Штамм бактерий LастовасILLUS асIDорнILUS, используемый для приготовления бакпрепарата для нормализации микрофлоры при нарушении микробиоценоза влагалища Советский патент 1989 года по МПК C12N1/20 A61K31/47 A61P15/02 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, н частности к производству лечебных: препаратов - зубиотиков.

Целью изобретения является повышение адгезивной способности бактерий, входящих в состав бакпрепарата,

Штамм бактерий Lactobacillus acidophilus получен из исходного штам- ма АЛ-28 путем селекции. Штамм депонирован в центральном Музее промьш - ленных микроорганизмов института ВНИИгенетика под номером ЦМПМ В-3325 и характеризуется следующими приз 1аками.

Культурально-морфологические признаки. Клетки палочковидной формы, и тонкие, неспорообразующие.

грамположительные, располагаются бес- порягючно. На плотной среде МРС образуют круглые колонии, профиль выпуклый, белые, гомогенные, легко снимаются петлей с поверхности агара, края ровные, непрозрачные, без блеска. Пигмента не образует. В жидкой среде МРС растет диффузно по всей пробирке (кроме зоны аэробиоза в верхних слоях питательной среды), на дне образуется осадок, легко разбиваюшийся при встряхивании .

Обезжиренное молоко - на вторые сутки после посева молоко свертывается с образованием плотного сгустка и отделением сыворотки. На жидкой синтетической среде H.Haenel в виде равномерного помутнения и небольшого

00 00

СП

осадка; количество жизнеспособных клеток при этом достигает 10 -10 кл./ /МП. Первые пассажи штамма дают обильный рост на жидкой среде Блаурокка для бифидобактерий; в последукидих пересевах рост штамма может истощаться. В полужидком (0,7%) агаре Блаурокка (при посеве в пробирки с 9 мп среды) образует слегка выпуклые дисковидныо колонии.

Физиолого-биохимические свойства. Анаэробны, на твердой среде растут после замены воздуха СО . Максимальный рост при 37,5°С. Оптимум рН 6,2- 6,4.

Сбраживает сахарозу, мальтозу, галактозу, фруктозу, лактозу, раффинозу; не сбраживает ликсозу, ксилозу.

маннит, рамнозу, дульцит, цитруллин, рибозу, сорбит.

Кислотообразование при выращивании в обезжиренном молоке 90 (по Тернеру).

Лабораторная проверка показала непатогенность L.acidophilus А-А для экспериментальных животных и людей.

Пример 1. Штамм лактобакте- рий вьфащивают на жидкой среде MFC (рН 6,2-6,4) в течение 36 ч в термо- .стате в бактериологических пробирках содержащих не менее среды. Оптимальная температура 37,5 С. Посевная дозы 1 мл 36-часовой культуры

Печеночным

отвар

Твин-80

100,0 мл 1,0 мл

Дистиллированная вода До 500,0 мл

Гидролизат

молока 500,0 мл

рИ6,2

Стерилизация 20 мин при 0,5 атм.

На основе лиофильно высушенного препарата могут быть приготовлены вагинальные свечи.

Биомассу бактерий, содержащую З-Ю клеток, смешивают с 30 г масла какао и 2,0 г ланолина. Полученную гомогенную массу раскатывают и выкладывают в специальный металлически дозатор, с помощью которого из исходного количества биомассы может быть получено 30 свечей. Свечи хранят в целлофановых обертках в холодильнике Кроме того, препарат можно применять per vaginum с помощью тампонов или инстиляцИй. ампулы при этом разводят 1-2 мл кипяченой или дистиллированной воды, а также физиологическим раствором.

Приме р2. Изучение влияния лактобактерий на нормализацию вагинальной микрофлоры у женщин.

Под наблюдением находилось женщин различного возраста с вагинальным дисбактериозом: уровень лактобакте

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к производству лечебных препаратов - зубиотиков. Для приготовления бакпрепарата используют штамм бактерий LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS ЦМПМ В-3325. Цель изобретения - повышение адгезивной способности бактерий. Повышенная адгезивная способность штамма способствует ускорению нормализации микрофлоры при нарушении микробиоценоза влагалища. 2 табл.

После этого взвесь микроорганизмов рнй составлял от 10 до менее 10 кл./ центрифугируют при 300 об/мин в тече- /г. В то же время количество стафилоние 15 мин. Осадок ресуспендируют в консерванте и полученную смесь разлвают по ампулам,а затем подвергают лиофильному высушиванию.

Консервант - СЖ, содержащий 10% сахарозы и 1% желатина, рН 6,0.

После лиофильного высушивания в одной ампуле, содержащей 1 дозу препарата, должно содержаться не менее 10 жизнеспособных .клеток.

Состав среды MFC для вырашлвания лактобактерий:

MgSO.iuu мг

Цис теин (НС1)

Цитрат аммония

Ацетат натрия

Глюкоза

MnSO

Пептон

Дрожжевой

автопизат

(Di fсо)

2 г

200 мг 200 мг 2 г 5 г 20 г 37,9 г 10,0 г

5,0

рнй составлял от 10 до менее 10 кл./ /г. В то же время количество стафило

кокков составляло 10-10 кл./г, дрожжей 1C -10 кл./г и энтеробактерий 10 кл./г, 8 женщин получали Местно ежедневно в течение 10 дней по 1 ги 10 кл./г L.acidophilus. Другие 8 женщин бактерийный препарат не получали. На 12-й день после начала лечения у женщин, получавших -L.acidophi- lus, количество лактобактерий повысилось до кл./г (т.е. в 10 раз и более) . Число стафилококков, дрожжей и энтеробактерий, наоборот, снизилось в 100, 10 и 10 раз соответственно. У женщин, не получавших местно в процессе лечения L.acidophilus, выраженность вагинального дисбактериоза в этот период наблюдения сохранялась на прежнем уровне.

Результаты приведены в табл.1 и 2. Формула изобретения

Штамм бактерий Lactobacillus acido- philus ЦМПМ В-3325 (Центральный Музей промьшшенных микроорганизмов институ5

та ВИИИг енетнкя) , используемый для приготовления бакпрепарата для норма1491885

лизации №1крофлоры при нарушении микробиоценоза влагалища.

Таблица 1

Таблица 2