Способ определения содержания тяжелых металлов в крови Советский патент 1989 года по МПК G01N33/483 

Изобретение относится к медицине, а именно к методам определения элементов в биологических пробах

Цель изобретения - расширение спектра определяемых металлов за счет дополнительного определения кобальта, никеля, меди, цинка, железа и свинца при одновременном повышении точности и чувствительности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Забирают из пальца 0,1-0,2 мл крови, 2-кратно замораживают при 14°С и оттаивают пробы Последовательно разводят образцы в 10-50 раз„ центрифугируют и отделяют образовавшийся осадок, обрабатывают его при нагревании 0,5 мл концентрированной

азоэтной кислоты, затем доводят раствор до 1 мл, раздельно методом атом- но-абсорбционного анализа определяют содержание элементов в супернатан- те и растворе с добавлением в них аскорбиновой кислоты до конечной концентрации 0,005-0,010, затем суммируют полученные показатели по каждому определяемому элементу.

Пример, Пробу крови в об-ьеме 0,1 мл вносят в центрифужную пробирку, закрьшают резиновой пробкой,помещают в замораживатель бытового холодильника (l4tO,5°C), после замора- .живания пробы извлекают, подверг т полному оттаиванию при комнатной температуре, вновь помещают в замораживатель для повторного замораживания,

Ф Ч

О1

О ;О

п|осле оттаивания проб их разводят Деонизированной водой в 50 раз, т,во Доводят объем до 5 мл Центрифугиро- анием отделяют раствор от осадка, переносят.его в другую пробирку,добавляют 0,25 мл 0,1%-ной аскорбиновой кислоты, вновь доводят объем до 3 мл (в случае отсутствия осадка 1| сследуют только супернатант - раст- ор 1), К осадку приливают 0,5 мл юнцентрированной HNO и помещают на Iодяную баню до полного его разложения (примерно в, течение 1 ч) Охлажд:;ают раствор, добавляют 0, мл (1,1%-ной аскорбиновой кислоты, доводят объем до 1 мл, получают раст- liop 2 о

I Проводят раздельную элементомет- яю растворов, результаты сую4Ируют находят концентрацию каждого метал jia в крови (с) по формуле:

мкг/мл.

Q - суммарное содержание металла, мкг; V - объем пробы крови, мл,

Аналитические характеристики опре деляемых.элементов и температурно- 1 ременные режимы определения привег Йены в табЛо 1 и 2.

В табЛо 3 приведены результаты Определения элементов в пробе и дан фые об увеличении открытия элементов счет дополнительного исследова- |шя осадка о Дополнительное открытие Доставляет от 4,8 до 1 V, 1%о

Двукратное замораживание позволя- фт дополнительно увеличить открытие : лемента в 1,13-3,5 раза по сравне- Йию с однократным,

Дальнейшее увеличение стадий за- гЦораяшвания до 3 не приводит к поло- итеп ьнЬму эффекту.

Добавки 1%-ной аскорбиновой кисло Ш не приводят к увеличению чувствительности при определении никеля

и дают лишь незначительное увеличение для кобальта, свинца и кадмия. Использование меньших концентраций, а именно 0,005-0,01% позволяет сить чувствительность определения

в 1,1-10,4 раза и, кроме того,способствует снижению мешающего влияния,, связанного с введением аскорбиновой 0 кислоты, меньше 0,005% не позволяют достичь увеличения чувствительности определения (табло4)„

Чувствительность анали.за по пред- 5 ложенному choco6y в 1,1-1,7 раза выше, чем по известному, точность вьшхе на 16-24% (табл.5). Таким образом, наряду с повьппени-

ем точности и чувствительности спосо- 0 ба изобретение позволяет расширить спектр определяемых металлов за счет дополнительного определения 6 элементов

5 Фор мула изобретений

Способ определения содержания тяжелых металлов в крови путем забора крови, ее замораживания и оттаивания с последующим разведением образца и определением методом а томно-абсорб- ционного анализа, отлич аю- щ и и с я тем, что, с, целью расширения спектра определяемых металлов за счет дополнительного определения кобальта, никеля, меди, цинка, железа, свинца, при одновременном повьш1ении точности и чувствительности способа, замораживание и оттаивание осущест0 вляют двукратно, затем центрифугируют, осадок дополнительно обрабатывают концентрированной азотной кислотой, в надосадочную жидкость и в растворенный осадок добавляют аскорбис новую кислоту до конечной концентрации 0,005-0,01%, раздельно проводят атомно-абсорбционный анализ в обеих пробах, а результат суммируют для каждого металла

5

Примечание Атомно-абсорбционный анализ образцов

проведен с использованием приборов С-115 и Parkin - Elmer-АОЗ с печью HGA-74.

Таблица2

Изобретение относится к области медицины, а именно к методам определения тяжелых металлов в биологическом материале. Способ позволяет с высокой точностью и чувствительностью определять в малом объеме крови, взятой при обычном клиническом обследовании из пальца, кобальт, никель, медь, цинк, железо, свинец и кадмий, т.е. биогенные элементы, играющие большую роль в микроэлементном статусе организма человека. Образцы крови массой 0,1-0,2 мл подвергают двухкратному замораживанию и оттаиванию, после пятидесятикратного разведения центрифугируют, в супернатате проводят элементометрию в присутствии 0,005-0,01% аскорбиновой кислоты. Дополнительно отделяют осадок, разлагают его в 0,5 мл концентрированной азотной кислоты, проводят элементометрию также в присутствии 0,1% аскорбиновой кислоты. Результаты суммируют. 5 табл.

(0,8±0,1) -10

-2 -4

(o,nto,oi)MO

0,0410,01J

(7,5iO,6)-lO

(2,2tO,l)-10- 0,5±0,03- (0,18tO,Ol) (0,02tO,OOl) -10

(l,8±0,0 l)- 10 (0,2tO,Ol)-10 - 7,6tl,70,84tO,12

I,0t0,20,08tO,01

Таблица 3

-2 -4

O

10

Данные о чувствительности определения микроэлементов в крови .в присутствии аскорбиновой кислоты

ТаблицаЗ

Результаты определения тяжелых металлов й образцах крови известным и предлагаемым . способами

Примечаниео В описании прототипа ПВИБОдится только определение кадмия о

Peдaктop ЛоПчолинская

Составитель Но Гуляева Техред Л.Олийнык

31аказ 4439/47

Тираж 789

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

П1роизводственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Т а б л и ц а 4

Корректор МоПожо

Подписное