Рекомбиноген для сельскохозяйственных растений Советский патент 1989 года по МПК A01H1/04 

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в селекции растений, в частности в применении химических веществ для увеличения рекомбинационной изменчивости при гибридизации.

Цель изобретения - увеличение выхода рекомбинантных растений, а также повьш1ение безопасности и удешевление обработки рекомбиногеном.

Способ состоит в том, что в качестве рекомбиногена для сельскохозяйственных растений вместо традиционных рекомбиногенов (в частности митомицина С) используется гиббереллин Aj.

Пример 1. Для испытания ре- комбиногенной активности гиббереллина используется чистолинейная раса Колумбия (Col) и многомаркерная линия растения семейства капустных - арабидопсиса. Частоту рекомбинации определяют на основе идентификации потомства F от скрещивания as hy X .X Col. Для установления наиболее бла- j гоприятной для обработки стадии про- водят цитологический анализ, после .чего микроспорorенные ткани растения (соцветия) погружают в раствор гиббереллина Aj. При этом концентра- ция рекомбиногена составляет 10 мг/л (в данной концентрации гиббереллин А 3 применяется как стимулятор роста). Оценка частоты рекомбинации (rfi) и ее ошибка (т) определяются для каждого стручка отдельно. Рассл

о о Ю

го

чет суммарных значений rf и т каждого варианта проводится с учетом

численности ni, rfi и .для потон- rti

ства отдельных стручков,

Примеры 2,3. Осуществляются аналогично, при этом соцветия об- рабатьюаются митомицином С и разбавленным фосфатным буфером с добавлением детергента Tween-20 (для сравне ния с гиббереллином А).

Для большей убедительности проводятся примеры 4, 5, 6, аналогично примерам 1,2,3.

Результаты сведены в табл. 1.

Примеры 7,8,9 проводятся для доказательства универсальности результатов , полученных на арабидопсисе (класс двудольных). При этом используется кукуруза (класс однодольных)

и испытываются различные концентраци .гиббереллина А. О частоте рекомбинации свидетельствует частота хиаэм на ядро. Результаты представлены в табл. 2.

Таким образом, установлено, что гиббераллин Aj обладает рекомбино- генным эффектом при обработке микро- спорогенньгх тканей растений на пред- мейотических стадиях, в концентрациях, соответствующих тем, в которых он ранее применялся как стимулятор роста растений.

Формула изобретения

Применение гиббер.еллина Aj в качестве рекомбиногена .для сельскохозяйственных растений.

Таблица 1

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в селекции растений , в частности, при применении химических веществ для увеличения рекомбинационной изменчивости при гибридизации. Цель изобретения - увеличение выхода рекомбинантных растений, а также повышение безопасности и удешевление обработки рекомбиногеном. Способ состоит в том, что в качестве рекомбиногена для сельскохозяйственных растений вместо традиционных рекомбиногенов используется гиббереллин А₃. Результаты проведенных экспериментов показали, что наибольший рекомбиногенный эффект наблюдается при обработке гиббереллином А₃ микроспорогенных тканей растений на предмейотических стадиях. При этом гиббереллины применяются в концентрациях, известных по их применению в качестве стимулятора роста растений. 2 табл.

Результаты воздействия различными рекомбиногенами на соцветия арабидопсиса, при этом микроспорогенные-ткани растений находятся Bi следующих стадиях: постмейотической (ПСМ), профазы мейоза (ПМ), предмейотической (ШМ).

I Таблица Влияние гиббереллина на частоту хиазм у кукурузы