Способ выявления нейронов Советский патент 1989 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в экспериментальной неврологии.

Цель изобретения - улучшение и упрощение способа.

Способ осуществляется следуюпщм образом.

У наркотизированного животного выделяют нервный ствол, который погружают в хлорвиниловую капсулу, заполненную суспензией уранилацетата в дистиллированной воде (концентрация 30%). После соответствующей экспозиции, длительность которой определяется скоростью аксонального транспорта и расстоянием до исследуемой структуры, животное перфузируют холодным (4°С) раствором Рингера с добавлением сосудорасширяющих средств, а затем холодным (4°С) фиксатором (5%-ный параформальдегид, 5%-ная сахароза, растворенные в фосфатном буфере (рн 7,2). Изъятые кусочки мозга де- фиксируют в течение с 10-12 ч в 10-30%-ном растворе сахарозы, после чего на криостате изготавливают срез

СП

ю

о ее

сю сд

315

толпщной 15-30 мкм, который заключают в нелюминесцируюпц е среды - вазелиновое масло, эпом-812..

Пример. У наркотизированной кошки вьщеляют грудной отдел блуждающего нерва на уровне первого ребра, порожают и центральный конец погружают в хлорвиниловую капсулу, заполненную 30%-ной суспензией уранил ацетата. Капсулу фиксируют смесью воска с вазелиновым маслом. Через 48 ч животное перфузируют холодным раствором Рингера (4°С) с добавлением феноламина, а затем холодным (4°С) фиксирующим раствором. Изъятые кусочки продолговатого мозга дофиксируют в течение 10-12 ч. После этого в криостате изготовляют срезы,толпц ной 30 мкм, которые заключают в нелюминес

Г1ируюпо1е вазелиновое масло. Выявление меченных уранилацетатом - нейронов проводят на полилюминесцентном микроскопе ЛЮМАМ-3 в темном поле и свете люминесценции. Выявлены яркие желто- зеленые светящиеся гранулы в цитоплазме нейронов в области дорсального ядра блуждающего нерва.

Формула изобретения

Способ выявления нейронов, включающий введение флюохрома, инкубацию, фиксацию и приготовление гистологических препаратов, отличающийся тем, что, с Целью упрощения способа, S качестве флюохрома используют 30%-ную водную суспензию упанилацетата,

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления иннервации органов и тканей организма, что важно для топической диагностики заболеваний центральной нервной системы и физиологии центральной нервной системы. Способ заключается в том, что у наркотизированного животного выделяют нервные стволы, которые погружают в хлорвиниловые капсулы, заполненные суспензией уранилацетата в дистиллированной воде (концентрация выше 30%) или производят инъекции в исследуемый орган. После соответствующей экспозиции, длительность которой зависит от расстояния аксоеального транспорта, животное перфузируют холодным (4°С) раствором Рингера с добавлением сосудорасширяющих средств, а затем холодным (4°С) фиксирующим раствором (5%-ный параформальдегид на фосфатном буфере (0,1 М

рН-7,2) с 5%-ный сахарозой). Изъятые кусочки мозга дофиксируют в течение 10-12 ч в 10-30%-ном растворе сахарозы. После чего в криостате изготавливают срезы толщиной 15-30 мкм, которые заключают в нелюминесцирующие среды (вазелиновое масло, Эпон-812). Наблюдение меченных уранилацетатом нейронов производят на люминесцентном микроскопе ЛЮМАМ-3 в темном поле и свете люминесценции. Обнаруживают яркие желто-зеленые светящиеся гранулы в цитоплазме нейронов.

Редактор Н.Лазаренко

Составитель А.Чирков Техред Л.Сердюкова

Заказ 6748/43

Тираж 789

ВПИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Корректор Н.Король

Подписное