Способ дифференциальной диагностики острого инфаркта миокарда и нестабильной стенокардии Советский патент 1989 года по МПК G01N33/49 

Од О

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в терапии, кардиологии. Цель изобретения - повышение точности и сокращение сроков установления диагностики за счет определения концентрации миоглобина, уровня антител к миоглобину и циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови больных хронической ишемической болезнью сердца. Способ включает измерение концентрации миоглобина в сыворотке крови. Острый инфаркт миокарда определяют при различных концентрациях миоглобина.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в терапии, кардиологии.

Цель изобретения - повьшение точности и сокращение сроков установления диагностики за счет определения концентрации миоглобина, уровня антител к миоглобину и циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови больных хронической ишемической болезнью сердца.

Способ осуществляется следующим образом.

На планшет сорбируют миоглобин в растворе 0,02 М HCl+NaCl рН 3,0, с . концентрацией миоглобина 5-10 мкг/мл. Иммобилизацию проводят в течение 16-1-8 ч при или 3 ч при +37°С во влажном термостате. Отмывка планшета - дистиллированной водой с 0,05%-ным раствором твина-20, 3-крат315П

ное заполнение и вытряхивание жидкости. .

Внесение стандартного образца и исследуемого материала.В качестве стандарта для построения калибровочной кривой использовали раствор аутоантител, афинно ленных с миоглобинового сорбента из пула 950 донорских CHBOIJOTOK крови. Стандарт титровали с 1500 нт а-АТ/мл и вносили во 2-й и 3-й ряды планшета. Во все остальные лунки планшета вносили исследуемьге сыворотки в дубле, разведенные 1/100 физиологичес- КИМ раствором рН 7,2-7,4 с 0,5%-ным раствором твина-20. Планшет инкубировали 1 ч при +37°С во влажной камере Отмывка планшета осуществлялась аналогично предыдущей,

Внесение коныогата антител к L цепям 1 g с пероксидазой () Коньюгат разводили физиологическим раствором рН 2,1-, с 0505%-ным раствором твина-20 в соотношении 1:250 и заполняли им все лз нки планшета. Планшет инкубировали 1 ч при С, Отмывка - более тщательная (3-кратная) ,

Внесение субстратной смеси 1 мг/мп орто-фенилендиамина к .-; в фосфатко-цитратном б уфере рН 5,0.

Остановка рер-:;дии 50 мкл 50% Н,0 Регистрацз-1Я -ьтатов на спектро- фотометре при71 4 . 2 им. Расчет количества антител к шоглобину производится графически по калибровочной кривой, результаты выражались в МКГ/1-Ш,

Метод определения цйркулирующик им1 унных комплексов основан на преципитации иммунных комплексов 355%-ным раствором полиэтиленгликоля (ПЗГ)-бООО с последующим измерением светорассеяния на спектрофотометре при T 450 нм„ Д/1Я построения стандартной кривой применяли агрегированную при в течение 40 мин фрак- дню П Кона, В опыте исследуемую сыво ротку разводили в 3 мл полимеризую- щего раствора и после инкубации в течение 1 ч при 20°С измеряли степень аггергации Количество комплексов вьфажапи в г/л, эквива- лентных концентрации аггрегированно- го J-глобулина.

П р и м в р , У больной Д., 56 лет, каждые 2 ч в течение 24 ч забирают кровь из вены в количестве 0,5-1,0 мл, определяют миоглобин, антитела к миоглобину, активность КФК, МВ-КФК, ACT, АЛГ, уровень циркулирующих иммунньЕХ комплексов, исследование состояния обмена липидов.

Результаты лабораторного исследования: мио глобин 822,1 нг/мл; антитела к миоглобину 1,0 мкг/мл; иммунные коьтлексь 359 г/л; активность КФК 18 ,5 мЕ/л-ч; 23,1 мЕ/л ч ACT 4,0 ммоль/л ч; АЛГ 0,91 ммоль/л xoxiecтepин общий 4,72 n юль/л; а-хо- лестерин 1,3 ммоль/л; триглидериды 1,4 ммоль/л.

Анализ изменений на ЭКГ не позволял точно установить диагноз острого инфаркта миокарда при поступлении больного в стационар. После проведения лабораторного обследования с определением уровня антител к миоглобину, циркулирующих имунных комплексов и концентрации миоглобину, несмотря на низкую активность креатин- фосфокиназы через 3 ч после поступления больного с уверенностью можно было поставить диагноз острого инфаркта миокарда, что в дальнейшем подтведилось увеличением активности КФК.

П р и м е р 2. Больной X., 39 лет

Результаты лабораторного обследования; мио глобин 865,.6 нг/мл; антитела к миоглобину 2,0 мкг/мл; иммунные комплексы 3,6 г/л; активность КФК 137,5 мЕ/л.ч; МВ-КФК 17 мЕ/л ч; ACT 2,6 ммоль/л 45 АЛГ 1,07 ммоль/л ч; холестерин общий 3,5 ммоль/л,.а-холе стерин 1,1 ммоль/л, триглицериды 0,9 ммоль/л.

По данным ЭКГ и активности ферментов сыворотки крови точно установить диагноз острого инфаркта миокарда было затруднительно, после анализа результатов комплексного исследовани миоглобина, антител к миоглобину и уровня кмг 1уннь1х комплексов диагноз острого инфаркта co ffleний не вызывал и был установлен через 2 ч после поступления больного в стационар.

Предложенный способ применен у 25 больных и обеспечил повыщение точности диагностики острого инфаркта миокарда до 92% в ранние сроки после поступления больного в стационар, в то время, как при применении известного способа-прототипа з этот же период точность диагноза не превышала 76,2%.

515

П р и м е р 3. Больной Ш., 46 лет

Результаты лабораторного обследования: общий холестерин 5,6 ммоль/л а-холестерин 1,5 ммоль/л; триглицё- риды 1,1 ммоль/л; активность КФК 112 мЕ/л ч; активность ACT 0,99 ммоль/л; АЛТ 1,36 ммоль/лт; уровень антител к миоглобину SjO мкг/ мл; миоглобин 98,8 нг/мл; 1даркулирукячие иммунные комплексы 1,6 г/л.

На основании указанных исследований диагноз: ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения и покоя с нестабильным характером тече- ния ФК III-IV, атеросклероз аорты И коронарных артерий, постинфарктньй кардиосклероз Н ст., гипертоническая болезнь Пд ст.

6

миокарда с пустя 6 дн. Больной выписан из стационара с диагнозом: мелкоочаговый инфаркт миокарда корона- рокардиосклероза Н.

П р и м е р 4. Больной А., 59 лет. Результаты лабораторного обследования: об1ций холестерин 6,8 ммоль/л а-холестерин 1,25 ммоль/л; триглицериды 0,6 ммоль/л; активность КФК 7 мЕ/л-г; Ш-КФК 5 мВ-л г; ACT 1,31 ммоль/лт; урювень антител к . миоглобину 6,8 мкг/мл; миоглобин 101 нт/мл; циркулирующие иммунные

комплексы 1,8 г/л.

. На основании указанных исследований диагноз:,ишемическая болезнь сердца, нестабильная стенокардия ФК-111, коронарокардиосклероз HK.

Предложенньй способ применен у 23 больных и обеспечил повышение в ранние сроки точности диагностики нестабильной стенокардии до 83%, в то время, как при применении известного способа-прототипа в этот же период точность диагностики не превысила 57%. При этом способ про.ст и в исполнении, и в интерпретации поученных резуль-татов.