Способ моделирования сахарного диабета Советский патент 1988 года по МПК G09B23/28 

(Л

4:ik

00

i;0

О5

сл

00

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при изучении патогенетических механизмов возникновения и развития сахарного диа- бета, а также для разработки способов его профилактики и лечения.

Цель изобретения - воспроизведение доклинической стадии инсулинзави- симого диабета.

Способ осуществляется следующим образом.

Кроликам породы Шиншилла ежедневно на протяжении 3-9 мес вводят перо- рально глибенкпамид в дозе 1 мг/кг.

Пример. Кролику-самцу породы Шиншилла с массой тела 2,5 кг ежедневно на протяжении 3-х месяцев утром перорально вводят глибенкпамид в дозе 1,0 мг на кг массы животного. На 91-й день под легким эфирным наркозом животное забивают. Немедленно извлекают поджелудочную железу, которую фиксируют в жидкости Буэна. После фиксации железу проводят через батарею спиртов восходящей концентрации. Заливают в парафиновые блоки, из которых готовят гистологические срезы. Срезы окрашивают гематоксилин- эозином, а также хромовым гематоксилин фпоксином для дифференцировки альфабета- и дельта-клеток. Уровень сахара в крови исследуемого животного определяют по методу Хагедорна- Иенсена содержание антител к однонитевой ДНК в сыворотке крови - радиоимг нологи- чески.

При исследовании срезов железы под микроскопом установлено, что в 24% островков бета-клеток наблюдались явления гидропической дистрофии, . фрагментация и распад ядра, набухание цитоплазмы. В 3% островков с явлениями дистрофии имеют место лимфо- целлюлярная инфильтрация. Ли 4 oциты концентрируются в виде вала вокруг островков или отмечаются среди их клеток. В таких островках (с лймфо- целлюлярной инфильтрацией) ЯЕления дистрофии и распада бета-клеток бо- лее выражены, что соответствует морфологическим изменениям при доклинической стадии инсулинзависимого диабета. Гликемическая кривая при проведении перорального и внутривенного специфического тестов, а также уровень антител к ДНК в сыворотке крови существенно не отличались от контрольных значений.

Пример 2, Кролику-самцу породы Шиншилла с мАссой тела 2,7 кг на протяжении 6-ти месяцев утром перорально вводят глибенкпамид в дозе 1,0 мг на кг массы животного. На 182-й день под легким эфирным наркозом животное забивают. Гистологическую и гистохимическую обработку тка- кей, а также определение уровня сахара и антител к ДНК проводят соглас- D примеру I.

При исследовании поджелудочной железы изменения в бета-клетках островков поджелудочной железы, указанные в примере 1, составляют 45%, при этом в 15% с явлениями лимфоцеллюляр- ной инфильтрации. Обращает внимание большая выраженность дистрофических процессов в бета-клетках как в ост- кшвках с лимфоцеллкшярной инфильтрацией, так и без нее. Дистрофические процессы наблюдаются также в эпите- лжальных клетках экзокринной части поджелудочной железы, окружающей пораженные островки.

Гликемическая кривая при проведении перорального и внутривенного специфического тестов у животных, получавших глибенкламид в течение 6 мес., не отличались от контрольных значений. Уровень антител к ДНК достоверно превьш1ает соответствукяцие значения у интактных животных.

Пример 3. Кролику-самцу породы Шиншилла с массой тела 2,6 кг на протяжении 9-ти месяцев утром перорально вводят глибенкламид в дозе 1,0 мг на кг массы животного. На 273-й день под легким эфирным наркозом животное забивают. Гистологическую и гистохимическую обработку тканей, а также определение уровня сахара и антител к ДНК проводят, как описано в примере 1. Инсулинемию определяли радиоиммунологическим методом

Особенностью гистологического строения поджелудочной железы животного является то, что дистрофические изменения в бета-клетках и распад последних наблюдаются в 80% островков. При этом наряду с дистрофией и j распадом бета-клеток такие же процес- сь1 отмечаются в альфа- и дельта-клетках островков. Однако лимфоц.еллюляр- ная инфильтрация не обнаруживается ни в одном из островков. Параллельно с дистрофическими процессами в клетках островкового аппарата различной степени выраженности дегенеративные изменения отмечались и в клетках эпителия экэокринной части железы. Наря- ду с глубокими морфологическими изменениями в панкреатических бета-клетках, обнаруживаются и функциональные признаки инсулиновой недостаточности: повьппение гликемической кривой и сни- жение секреторного ответа бета-клеток на глюкозу при проведении перорально- го и внутривенного специфического тестов. Вместе с тем, уровень антител к ДНК в сыворотке крови не досто- верно отличался от соответствующих значений интактных животных.

Преимуществом предлагаемого способа является стабильное моделирование наблюдаемой в клинике последовательности патологических процессов, приводящих к развитию абсолютной инсулиновой недостаточности и манифестации сахарного диабета; появление аутоиммунных реакций, в том числе направленных против антигенов инсулярного аппарата поджелудочной железы (лим- фоидная инфильтрация), их приходящий характер и предшествование глубоким поражениям панкреатических бета-клеток, прогрессирующая направленность дистрофических и дегенеративных изменений в последних.

Формула изобретения

Способ моделирования сахарного диабета путем введения животным химических агентов, отличающий- с я тем, что, с цепью воспроизведения доклинической стадии инсулинзави- симого диабета, животным ежедневно перорально вводят глибенкламид в дозе 1 мг/кг на протяжении 3-9 мес.