Способ получения биопрепаратов для коррекции кишечной микрофлоры Советский патент 1989 года по МПК A61K35/74 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности производству лечебно-профилактических биопрепаратов.

Цель изобретения - снижение антигенной нагрузки на единицу дозы препарата и предупреждение побочных эффектов при его использовании.

Пример 1. Получение монопрепарата. Для получения маточной культуры ампулу с лиофилизированнымпроизводственным

штаммом Escherichia coli ГИСК № 18 вскрывают стерильно и пипеткой вносят в нее 5-6 капель мясо-пептонного бульона. Полученную взвесь той же пипеткой переносят в пробирку с мясо-пептонным бульоном (рН 7,2- 7,4), которую выдерживают в термостате при 37.±1°С в течение 2-4 ч.

Бульонную культуру первой генерации пересевают на 3,5-4,0%-ный питательный агар в матрицах (четвертях), приготовленный на дрожжевом автолизате, мясном или казеиновом гидролизатах (рН агара 7,2 - 7,6) и инкубируют при 37±1СС в течение 12-18 ч. Затем культуру с поверхности агара в матрицах (четвертях) смывают 0,8%- ным раствором натрия хлорида или питательным бульоном. В реактор засевают 12- 18-часовую агаровую маточную культуру второй генерации или 6-8-часовую бульонную культуру пятой генерации. Плотность посева в реакторе - 400-600 млн микробных клеток на 1 мл среды.

Выращивание культуры Е. coli Л° 18 производят в реакторе на казеиновом бульоне, с содержанием 1.2-2%-ной желатозы при

Јь

& О J

05

37±1°С в течение б-9 ч при интенсивном перемешивании и беспрерывной подаче сжатого стерильного воздуха. В процессе культивирования в реактор добавляют 40%-ный раствор глюкозы, в зависимости от рН ере- ды, величину - которой поддерживают 7,4- 7,6 в начале выращивания, 7,8-8,0 в конце выращивания, не допуская резких колебаний

Выращенную культуру после соединения с компонентами среды суспендирования разливают в стерильные лотки-кассеты из нержавеющей стали, имеющие форму секторов или стеклянные емкости (ампулы, флаконы, матрицы), закрывая четырьмя слоями стерильной марли и подвергают лиофильной сушке.

Пример 2. Получение двухкомпонентного препарата с производственным штаммом би- фидобактерий.

Подготовленную маточную культуру штамма Е. Coli № 18 засевают в стеклянные или металлические емкости с питательной средой при одновременном засеве производственного штамма бифидобактерий согласно технологии получения биопрепарата «Бификол. Посевы инкубируют при 37°С в течение 10-11 ч, после чего разливают в стеклянные металлические емкости названных в примере 1 вариантов и подвергают лиофилизации.

Высушенную биомассу выпускают в на- тивном виде - в ампулах, флаконах или используют для таблетирования.

5

5

0

0

5

Таким образом, использование способа позволяет предупредить возникновение подобных эффектов, поскольку получаемые биопрепараты свободны от антигенов 02 и Н6, свойственных патогенным энтеробактериям, что повышает степень их переносимости и безвредности, в составе получаемых биопрепаратов содержание микробных клеток уменьшено более чем в 100 раз, что значительно уменьшает антигенную нагрузку на каждую дозу, а антагонистическая активность действующего начала биопрепаратов проявляется в более высокой степени, чем у существующих ныне при более выраженной адгезивной способности по сравнению со штаммом Е. coli M17.

Ранее штамм ГИСК № 18 Е. coli использовался для санации холерного носительства.

Формула изобретения

Способ получения биопрепаратов для коррекции кишечной микрофлоры на основе живой культуры Escherichia coli путем культивирования посевного материала в питательной среде в условиях аэрации, перемешивания и регулирования рН культуральной жидкости с последующим отделением полученной биомассы и высушиванием целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью снижения антигенной нагрузки на единицу дозы препарата и предупреждения побочных эффектов при его использовании, используют штамм бактерий Escherichia coli ГИСК№ 18.

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству лечебно-профилактических биопрепаратов. Цель изобретения - снижение антигенной нагрузки на единицу дозы препарата и предупреждение побочных эффектов при его использовании. Культуру штамма ESCHERICHIA COLI ГИСК N 18 выращивают в питательной среде (несколько пассажей), полученный посевной материал инокулируют в питательную среду, культивируют в аэробных условиях при постоянном перемешивании и регулировании PH в процессе культивирования. Полученную биомассу высушивают или смешивают с биомассой бифидобактерий.