Способ диагностики хронической почечной недостаточности Советский патент 1989 года по МПК G01N33/48 

1

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для лабораторной диагностики всех стадий хронической почечной недостаточности.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Поставленная цель достигается тем , что мочу концентрируют в 45-55 раз высаливанием сульфатом аммония с последующей очисткой диализирова- нием против 0,63 М раствора натрие- во-фосфатного буфера рН 7,4, из меря-ют конечный объем диализата, пробы диализата, каждая из которых соответствует 2,5 мл исходной неконцент- риро ванной мочи, наносят на прогретую и непрогретую стандартные фибриновые пластины, ин субируют при р течение 24 ч, затем по разнице площадей лизиса на этих пластинах определяют активность активаторов плазминогена в моче, при величине ее 771- 971 мм диагностируют патологию почек в стадии отсутствия хронической

isd

ср

3

почечной недостаточности, 151-210 мм стадии начальной хронической почечной недостаточности, 48-104 мм - вырантенной хронической ночечной нео

достаточности и менее 28 мм - тер- минальной хронической почечной недостаточности.

Способ осуществляют следующим образом,

К 100 мл утренней порции мочи до бавляют Ю мл 0,36 М раствора фосфатного буфера рН y-jO, вносят 68 мл 38%-ного раствора сульфата аммония, доведенного аммиаком до рН 7,0. Вы- павший осадок отделяют центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 мин, растворяют его в 2 мл дис- тютлированной воды и диализируют против 0,15 М раствора хлорида нат- рия до исчезновения иона сульфата (проба 10%-ным раствором хлорида бария) . Затем осадок диализируют против 0,63 М раствора натриево-фосфат- ного буфера рН 7,4 до создания уни- фищ1рованной реакции диализата и достижения конечного объема диализата 1,8-2,2 мл, что соответствует концентрированию мочи соответственно 55- 45 раз. Пробы диализата, каждая из которых соответствует 2,5 мл исходной неконцентрировантюй мочи (0, 045- 0,055 мл, Беличш-iy пробы определяют путем умножения конечного объема диализата в миллилитрах на 0,025), наносят на прогретую (при 90° С в тече ние 20 мин) и непрогретую стандартные фибриповые пластины, затем инкубируют их в термостате при 37 С в течение 24 ч, после чего измеряют площади зон лизиса фибриновых пластин, по разнице этих площадей на непрогретой и прогретой гшастинах определяют активность активаторов плазминогена в моче. При величине послед„ ., „ . 1

ней //1-У/1 мм диагностируют патологию почек в стадии отсутствия хронической почечной недостаточности, 151-210 мм - в стадии начальной

хронической поче чной недостаточное ти, 48-104 мм - вгзфалсенной хронической почечной недостаточности, менее 28 1-1М - терминальной хронической ночечпой недостаточности.

У здоровых лиц доверительный ин- тервал активности активаторов .плаз- миногена в моче составляет } 19J- 1509. мм . Точность способа; оцжбка

0

11

5 „

Ь

0

29

в двух параллельных определениях не

превышает ±4,2%.

Пример 1. Больной Р., 25 лет. Диагноз: Первично-хронический гло- мерулонефрит, нефротическая форма, активность III степени, стадия отсутствия хронической почечной недостаточности. Креатининемия 0,092 ммоль/л, скорость клубочковой фильтрации 96 мл/мин, СФАМ 176 мм . Активность активаторов плазминоге- на, определенная описанным выше способом (на прогретую и непрогретую стандартные фибриновые п.ластины на- по 0,05 мл диализата мочи исходя из расчета: моча концентрирована в 50 раз, следовательно, 2,0 мл конечного объема диализата X 0,025 0,05 Ntn) ,составила 928 мм (991-63 928 мм ), на основании чего диагностирована стадия отсутствия хронической почечной недостаточности.

В данном примере диагноз подтвержден совокупностью клинических и лабораторных данных. СФАМ понижена, тогда как активность активаторов нлазминогена нормальна. Это подтверждает большую точность предлагаемого метода по сравнению с известным (парадоксальное сьгижение СФАМ у данного больного обусловлено высокой концентрацией ингибиторов активации плазминогена).

П р и М е р 2. Больной С., 17 лет. Диагноз: Системная красная волчанка,, острое течение, активность III степени: полиартрит, кардит, нормохром- ная анемия, гломерулонефрит с нефро- тическим синдромом, стадия начальной хронической почечной недостаточности. Креатининемия 0,25 ммоль/л, скорость клубочковой фильтрации 38 мл/мин, СФАМ 220 мм . Активность активаторов плазминогена, определенная описанным . способом (на прогретую и непрогретую стандартные фибриновые пластины нанесено по 0,0525 мл диализата мочи,исходя из.расчета: моча концентрирована в 47,6 раза, следовательно, 2,1 мл конечного объема диализата мочи X 0,,0525 мл), составила 204 мм .(381-177 204 мм) , на основании чего диагност 1рована стадия начальной хронической почечной недостаточности. Диагноз подтвержден всей совокупностью клинических и параклинических данных, В данном при мере показано совпадение степени

жения активности активаторов плазминогена в моче со снижением скорости клубочковой, фильтрации и повышением креатининемии, в то время как СФАМ оставалась в пределах характерных для стадии отсутствия хроничес сой почечной недостаточности. Это подтверждает большую точность диагностки стадии хронической почечной недо статочности с помощью предлагаемого способа по сравнению с известным.

П р им ер 3. Больной Т., 40 лет Диагноз: Ревматоидньн артрит, быст- ропрогрессирующее течение, серопози- тивный, активность III степени, с множественным поражением суставов конечностей, функциональной недостаточностью суставов II степени и ами- лоидозом почек в стадии выраженной хронической почечной недостаточности. Креатининемия 0,38 ммоль/л, скорость кпубочковой фильтрации 21,4 мл/мин, СФАМ 31,4 мм. Активность активаторов плазминогена-. в мо- че, определенная описанным выше способом (на прогретую и непрогретую стандартные фибриновые пластины нанесено по 0,0475 мл диализата исходя из расчета: моча концентрирована в 52,6 раза, следовательно, 1,9 мл диализата мочи X 0,,0475 мл), составила 62,8 мм, на основании чег диагностирована стадия выраженной . хронической почечной недостаточное

ти.

в приводимом примере креатинине- мия повышена в 4,47 раза, клубочко- вая фильтрация снижена в 4,76 раза, СФАМ снижена в 7,1 раза, а актив-

кость активаторов плазминогена в концентрированной моче снижена в 21,5 раза, что свидетельствует о большей чувствительности предлагаемого способа в сравнении с изв.естным.

П р и м е р 4, Больной К., 46 лет Диагноз: Вторично-хронический гло- мерулонефрит, нефритическая форма, активность II степени, стадия терминальной хронической почечной недостаточности. Креатининемия 0,93 ммоль/л, скорость клубочковой фильтрации 7,2 мл/мин, СФАМ равна 0. Акт.ивность активаторов плазминогена , определенная описанным выше спосо- бом (на прогретую и непрогретую стандартные фибриновые пластины нанесено по 0,0475 мл диализата, расчет такой же,как в примере 3), равна 0.

1

296

В приводимом примере активность фибринолитических ферментов не выявляется не только в неконцентрированной моче, но и в моче концентрированой в 52,6 раза. Это свидетельствуе о терминальной стадии хронической почечной недостаточности.

Для проверки диагностической ценности предлагаемого способа проведены исследования у 20 здоровых лиц и у 92 больных с хроническими заболевниями почек в разных стадиях, Полученные результаты представлены, в талице. Использована известная классификация стадий хронической почечной недостаточности. M±tm - доверительные интервалы на уровне значимости ,001. Параметр t - коэф- фии,иент, указывающий на вероятность того, что полученная величина ошибки выборки будет не больше действительной ошибки, допущенной вследствие несплогаиого характера наблюдения, t,,, t , t и t - это критерии Стьюдента для сравнения средних величин. Различия достоверны при ,05 по таблицам Стьюдента.

Исходя из цели изобретения в формулу изобретения включены пограничные значения величин активности активаторов плазминогена в моче, входящие в доверительные интервалы, указанные в таблице для каждой ст.адии хронической почечной недостаточности Они не перекрываются ни в смежных стадиях при патологии почек, ни с нормой (1191-1509 мм), что подтверждает высокую диагностическую ценность предлагаемого способа (Р(, , Р, , Р, и Р, 40,001).

Как видно из таблицы, судя по величинам tg, диагностическая ценность предлагаемого способа превышает таковую прототипа в 2,81, аналога в 5,53 раза, соответственно по t - в 1,46 и 1,03 раза, по t - в 222,06 и 2,48 раза, по t - в 3,11 и 1,87 раза, это доказывает наличие положительного .эффекта от использования предлагаемого технического решения.

Предлагаемый способ диагностики атравматичный (в отличие от известного) , не обременительный и полностью безопасный для больного, так как базируется на исследовании свободно выделенной мочи.

Формула изобр.е тения

Способ диагностики хронической почечной недостаточности путем исследования снижения шстивности фиб- ринолитических ферментов мочи, определяемой по вел1таине площади лизиса стандартных фибриновых пластин после инкубирования их с пробой мочи, отличающийся тем, что, с целью повышения точности спо

соба, мочу концентрируют в 47,6-52,6 раз высаливанием сульфатом аммония с последующей очисткой диализирова- нием против- 0,63 М раствора.натрие- во-е юсфатного буфера рН 7,4, измеряют конечный объем диализата, затем пробы диализата, соответствующие

.

2,5 мл исходной некрнцентрированной , наносят на прогретую и непро- гретую стандартные фибриновые плас9 IA71I2910

тины, инкубируют в.течение 24 ч прихронической почечной.недостаточнос37 С, по разнице площадей зон лизи-ти, 151-210 мм - в стадии начальнор

са фибриновых пленок на этих пласти-хронической почечной недостаточноснах определяют активность активато-, ти, 48-104 мм - выраженной хрони-ров плазминогена и при величине ак-ческой почечной недостаточности и

тивности 771-971 мм диагностируютменее 28 мм - терминальной хронипатологию почек в стадии отсутствияческой почечной недостаточности.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лабораторной диагностики стадий хронической почечной недостаточности. Целью изобретения является повышение точности способа. Для этого мочу концентрируют в 47,6-52,6 раз высаливанием сульфатом аммония. Затем проводят очистку диализированием против 0,63 М раствора натриево-фосфатного буфера рН 7,4, измеряют конечный объем диализата и наносят пробы диализата на прогретую и непрогретую стандартные фибриновые пластины, затем инкубируют их в термостате при 37°С в течение 24 ч., после чего измеряют площади зон лизиса фибриновых пластин и по разнице этих площадей на непрогретой и прогретой пластинах определяют активность активаторов плазминогена в моче. При величине показателей 771-971 мм² диагностируют патологию почек в стадии отсутствия хронической почечной недостаточности, 151-210 мм² - в стадии начальной хронической недостаточности, 48-104 мм² - выраженной хронической недостаточности и менее 28 мм² - терминальной хронической почечной недостаточности. Способ позволяет повысить точность диагностики в 2,81 раза по сравнению с известным. Он атравматичен и не обременителен для больного. 1 табл.