) снизило язвообразование на слизистой оболочке желудка (4,,5%) и полностью высшую нервную деятельность в условиях (100±9%). Ана- логич1 ые исследования были проведегш с тонибралом и диaзeJч;l ioм.

Полученные резз- льтаты представлены в табл. 6,

Как видно из данн ых, приведенных в табл. 6. соединение I обладает отчетливо вьгра; кенной стресспротектив- ной активностью и превосходит по активности тонибрал. Предлагаемое соединение i U-iceT пpeи глдecтвa по сравнению с аналогом по действшо - диазепамом; на фоне соединения I с тцест- венно вьаие понеде ческая активность} значительно Meiibiiie нарлтпаются процессы обучения и вос.произ;5едения навыка, значитедьно вьпие (Ьизическая выносливость на фоне стрессорного воздейст-

5143395

ВИЯ а На фоне диазепама -з большей мере пред ттреждается яззообразованик и меньше сния ается весовой коэф4 и- циент тимуса,, хотя гипегатрофия надпочечника большеэ чем при введенир соединения I.

Токсичность,

Острая токсичность соепкншния I и тонибрала была на t-ttiniia ;: при |п внутрибрюшинном и перорапьном введе- НИИ. Значения величин , бьши рассчитаны по методу Беренса. При перо- ральном введении ЛД дг;я соединения I превьппает величину 10000 г г/кГ; для тонибрала ДЦ5о 4501 мг/кг, при

15

В ;утрибрюшин1--:ок введении для соединения 1 Я1-{, 3040 1 102 Mr/KFf а для тонибрала 2650 ± 248 мг/кг,

В результв.те-. проведенных исследований установлено,, что предлагаемое соединение облядает вьфаженным адапто- генньм и стресспротективным действием в сочетан1 ;и с низкой токсичностью.

Формул изобретения

Суктшнат моко (2-ДуШетиламино)эти ювого эфира (янтарной кислоты срорк

Изобретение касается производных кислот, в частности сукцината мо- но (2-димет1шаминр) этилового эбитза. янтарной кислоты (СЯК),который обладает адаптоге 1ным и стресспротектнвньм действием и может быть использован в медицине. Цель изобретения - создание активных веществ указанного класса с низкой токсичностью. Синтез СЯК ведут из моно С2-диметиламнно)этилового эфира янтарной кислоты и янтарной кислоты при нагревании в среде этанола. Выход 84% и т.пл. 134-136 С, Испытания показьшают, что СЯК существенно увеличивает эффект адаптации к замерзанию и продолжительности жизни до замерзания. Токсичность СЯК - LDj.- 10000 мг/кг, , в 2 раза вьпве тонибрала (4500 мг/кг). 6 табл.

сн, - С О О :н.) сн 2 icK -, 2

- G,b

СН 2 -- С О Г; -{ci i:; - со он;

облада ощий адаптогеинын и стресспро-- ТОСТКБМЫМ леиств1 ;ем.

Т а б л я ц а 1

Влияки.; на выживаемость -2:.ш1ей. при осгр.С К охлажтеник

I 14J. , ™„ чсовз ч иоединение

L),:ILlijii jilLi

Соединение I 80 100 100 100 90 7G 70 Тонибрал 6 100 90 70 50 20 tO

Сукцинат 17 100 80 70 40 tЭ О натрия

Т э, О л и ц а : .

Р зкенение, биохимических показателей у мыжай при дозированном холодовом зоздвйствнн на фоне и{ . с.ледуемьв;: соедикений

Биохим т геский Интй.ктно8| КонтрольСоедикен:яе

субстратхдавотное

Токибрал

Глюкоза крови

(мг %).791:3

Гликоген

сердца.

(мг/г)

42+4

64+2

2,2+0,1

1,9+OJ

35,2+4,5 8,110,6 9,8+1,2 6,7±0,8

2,2+0,3 1,5tO,1 1,9±0,2

0,78+0,03 0,49+0,02 ,04

0,51+0,02 0,45+0,01 0,32+0,02

U

3,7 + 0,3 1,2tO,08 2,3 + 0,1 1,4 + 0,04

Различия с контрольной группой статистически верны.

Таблица 3

Влияние исследуемых соединений на активность дегидрогеназ в миокарде при дозированном холодовом воздействии

-

-

72,3+1,6 90,2+1,8 75,6+2,4

49,5+1,2 60,4+1,6 58, 2+1,4

68,8+1,5 78,3+1,7 72,4+0,6

56,6+1,1 68,9+1,3 62,6+3,5

69,8+1,5 73,4+2,.О 70,8+2,7

72,1+1,4 85,9+1,7 76,4+2,7

57,3+1,3 67,4+1,5 60,2+1,4

Различия с контрольной группы статистически достоверны

14339578

Продолжение табл. 2

Т а б л и ц ;. ч

Максимал :ная ;длительность жизни л-ацаей при тестирующем xoлoд():9O всздействки

Вариант воздейстни/

Г

Число

ЖИВОТЮ-Л.

Интактное животное

Предварительная а,а,яптаЦП я.

Пред3арит ельпак ;ii;a,an- тагсия соединенна I

Предварительная йдаг:- тация тоии5ра.п

Соединение I за i ч до холодового войцейСТБИЯ

Адаптация + coe,q;-iHe ние I (сразу адаптации)

Адаптация + тснкпрал (сразу после адаг:та- ияи)

Адаптация сседт-:не-ние I (за 1 ч: дс х.оло дового воздействр:я)

Со(5динение I (за 1 ч до холодового воадейст- вия)

591-2,,6- 2,,2+3,4

Интактные животные содер7 :ались при

Различия с контролем статистически достонерньи

Длительность жиэтш, ч

6,DtOfS 10, JtO,6

11,7±2,4

f-if

Таблиц

Влияние иссле;1оврлп1ь5х соеди ешп ; на показатели функционалы ой активности ДНС, физическую выносливость и проявления стресс-сигндрома в условиях двигател1 1го;, о стресс

Показате:и

Соединение Тонибрал

Диазепам

7,25tO,80 210+45

1,,5

Ь010±0,015

2,26±П,15