Способ определения дискинезии желчного пузыря у детей Советский патент 1989 года по МПК G01N33/92 

1

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике дискинезии желчного пузыря у детей.

Наиболее близким к предлагаемому является способ диагностики дискинезии желчного пузыря путем биохимического исследования желчи с установлением в ней концентрации конъюги- рованных диенов. При наличии значений конъюгированных диенов, превышающих 7,23 D/мл, ставился диагноз дискинезии желчного пузыря 1 .

Однако у детей пузырную желчь не всегда можно получить, особенно в раннем возрасте и при нарушениях ритма сердца.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

0,2 мл отцентрифугированной сыворотки переносят в сухую пробирку, добавляют 0,8 мл бидистиллированной воды, перемешивают, затем приливают 4 мл изопропилового спирта, а сверху 4 мл гептана. Плотно закрывают пробирку притертой стеклянной пробкой и сильно встряхивают до полного перемешивания трех фаз (водной, спиртовой и гептановой). Затем ждут расслоения на две фазы: нижнюю - водно-спиртовую и верхнюю .- гептано- вую. Добавляют 1,0 г сухого NaCl. Центрифугируют при 1000 об/мин в течение 10 мин. Переносят верхний геп- тановый слой в сухую чистую пробирку, закрывают ее стеклянной пробкой. В пробирку с изопропиловым спиртом и- водной фазой вносят еще 1,0 г сухого NaCl. Покачивают 20 раз, переводя пробирку из вертикального положения в горизонтальное. Затем еще раз центS

(Л

с:

Јъ

4j

00 IsS

ел

рифугируют при тех же условиях. Прозрачную изопропиловую фазу переносят в чистую пробирку, закрывают пробкой. Измерения оптической плотности производят на спектрофотометре при длине световой волны 233 нм как в гептано- вой, так и в изопропиловой фазах. После этого производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки по формуле

V3

2-35/мл

V

5. гл

S, М

гдеД) - разница оптической плот- ности исследуемого образца и образца, содержащего вместо биологического материала бидистиллирован- ную воду;

V9 - объем экстрагированной

гептановой или изопропиловой фазы, мл} - исходный объем биологического материала (сыво- ротки).

Затем рассчитывают соотношение оптической плотности дисковых конъюга- тов в фазе изопропилового спирта к таковой в фазе гептана и при его значении 6,06 и более определяют дис- кинезию желчного пузыря.

В таблице представлены средние показатели соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови у детей с дискинезией желчного пузыря и нарушением ритма сердца, где X - среднее значение, m - ошибка, Р - достоверность, в скобках - заверительный интервал; I -1 изучаемая группа больных с дискинезией желчного пузыря и нарушением ритма сердцаj la - часть больных I группы, у которых гипомоторная дискинезия желчного пузыря определена только при установлении соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к тактовым в фазе гептана в сыворотке крови; II - больные со стойким нарушением ритма сердца при отсутствии дискинезии желчного пузыря; III - группа здоровых.

Из таблицы видно, что у 20 больных из 48 детей изучаемой группы

(с дискинезией желчного пузыря и с нарушением ритма сердца) с помощью известных способов диагностики (эхо- скопии желчного пузыря, пероральной

0

с 0

5

п

5 0

холецистод рафии и биохимического исследования порции желчи желчного пузыря с определением в ней диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта) не диагностирована дискине- зия желчного пузыря. У упомянутых 20 больных (42% из обследованных детей с дискинезией желчного пузыр.я и с нарушением ритма сердца) диагноз дискинезии желчного пузыря поставлен только с помощью предлагаемого способа.

Таким образом, с помощью прототипа представлена возможность ставить диагноз дискинезии желчного пузыря только у 58% детей с нарушением ритма сердца. Предлагаемый способ диагностики позволяет у всех детей с нарушением ритма сердца своевременно поставить диагноз дискинезии желчного пузыря с помощью определения в сыворотке крови соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана. Способ помогает вовремя поставить диагноз дискинезии желчного пузыря у детей с нарушением ритма сердца и в тех случаях, когда применяемое в прототипе дуоденальное зондирование (с целью получения порции желчи желчного пузыря для биохимического исследования) представляет опасность ухудшения аритмии сердца (спровоци- рование приступов пароксизмальной тахикардии). Кроме того, дуоденальное зондирование с целью получения порции желчи желчного пузыря и определения в ней диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта для постановки диагноза дискинезии желчного пузыря не представляется возможным у детей раннего возраста. I

Пример 1. Больной П., 9 лет с диагнозом стойкой суправент- рикулярной экстрасистолии. Ребенок был обследован по поводу дискинезии желчного пузыря. На пероральной хо- лецистограмме и при эхоскопическом исследовании не обнаружено изменений желчного пузыря, общепринятое исследование биохимических показателей в порции желчи желчного пузыря (включая установление диеновых конъюгатов) также было в пределах нормы.

Наряду с указанным биохимическим изучением порции желчи желчного пузыря (полученной с помощью дуоденального зондирования) устанавливают

5Н

в сыворотке крови концентрацию первичных продуктов перекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов следующим образом: 0,2 мл отцентрй- фугированной сыворотки переносят в сухую пробирку, добавляют 0,8 мл би- дистиллированной воды, перемешивают. Затем приливают 4 мл изопропилового спирта, а сверху также 4 мл гептана. Плотно закрывают пробирку притертой стеклянной пробкой и сильно встряхивают до полного перемешивания трех фаз (водной, спиртовой и гаптановой) Затем ждут расслоения на две фазы: нижнюю - водно-спиртовую и верхнюю - гептановую. Добавляют 1,0 г сухого NaCl. Центрифугируют при 1000 об/мин в течение 10 мин. Переносят .верхний гептановый слой в сухую чистую пробирку, закрывают стеклянной пробкой В пробирку с изопропиловым спиртом и водной фазой вносят еще 1,0 г сухого NaCl. Покачивают 20 раз, переводят пробирку из вертикального положения в горизонтальной. Затем еще раз центрифугируют при тех же условиях. Прозрачную изопропиловую фазу переносят в чистую пробирку, закрывают пробкой. Измерения оптической плотности производят на спектро- фотометре при длине световой волны 233 нм как в гептановой, так и в изопропиловой фазах. После этого производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки по формуле

ДРазз- УЭ V ..

разница оптической плот- 40 ности исследуемого образца и образца, содержащего вместо биологического материала бидистилли- рованную воду;. 45 объем экстрагированной

гептановой или изопропиловой фазы, мл

исходный объем биологической жидкости - сыво- 50 ротки.

ция первичных продуктов окисления липидов - диеатов в фазе изопропилосоставляет согласно фор- гс отке крови

0,266 .4,2 , , 2- , 5,6 D/мл 0,2

25

и в фазе гептана

4,2

0,2

1,75 D/мл,

показатель соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворот

ке

крови 7С- 3,20, что не отлича- 1, /э

ется от показателей группы здоровых детей (6,06).

Предлагаемым способом диагностики, как и общепринятым способом диагностики, исключена гипомоторная диски- незия желчного пузыря.

Пример 2. Больной Б., 12 лет. Поступил в клинику с диагнозом стойкой желудочковой экстрасис- толии и с подозреваемой дискинезией желчного пузыря. С помощью общепринятых способов диагностики (эхоско- пии желчного пузыря, пероральной холецистографии, биохимического исследования желчи) установлена гипомоторная дискинезия желчного пузыря. Определяют концентрацию первичных продуктов перекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов в фазах изопропилового спирта и гептана и производят расчет в единицах оптической плотности на. 1 мл сыворотки крови по формуле. Концентрацию диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта определяют согласно формуле в сыворотке крови

„.,..- ь™$±2-.

и в фазе гептана в сыворотке крови

D

23 VM

0,0666 4,2 , 4 0/млпоказатель соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к тактовым в фазе гептана в

12 4 сыворотке крови 8,85, что

превышает аналогичное соотношение у группы здоровых детей (6,06). На основании результатов эхоскопии желчного пузыря, пероральной холецистографии, биохимического исследования желчи и определения показателя соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови ставился сопутствующий нарушению ритма

сердца диагноз гипомоторнбй дискинезии желчного пузыря.

Пример 3. Больной С., 14 лет. Поступил в клинику с диагнозом стойкой суправентрикулярной экстрасистолии. С помощью общепринятых способов диагностики (эхоскопии желчного пузыря, пероральной холе- цистографии, общепринятого биохимического исследования желчи) исключена дискинезия желчного пузыря. Наряду с биохимическим изучением порции желчи желчного пузыря, полученной с помощью дуоденального зондирования, определяют в сыворотке крови концентрацию первичных продуктов пе- рекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта и в фазе гептана и производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки крови. Концентрация диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта в сыворотке крови составляла согласно формуле

0,6782 4,2 ., , ., D -......... 15,6 D/мл

1 }/мл U , Z

и в фазе гептана в сыворотке крови

,.//

0,809 3,2 . 7 . Г 0,2 D/Mn

показатель соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в

сыворотке крови - 9,17, что пре

вышает аналогичное соотношение у группы здоровых детей (6,06).

Спустя два месяца при наличии стойкой желудочковой экстрасистолии повторно определяют концентрацию диеновых конъюгатов в фазе изопропи лового спирта и в фазе гептана в сыворотке крови, которые составляли согласно формуле в сыворотке крови в фазе изопропилового спирта

I)

23Э/ллл

в фазе гептана

0,5565 х 4,2 .. п/ „ vt- 12,8 D/мл

D

- 0,0632 4,2

0,2

3/лЛЛ

показатель соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта

12,8 к таковым в фазе гептана ---

1,5

8,53,

0

5

0

5

0

что превышает аналогичные показатели группы здоровых детей (6,06).

На основании результатов определения показателя соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови (при повторном обследовании его) ставился сопутствующий нарушению ритма сердца диагноз гипо- моторной дискинезии желчного пузыря.

Точность предлагаемого способа составляет 100%.

Формула изобретения

Способ определения дискинезии желчного пузыря у детей путем определения диеновых конъюгатов в биологических жидкостях, отличающий с я тем, что, с целью повыше- ния точности способа, в сыворотке крови определяют количество диеновых конъюгатов, экстрагируемых изопропи- ловым спиртом и гептаном, рассчитывают соотношение диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана и при его значении 6,06 и более определяют дискине- зию желчного пузыря.

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике дискинезии желчного пузыря у детей. Цель изобретения - повышение точности. Сыворотку крови экстрагируют изопропиловым спиртом и гептаном, после чего спектрофотометрически ( при длине волны 233 нм) определяют количество диеновых коньюгатов в фазе изопропилового спирта и гептана, затем рассчитывают их соотношение и при его значении 6,06 и более определяют дискинезию желчного пузыря. Точность способа составляет 100%. Способ особенно полезен при наличии противоказаний к дуоденальному зондированию. 1 табл.