Способ определения плазматических иммуноглобулинпродуцирующих клеток на гистологическом препарате Советский патент 1989 года по МПК G01N1/28 

Изобретение относится к медицине, в частности к иммуногистологическим методам диагностики, и может быть использовано в деятельности клинико- диагностических лабораторий.

Целью изобретения является повышение точности определения иммуноглобу- линпродуцирующих плазматических клеток в парафиновых срезах, предназначенных для гистохимического анализа.

Способ осуществляется следующим образом.

Парафиновые срезы после депарафи- нации промывают в фосфатном буфере, наносят на них люминесцирующие сыворотки против ИГА, ИГД, ИГМ, инкубируют в термостате при 37 С 30 мин, отмывают проточной водой и наносят на каждьш срез раствор гепарина рН 7,7-7,8, помещают срезы во влажной среде при 37 С на 20 ч, после чего промывают проточной водой, вают и микроскопируют,

П р и м е р. Больная Н,, 4 года, Диагноз - хронический цистит. Произведена диагностическая биопсия стенки мочевого пузьфя.

Материал залит в парафин по методу Сант-Мари. Срезы после депарафи- нации промывали в фосфатном буфере наносили на них люминесцирующие антисыворотки против ИГА, ИГМ, ИГ : ДЖИ,

инкубировали в термостате при 30 мин, отмьгоали проточной водой и наносили на каждый срез раствор гепарина рН 7,7-7,8, помещали срезы во влажной среде в термостат при на 19-21 ч, после чего промывали проточной водой, подсушивали, микроско- пировали. Выявляли плазматические клетки, синтезирующие иммуноглобу-

ЛИНЫ,

При нанесении антисывороток ИГА, ИГМ, через 15-16 ч отмечается неспецифическое свечение в клетках инфильтрата, отсутствует дифференци- ровка, через 19-21 час происходит четкая дифференциация плазматических клеток, ингибиция свечения в клетках, не относящихся к плазматическим, а через 22-24 ч происходит размывание контуров плазматических клеток со снижением интенсивности свечения.

Оптимальный временной режим инкубации срезов с гепарином 19-21 ч.

Использование предлагаемого способа обработки парафиновых срезоЬ обеспечивает по сравнению с существующими способами следующие Преимущества: дифференцирование иммуноглобулинсин тезирующих плазматических клеток в срезах, гашение клеток, не синтезирующих иммуноглобулины в срезах.

Форм у л а изобретения

Способ определения плазматических иммуноглобулиипродуцирующих клеток на гистологическом препарате путем обработки деперафинированных срезов биологически активными веществами и люминестирующими сыворотками, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, в качестве биологически активного вещества используют гепарин рН 7,7-7,8, при этом наносят его на срез после обработки люминестирукнцими сыворотками.

Изобретение относится к иммуногистологическим методам диагностики. Цель изобретения - повышение точности определения иммуноглобулинпродуцирующих клеток в парафиновых срезах, предназначенных для гистохимического анализа. Поставленная цель достигается тем, что дифференцировку иммуноглобулинпродуцирующих плазматических клеток проводят путем обработки срезов с нанесенными на них специфическими антителами против ИГА, ИГУ, ИГМ раствором гепарина с последующей промывкой, подсушиванием и микроскопированием. В результате происходит гашение клеток, не продуцирующих иммуноглобулины, и четкая дифференцировка плазматических иммуноглобулинпродуцирующих клеток, что повышает достоверность при интерпретации результатов иммунофлюоресценции и исключает ошибочную трактовку и диагностически ложные результаты.