Способ количественного определения новокаина Советский патент 1989 года по МПК G01N21/78 

1

(21)4312829/31-04

(22)05.10.87

(46) 15.12.89. Бюл. 46 (71) Научно-исследовательский институт химии Саратовского государственного университета им. Н.Г.Чернышевского и Саратовский государственный медицинский институт

(72)Р.К.Чернова, К.Т.Бендер, НоН.Русакова, О.М.Харитонова, Г.М.Борисова и Т.Н Подзорова

(53)543.42.063(088.8)

(56)Лукьянчикова Г.И., Бернштейн В.И. Фотоколориметрическое определение шгьекционных растворов новокаина.

Сб. научных докладов, Изд-во Медицинского института. Всесоюзное химическое общество им. Д.ИоМенделеева. Ставропольское краевое отделение. 1960, В.1, с. 31-34.

Авторское свидетельство СССР 1415159, кло G 01 N 21/78, 1988.

(54)СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОВОКАИНА

(57)Изобретние относится к аналитической химии, в частности к способам

количественного фотометрического опре- деления новокаина - медицинского препарата , что может быть использовано в фармацевтической промышленности. Цель - повышение чувствительности н селективности способа Пробу обрабатывают органическим реагентом - п-диметиламииокорнчным альдегидом, растворенным в этиловом спирте, и присутствии додецилсульфата натрия при рН среды 3,0-4,0, Количество п- диметиламинокорнчного альдегида в этаноле 4,,510 М, количество додецилсульфата натрия - 4-10 М. Способ позволяет повысить чувствительиость определения новокаина в 5 раз и селективность за счет определения новокаина в присутствии большого числа лекарственных форм в определяемой пробе, а также за счет возможности определения новокаина в биологическом объекте - донорской крови. Нижний предел обнаружения 0,04 мкг/мл против 0,02 мкг/мп, так как окраска сигналов аналитической формы 5-8 ч против 5 ч. 8 табл«

§

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способам количественного фотометрического определения новокаина -медицинского препарата, что может быть использовано в фармацевтической промышленности. Цель - повышение чувствительности и селективности способа. Пробу обрабатывают органическим реагентом - п-диметиламинокоричным альдегидом, растворенным в этиловом спирте, в присутствии додецилсульфата натрия при PH среды 3,0-4,0. Количество п-диметиламинокоричного альдегида в этаноле 4,5^.10^-5-4,5^.10^-4М, количество додецилсульфата натрия 4^.10^-3-4^.10^-2М. Способ позволяет повысить чувствительность определения новокаина в 5 раз и селективность за счет определения новокаина в присутствии большого числа лекарственных форм в определяемой пробе, а также за счет возможности определения новокаина в биологическом объекте - донорской крови. Нижний предел обнаружения 0,04 мкг/мл против 0,02 мкг/мл, т.к. окраска сигналов аналитической формы 5-8 ч против 5 ч. 8 табл.

Изобретение относится к аналитической химину а именно к способам количественного определения новокаина.

Цель изобретения - повышение чувствительности и селективности способа определения новокаина.

П р н м е р 1. Построение градуи- ровочной характеристики для количественного фотометрического определення больших количеств новоканна. Точную

навеску субстанции сухого препарата новокаина 0,00250 г помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл н растворяют в дистиллированной воде прн нагревании на водяной баие. Стандартный раствор содержит 100 мкг/мл новокаина. Для построения градуировочной Характеристики в семь мерных колб емкостью 25 МП помещают 0,1 мл (10 мкг); 0,3 мл (30 мкг); 0,5 мл (50 мкг);

0,8 мл (80 мкг); 1,0 мл (100 мкг) ; 1,2 мл (120 мкг); 1,4 мл (140 мкг) стандартного раствора новокаина. Добавляют в каждую из колб по 0,1 мл 0,2%-ного раствора 1,14-10 М п- диметиламинокоричного альдегида в спирте (п-ДМАКА) по 1 мл I М раствора додецилсульфата натрия (ДСНа) и доводят объем колб до метки цитратным буферным раствором с рН 3,0. Оптические плотности полученных растворов измеряют на фото- электрокалориметре ФЭК-56М-У,4,1; с/ф № 6 а кюветах с толщиной погло- тающего слоя 1 1 см относительно раствора сравнения, содержащего О,1 мл 0,2%-ного раствора п-ДМАКА; 1 мл М раствора ДСЫа и цитратный буферный раствор с рН 3,0, Vog 25 МП. По полученным значениям оптической плотности строят зависимость А f (С), Закон Бугера-Ламбер- та-Бера выполняется при концентрации новокаина 10-140 мкг/25 мл или 0,4- 5,6 мкг/мл.

Пример 2, Построение градуи- ровочной характеристики для количественного фотометрического определения малых содержаний новокаина. Стан- дартный раствор новокаина 100 мкг/мл (раствор А) разбавляют дистиллированной водой в 10 раз и получают раствор новокаина с концентрацией 10 мкг/мп (раствор Б), В пять мерных колб емкостью 25 мл помещают 0,1 мл (1 мкг/мл); 0,3 МП (3 мкг); 0,5 мл (5 мкг); 0,7 мл (7 мкг); 1,0 мл (10 мкг) раствора Б, добавляют в каждую колбу по 0,1 мл 0,2%-ного раствора д-ДМАКА в этиловом спирте и по 1 мл М раствора ДСМа, После этого доводят объем в каждой колбе до 25 мл цитратным буферным раствором с рН 3,0. Оптические плотности полученных реакционных смесей измеряют на ФЭК-56М-У,4,1, с-ф № 6 в кюветах с толщиной поглощающего слоя см. Раствор сравнения готовят аналогично примеру 1, Градуировочная характеристика прямолинейная в интервале концентраций 1-10 мкг/25 мл или 0,04-0,4 мкг/мл новокаина. Предел обнаружения новокаина 0,04 мкг/мл,

Табл. 1 показывает, что в реакционную смесь необходимо вводить 0,1- 1,0 мл 0,2%-ного раствора п-ДМАКА в этиловом спирте. Данные, приведенные

в табл.1, показывают, что ошибки определения новокаина при концентрации п-ДМАКА 0,1-1,0 мл 0,2% (С 4,5-10 - 4,) не превьппают 4,5%.

Результаты определения содержания новокаина при различной концентрации реагента п-диметиламинокоричного альдегида (рН 3,0; 1 мл; Сд/лАк р,2%-ного р-ра; 1 1 см, Vog 25 мп) приведены в табл.1.

Табл. 2 показывает, что в реакционную смесь необходимо вводить также 1 мл 1-10 - 1,0 М раствора додецилсульфата натрия.

Результаты определения содержания новокаина при различной концентрации додецилсульфата натрия (рН 3,0, САМ;.Л 0,1 мл 0,2%; Vggi 25 мл; 1 1 см) приведены в табл.2.

Диапазон определяемых содержаний новокаина (СдмАм 0,1 мл 0,2%-ного р-ра; Сдсма 1 нп; , рН 3,0; ОБЦ - показан в табл,3,

Анализ экспериментальных данных, приведенных в табл.З, показывает, что при использовании кюветы с толщиной поглощающего слоя 1 1 см возможно определение новокаина в интервале концентраций 10,0-140,0 мкг/ /25 мл (0,4-5,6 мкг/мл) с погрешностью, не превьшающей ±6%. При концентрациях новокаина больше 140,0 мкг/ /25 мл и меныпе 10 мкг/25 мл ошибки определения новокаина возрастают до 16,0-18,0%.. Определяемые содержания новокаина можно понизить, если в эксперименте увеличить толщину поглощающего слоя, Тое. использовать кювету толщиной см. При этом условии становится возможным с ошибкой ± 8,0% определить 1,00-10,00 мкг/ /25 мл новокаина (0,04-0,4 мкг/мл).

Результаты определения новокаина в зависимости от рН среды (СДМАКА 0,1 МП 0,2%-ного р-ра; СдсМа 2 М, У(,Бц - 25 мл; 1 5 см) показаны в табл,4,

Дпя исследования селективности реакции выбран широкий круг лекарственных препаратов, которые используются совместно с новокаином,,Соотношение концентраций различных сопутствующих

компонентов (К) и новокаина (Н) сое- тавляет 1:1.

Результаты исследования влияния различных сопутствующих компонентов на результаты определения новокаина (рН СДЕЛКА 0,1 МП 0,2%-ного р-ра; CACNO I МП. М, - 1:1; 1 1 см} приведены в табл.5.

Анализ табл.5 показьшает, что совместно применяемые с новокаином лекарственные препараты не оказывают мешающего влияния на результаты его определения, ошибка определения новокаина не превьшает ,0%.

П р и м е р 3. Определение содержания новокаина в сложных лекарственных формах. Анализируемые порошки сложных лекарственш к форм, содержащих новокаин, тщательно растирают в фарфоровой ступке. Точные навески количественно переносят в мерные колбы соответствугацей емкости и растирают в дистиллированной воде. Далее проводят определение новокаина указанным способом аналогично примерам I и 2.

Результаты определения содержания новокаина в сложных-лекарственных смесях (рН 3,0; , СП-ДМАКА 0,1 мл 0,2%-ного р-ра; С I ш к

10 М; V табл.6.

оещ

25 мл) приведены в

Пример 4, Определение содержания новокаина в крови. При подготовке крови в анализу белки крови осаждают трихлоруксусной кислотой. К пробе донорской крови 2,0-3,0 14Л прибавляют иовокаии и сразу осаждают белок крюви 2 МП 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Смесь тщательно перемешивают стеклянной палочкой, центрифугируют 5 мин на центрифуге при скорости 3000 об/мин. Фипьтрат аккуратно переносят в мерную колбу на 25 мл. Осадок промывают 2 мл буферного раствора с

;

10

15

20

25

30

рН « 3,0 и еще раз центрифугируют Второй фильтрат сливают в ту же мерную колбу на 25 мл. К объединенным фильтратам добавляют 5-8 мл буферного раствора с рН - 3,0; 0,1 мл 0,2%-ного раствора п-ДМАКА; 1 мп 10 М раствора ДСНа и доводят до метки буфершлм раствором. Полученные смеси фотометриру- ют аналогично примеру 2. Содержание новокаина определяют по градуировоч- ной характеристике.

Результаты определения новокаина в донорской крови приведены в табл.7.

Результаты сравнения предлагаемого способа с нзвестгаш приведены в

табл.8.

Таким образом, предлагаемый стюсоб

более чувствителен при определении новокаина и селективеи при его определении в смесях с другими лекарствен- формами. Кроме того, показана возможность определения ультрамалых количеств новокаина в крови, что чрезвычайно важно для рационального применения указанного способа с лечебной целью.

Формула изобретения

Способ количественного определения новокаина путем обработки анализируемой пробы органическим реагентом в присутствии додецялсульфата натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повыпения

чувствительности и селективности способа, в качестве органического реагента используют раствор п-диметил- аминокричкого альдегида в этиловом спирте в количестве 4,5-10 -

А, М,додацилсульфат натрия используют в количестве 4,010 - A.O IO М и обработку ведут при рН 3,0 - 4,0.

15290868

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3

Таблица 4

Новокаин 0,2 Цинка сульфат 0,05 Борная кислота 0,4

25

Новокаин 0,2 Кофеин бензоат 0,8

200

Таблица 6

0,21 ,008

1,,026

м

Нижний предел обнаружеиия

Диапазон определяемых

содержаний

1529086

12 Продолжение табл.6

Таблица 8

0,2 мкг/мл

2-20 мкг/мп 1 - 1 см

Селективность

Среда

Устойчивость сигналов аналитической формы . Объекты анализа

Не оказывают мешающего влияния: эуфиллин, папаверина, гидрохлорид, атропина суль фат, димедрол, дибазол, дроперидол, натрия оксибу- тират, глюкоза, КС1, окси- торен, но-шпа, этионамнД, глютаминовая кислота, альбумин лиофизированный, борная кислота, NaBr, тальк, ZnSO

Не мешает глюкоза, кофеин, CyHfOH, аВ

10% НС1

Цитратный раствор буферный

3-4

Окраска устойчива в тече- Окраска устойчива ние 6-8 чв течение 5 ч

новокаин

Сложные лекарственные Сложные лекарственформы, содержащие новокаин ные формы, содержащие

Определение новокаина в

присутствии парсшлельно

применяемых сложных лекар- . ственных форм

Биологическая жидкость

крови

Органические реагенты п-диметиламинокоричный альдегид (п-ДМАКА) при концент- додецилсульфата натрия рации его в реакционной смеси 4,5-10- -4, присутствии 4 10 -4 10 М додецилсульфата натрия

Ванилин в присутствии

гПродолжение табл.8

Не мешает глюкоза, кофеин, CyHfOH, аВ

10% НС1

новокаин

додецилсульфата натрия

Ванилин в присутствии