Способ выявления недоношенности новорожденных детей Советский патент 1989 года по МПК G01N33/558 

1

Изобретение относится к медицине,, а именно к перинатологии,и может быть использовано, в частности, для определения степени зрелости недоношенного ребенка, установления его гестационного возраста.

Цель изобретения - повьшгение точности способа.

При рождении ребенка берут кровь из пуповины после прекращения ее пульсации в центрифужную пробирку в количестве 5 мл, центрифугируют и. отделяют сыворотку. Определяют количество эмбрионального преальбумина-1 (ЭПА-1) в сыворотке пуповинной крови методом иммунодиффузии в геле со стандартной тест-системой в модифи- к.чции Н,И, Храмковой и Г.И. Абелева (1961). Для приготовления геля применяют 1,5%-ный агар на 0,5 М веронал- мединаловом буфере с рН 8,6, содержащем 2,5 г хлористого натрия, нагревают его на кипящей водяной бане до полного растворения. Иммунодиффузион- ный анализ проводят на предметных стеклах, размером 2,,5 см. Стекла помещают на горизонтальнз) поверхность. На камздое стекло заливают 4,0 мл расплавленного геля. Затем в застывшем геле пробивают стандартные лунки и заливают их: в центре - антисьгеоротку, в две противоположные лунки - антиген, в остальные - ис- следуемую сыворотку. Стекло оставляют в чашке Петри при комнатной температуре. Результат получают через 12-24 ч. В основе иммунодиффузионно- го метода лежит феномен встречной

иммунодиффузии антигена и антител, на месте которого образуется преципитат. Данный способ позволяет определить концентрацию исследуемого антигена в испытуемой сьгооротке путем титрова1 ия образца и умножения титра на чувствительность тест-системы. Чувствительность использованной тест- системы на ЭПА-1 составляет. мкг/мл. О степени недоношенности можно судить по содержанию ЭПА-1, который характеризует степень зрелости соединительной ткани И, в частности, фиб- робластов.

Пример. Ребенок, девочка, родился на 37-й неделе беременности (первые преждевременные роды), масса 2450,0, длина 47 см, окружность головы 33 см. Гестационный возраст высчитали в неделях начиная с 1-го дня последней меструации. Клинико-морфологическая зрелость, оцененная по критериям Дубовитца, соответствовала 36-37 неделям гестации. При исследовании пуповинной сьшоротки ребенка с гестационным возрастом 36- 37 недель содержание ЭПА-1 составило 4 мкг/мл. Это свидетельствовало о I степени недоношенности. У данного ребенка ранний адаптационный период протекал относительно гладко. Оценка по шкале Апгар при рождении 8 баллов Первоначальная убыль массы составила 200,0. Пуповина отпала на 5-е сутки. Выписан на 8-е сутки в удовлетворительном состоянии домой с массой 2400,0.

По содержанию ЭПА-1, равному 4 мкг/мл, можно прогнозировать относительно гладкое течение раннего периода адаптации.

П р и м е р 2. Ребенок, мальчик, родился от вторых преждевременных родов на 34-й неделе, масса 2150,0 длиной 46 см окружность головы 31 см. Гестационный возраст высчитали в неделях начиная с 1-го дня последней менструации. Клинико-мор- фологическая зрелость, оцененная по критериям Дубовитца, соответствовала 34 неделям гестации. При рождении взяли пуповинную кровь V центрифугировали и иммунодиффузионным методом определяли содержание ЭПА-1. В пуповиной сыворотке ребенка содержание ЭПА-1 составило 8 мкг/мл. Ребенок :родился без асфиксии., оценка по шкале Апгар после рождения составила

. . н58829

7-8 баллов. Состояние было неудовлетворительным. Течение периода адаптации осложнилось большой первоначальной убылью массы (до 1900,О), интенО

10

15

20

25

30

сивной физиологической желтухой, поздним отпаданием пуповины (на 6-е сутки). На 8-е сутки ребенок переведен на дальнейшее выхаживание с диагнозом: недоношенность I степени, конъюгационная желтуха. В данном случае уровень ЭПА-, равный 8 мкг/мл, сопровождался более затрудненной адаптацией ребенка с затянувшимися пограничными состояниями. Этот уровень ЭПА-1 также свидетельствовал о I степени недоношенности . П р и м е р 3. Ребенок, мальчик, родился от первых преждевременных родов, масса 1900,0, длина 44 см, окружность головы 32 см. Оценка по шкале Апгар при рождении 7-8 баллов. Состояние после рождения было среднетяжелым, выражены признаки . недоношенности, гипотрофия II степени. Первоначальная убьшь массы составила 8%, ; пуповина отпала на. 5-е ;сутки, к груди приложили на 6-е сут- ки, состояние вялое. На 8-е сут жизни переведен на II этап выхаживания. Клинико-морфологическая зрелость со ответствовала 33-34 неделям гестации. В пуповинной сыворотке содержание ЭПА-1 равно 10 мкг/мл. Эта концентрация соответствовала II степени недоношенности.

Приме р 4. Ребенок, девочка, родился от вторых преждевременных родов в. чисто ягодичном предлежании, масса 1500,0, длина 41 см., окружность головы 29 см. В родах асфиксия II степени. Оценка по шкале Апгар 4-5 баллов. Гестационный возраст по клинико-морфологическим признакам 45 и по анамнезу 30-31 неделю. Состояние ребенка после рождения очень тяжелое. Оценка по шкале Сильвермана 5 баллов. Развился синдром дыхательных расстройств на фоне диссеменированных ателектазов и гиалиновых мембран. Ребенок умер через 2 сут после рождения. Патологоанатомический диагноз: пневмопатия новорожденных, ателектазы легких, гиалиновые мембраны. Причиной смерти послужила глубокая незрелость органов и систем недоношенного ребенка. В сыворотке пуповинной крови содержание ЭПА-1 составило 24 мкг/мл. В данном случае при не35

40

50

514588296

доношенности III степени, сопроводив-Формула изобретения шейся глубокой незрелостью и смертью ребенка, этот уровень эмбриональ-Способ выявления недоношенности ного белка свидетельствовал о глубо- j.новорожденных детей, включающий кой незрелости продуцентов ЭПА-1, ввзятие из пуповины крови, выделение частности соединительной ткани, кото-сыворотки, определение концентрации рая несовместима с внеутробным суще-эмбриоспецифического белка методом ствованием,иммунодиффузии в геле, о т л и ч а га- Определение степени зрелости недо-ющ и и с я тем, что, с целью повьппе- ношенного ребенка предлагаемым спосо-ния точности способа, определяют эм- ,бом позволяет точно выявлять геста-бриональный преальбумин-1 и по его ционный возраст ребенка в.98,1% слу-наличию определяют недоношенность чаев,новорожденных.

Изобретение относится к медицине, точнее к перинатологии, предназначено для определения степени зрелости недоношенного ребенкй, установления еготестационного возраста. Цель изобретения - повышение точности способа. Для этого из пуповины младенца после прекращения ее пульсации берут кровь, выделяют сьгаоротку. Определяют количество змбрионального преальбумина-1 (ЭПА-1) методом имму- нодиффузии в геле (1,5%-ный агар на 0,5 М веронал-мединаловом буфере с рН 8,6, содержащем NaCl), в основе которого лежит феномен встречной им- мунодиффузии антигена и антител, в результате образуется преципитат. По наличию ЭПА-1 и определяют-недоношенность новорожденных.