Способ иммунокоррекции при аутоиммунном процессе Советский патент 1989 года по МПК A61K35/28 

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии и ревматологии.

Цель изобретения - снижение уровня иммунных комплексов в тканях.

Пример. Все мероприятия по получению перфузата проводили в стерильных условиях. Селезенку забирали от здорового животного, канкширова- ли артерию и вену,, после чего производили отмывку сосудистого русла селезенки от крови с использованием физиологического раствора. После этого селезенку перфузировали в замкнутом контуре 80-100 мл изотонического буферного раствора в течение 45-60 мин при температуре перфузата 36-37 С, оксигенации при давлении - в 2-3 атм. и коррекции КЩС перфузата до нормальных величин трис-буфером.

Скорость перфузии составляла 20- 25 мл/мин. При этом поддерживали необходимые условия для нормальной жизнедеятельности селезенки, о чем 5 свидетельствовала артерио-венозная разница по кислороду, равная 150± i4,7 мм рт.ст.

СЛ

10

Полученный перфузат стандартизиро - вали по количеству белка, оптимальное значение которого, как бьто установлено, составляет 5-6 мг/мл. Для осаждения незначительного количества клеточных элементов перфузат центри- 5 фугировали 5 мин при 1 тыс. об/мин.

При исслед овании активного начала раствора, полученного при перфузии селезенки, выяснено, что таковыми являются белки с молекулярной массой в 20 пределах 50000-80000 дальтсн.

U5A471

: Экспериментальной моделью служили нбредные мьпии NZB/W, у которых спонтанно развивается аутоиммунный про- txecc серологически и гистологически подобный системной красной волчанке (СКВ) у человека.

СКВ у мышей NZB/W является наиболее удобной,и адекватной моделью АУТОИММУННОЙ;-патологии, которая позволяет оцениеать этиопатогенез, а также изучить р&зличные способы подавления аутоиммунных процессов.

В эксперименте использовали 2 группы мышей - опытную и контрольную.

Использовали мышей весом 40-60 г, объем циркулирующей крови которых., составляет 2-3 мл (5% от веса). Раствор вводили в количестве 0,2-0,4 мл, что соответствовало 10% объема циркулирующей крови.

Опытной группе мышей вводили в/в 0,2-0,4 мл раствора, полученного путем перфузии изолированной селезенки 6-8 раз каждые 2-3 дня.

Контрольной группе животных также в/в вводили изотонический буферный раствор в том же режиме, что и в

опыте.

После проведения курса 8-разового введения раствора по описанной методике получили следующие результаты. В контрольной группе животных к концу курса введения изотонического L буферного раствора количество антител к ДНК в крови составило 35,-731 ±1,89 ед ().

В опытной группе животных эта же величина к концу курса введения раствора, полученного путем перфузии изолированной свиной селезенки, достоверно снизилась по сравнению с контрольной группой и составила 27,62t 1,74 ед (), Р 0,0t. Количество циркулирующих иммунных комплексов в крови в контрольной группе составило к концу курса 0,362 to,133 мг/мл (), а в опытной группе эта же величина к концу курса снизилась по сравнению с опытной группой в 5 раз и составила 0,072t to,029 мг/мл (), Р 0,05.

Отложение иммунных комплексов в тканях почек исследовали при помощи общепринятого прямого иммунофлюорес- центного метода. Площадь, занимаемую отложениями иммунных комплексов в сосудистом клубочке почки, оценивали по 5-6 балльной системе. В опытной группе животных после проведени

0

8-разового введения раствора оценка площади иммунных комплексов в почке составила 2,26i 0,06 баллов, ,001. Различия между группами сохранялись в течение одного.месяца после окончания курса, введения.

Предложенный способ подавления аутоиммунного процесса имеет преимущества перед прототипом, так как позволяет воздействовать на уже развившийся аутоиммунньм процесс, находящийся в конечной стадии развития. При введении простагландинов (способ- прототип) лечение начинали в ранней стадии развития иммунопатологического процесса (2-х месячные мьш1и) и продолжали в течение всей жизни животного. При этом замедлялась скорость отложения ИК в почках, но образовавшиеся ИК не выводились из организма. Введение препарата старым животным с ярко выраженными проявлениями аутоиммунного процесса было не эффективным. Предложенный способ позволяет добиться супрессии аутоиммунного процесса на любой стадии его развития.

0

25

0

5

0

Базовым объектом можно считать широко используемый для подавления аутоиммунного процесса препарат, относящийся к группе кортикостероидов - метилпреднизалон. Он способен снизить количество ИК и антител к ДНК в крови у мьшзей NZB/W. Механизм действия препарата заключается не в элиминации ИК из организма, а в угнетении синтеза антител за счет антианаболического эффекта.

Метилпреднизалон не вызывает уменьшения количества ИК, находящихся в тканях организма. Кроме того, длительное применение метилпредниза- лона обладает побочным эффектом, так как угнетает иммуногенез за счет катаболического действия на белок димфоидной ткани. 50

Преимуществом предложенного способа перед базовым объектом является возможность элиминации ИК из организма, причем этот эффект проявляется на разных стадиях развития аутоиммунного процесса. К томУ предложенный способ не обладает токсическими эффектами.

5

5U544716

Разработанный способ подавленияФормула изобретения аутоиммунного процесса является за- способ иммунокоррекции при - аутоконченньм решением и может быть при-иммунном процессе путем введения имменен для супрессии аутоиммунныхмуномодулирующего средства, о т л и процессов. Он прост в исполнении, 5ча„щ„йся тем, что. с целью

курс введения препарата ограниченснижения уровня иммунных комплексов

месяцем, что отличает его от извест- тканях, парентерально вводят растных способов, требующих многомесяч-вор, полученный путем перфузии изолнного или даже пожизненного введения рованной свиной селезенки, в объеме

препаратов.10% от объема циркулирукщей крови.

Изобретение относится к иммунологии и ревматологии. Цель изобретения - снижение уровня иммунных комплексов в тканях. Сосуды селезенки животного канюлируют и отмывают сосудистое русло селезенки. Затем селезенку перфузируют в замкнутом контуре изотонического буферного раствора и при оксигенации.Полученный перфузат стандартизируют по содержанию белка, Для лечения парентерально вводят раствор, полученный путем перфузии изолированной свиной селезенки в объеме 10% от объема циркулирующей крови. Способ позволяет воздействовать на развившийся аутоиммунный процесс и даже в конечных стадиях развития. с (С (/)