Изобретение относится к биотехнологии и касается культивирования клеток животных, необходимых для производства вирусных вакцин, монокло- нальных антител, биологически активных веществ, проведения диагностических исследований.
Целью изобретения является повышение ростовых свойств питательной среды.
Пример 1. Для экспериментальной проверки готовят питательную среду с добавлением экстракта цветочной пыльцы. Экстракт готовят по следующей схеме. Пыльцу экстрагируют двумя способами: 70%-ньгм этанолом при 37 С в течение 24 ч (потом этанол удаляют), или деионизованной водой при 37 С в течении 12 ч при постоянном перемешивании. Экстракцию проводят в соотношении растворителя к ,равном 2:1. Осадок удаляют
центрифугированием (lOOOgxSO мин). Полученные экстракты смешивают и стерилизуют фильтрованием через 0,22 мкм фильтры. Готовый экстракт проверяют на стерильность и токсичность.
Проводят исследования разных сочетаний питательной среды с добавлением экстракта цветочной пыльцы и эмбриональной сыворотки в течение 6мес. на клетках животных. Полученные результаты приведены в таблице и показывают, что возможно уменьшение количества эмбриональной сыворотки в составе питательной среды- добавлением экстракта цветочной пыльцы от 1 до 15%. Добавление более высокого процента экстракта не дает существенного прироста клеток, а добавление экстракта меньше 1% не дает прироста клеток.
Питательная среда с добавлением 15% эмбриональной сыворотки тоже приводит к увеличению роста клеток (до 105%), но тогда значительно увеличивается расход дорогой эмбриональной сыворо . кн.
Влияние содержания эмбриональной -; сыворотки и экстракта цветочной пыльцы в питательной среде на рост клеток приведено в таблице.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ПЕРВИЧНЫХ И ПЕРЕВИВАЕМЫХ КЛЕТОК | 1991 |
|
RU2036233C1 |
| СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК ТЕСТИКУЛ (СЕМЕННИКОВ), МУЖСКИХ ПОЛОВЫХ ЗАРОДЫШЕВЫХ КЛЕТОК, СПЕРМАТОГОНИЙ, СПЕРМАТОЦИТОВ И СПЕРМАТОЗОИДОВ | 2000 |
|
RU2196820C2 |
| Штамм гибридных культивируемых клеток животных мUS мUSсULUS, используемый для получения моноклональных антител к гормону роста крупного рогатого скота | 1988 |
|
SU1564184A1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЖИВОЙ КЛЕТОЧНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ РАКА МОЛОЧНЫХ ЖЕЛЕЗ | 2008 |
|
RU2407789C2 |
| СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ПРОЛИФЕРАТИВНЫХ СВОЙСТВ ДИПЛОИДНЫХ КЛЕТОК ФИБРОБЛАСТОВ ЧЕЛОВЕКА | 2013 |
|
RU2536992C1 |
| Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L. - продуцент моноклональных антител к холерному энтеротоксину биотипа эльтор | 1990 |
|
SU1742325A1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАБИЛЬНЫХ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР | 2008 |
|
RU2392318C1 |
| Штамм культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS - продуцент ростстимулирующих факторов гибридом | 1987 |
|
SU1495374A1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА | 1993 |
|
RU2084523C1 |
| Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L. - продуцент моноклональных антител к дифференцировочному антигену @ -лимфоцитов человека | 1990 |
|
SU1705343A1 |
Изобретение относится к области биотехнологии и касается культивирования клеток животных, необходимых для производства вирусных вакцин, моноклональных антител, биологически активных веществ, проведения диагностических исследований. Целью изобретения является повышение ростовых свойств питательной среды. Указанная цель достигается добавлением в синтетическую питательную среду, содержащую эмбриональную сыворотку крупного рогатого скота, экстракта цветочной пыльцы в количестве 1-15 % от общего объема. При этом повышается эффективность культивирования, улучшается качество клеток и увеличивается их репродукция. 1 табл.
Пример 2. Используют питательную среду следующего состава, об,%: эмбриональная сыворотка крупного рогатого скота 5j экстракт цветочной пыльцы 10; основная среда ДМЕМ 85. Получают следующие результаты: прирост клеток 105%, а погибших клеток менее 5%.
Таким образом, при культивировании клеток мьшиной миеломы в питательной среде, которая содержит в основе среду ДНЁМ, практически достигается такая ее эффективность кул тивирования клеток и качество клето как при использовании питательной среды, которая в основе содержит среду RPM1-1640.
.Пример 3. По аналогичной примеру 1 методике на питательной среде, ко торая содержит следующие компоненты, %: эмбриональная сыворока крупного рогатого скота 1; экст
ракт цветочной пыльцы 10j основная среда RPM1-1640 89, культивируют клетки человеческой лимфобластомы. линии Raji в течение 4 мес. В этих условиях достигается прирост клеток до 101%, а погибших клеток менее 5%, что доказывает пригодность данной питательной среды для культивирования и других клеточных линий, а. не только миелом.
Пример 4. На питательной среде, приготовленной по примеру 1, которая содержит следующие компоненты, %: эмбриональная сыворотка крупного рогатого скота 1} экстракт цветочной пыльцы lOj основная среда ДМЕМ 89, культивируют клетки человеческой лимфобластомы линии Namalva в течение 6 мес, В этих условиях культивирования достигается прирост клеток 100-101%, а погибших клеток менее 5%,
Формула изобретения ракт цветочной пыльцы при следующем
соотношении компонентов, об.%: Питательная среда для культивирования клеток человека и животньк. Эмбриональная включающая синтетическую питатель- сыворотка крупного ную среду, стимулятор роста и эмбрио- рогатого скота 0,5-10 нальную сыворотку крупного .рогатого Экстракт цветочной скота, отличающаяся тем, пыльцы1-15
что, с келью повьппения ростовых « Синтетическая пита- свойств питательной среды, в качест- тельная,среда ве стимулятора роста используют экст- RPM1-1640Остальное
| Адаме Р.Н | |||
| Методы культуры клеток для биохимиков | |||
| - М.: Мир, 1983, с | |||
| Устройство для вытяжки и скручивания ровницы | 1923 |
|
SU214A1 |
