Способ количественного определения сульфаниламидных препаратов Советский патент 1993 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного фотометрического определения сульфаниламидных препаратов (САП) - сульфацила натрия, стрептоцида, норсульфазола раств., сульфапиридазина, этазола, сульфадимизина, фталазола, уросульфана, сульфалена.

Цель изобретения - снижение предела обнаружения и повышение селективности определения.,

Поставленная цель достигается тем, что для определения сульфаниламидных препаратов в качестве органического реагента используют п-диметиламинокорич- ный альдегид в количестве 4,57-10 - 4, моль в присутствии додецилсульфата натрия (DCNaJc концентрацией в реакционной смеси 4,0 -103 - 4, моль в среде цитрзтного буферного раствора при рН 2,0-4,0.

При добавлении к анализируемым растворам, содержащим САП, органического реагента n-диметиламинокоричного альдегида (п - ДМАКА) в среде цитратных буферных растворов смесь окрашивается в ярко-желтый цвет, при введении в ту же смесь раствора DCNa - визуально наблюдается изменение окраски раствора от ярко- желтой до ярко-малиновой.

Установлены оптимальные условия определения сульфаниламидных препаратов с п- ДМАКА в присутствии DCNa.

VJ

О

о

00

Оптимальным количеством п - ДМАКА, необходимым для определения САП, является 0,1-1,0 мл 0,2%-ного раствора или в пересчете на Сраб составляет 4,57-10 5 -4,57-10 4 моль. Ошибки определения сульфаниламидных претратов в интервале указанных концентраций минимальны и возрастают при Сраб 4, и Сраб 4, моль (табл.1).

Установлено, что концентрация DCNa в реакционной смеси должна составлять - моль, что достигается при добавлении раствора ПАВ в количестве 1 мл 10 1 моль - 1 мл моль. При концентрации DCNa С моль и С моль ошибка определения САП увеличивается (табл.2)т

Все дальнейшие исследования проводили с растворами следующих концентраций п - ДМАКА - 1.14-10 2 моль (0,2 %-ный раствор) вводили 0,1 мл в реакционную смесь и 10 М раствора DCNa вводили 1 мл.

Регистрацию аналитических сигналов системы проводили на КФК-2 А 540 нм. Доказательство диапазона определяемых содержаний показано на примере двух сульфаниламидных препаратов: сульфапирида- зина и уросульфатэ в табл.З,

Таким образом, по заявляемому способу можно определять как большие(1-6мкг/мл), так и маленькие (0,05-2,0 мкг/мл) концентраций сульфаниламидных препаратов, используя при этом кюветы с различной т0я:щйной поглощающего слоя I 1 см и I 5 см. Ошибка определения не превышает 4-8%.

Нижняя граница диапазона определяемых содержаний уросульфана составляет

Стрептоцид белый (раств.)

Этазол

Сульфацил натрия

Сульфапиридазин

Норсульфазол

Фталазол

Сульфадемизин

Уросульфан

Сульфален

0,05 мкг/мл - следовательно, это и есть уверенно определяемый предел обнаружения.

Изучена зависимость предела обна- ружения САП (на примере фталазола) от значения рН, концентрации п -ДМАКА, крн- центрации DCNa (табл.4-6).

Анализ данных, представленных в табл.4-6 показал, что ошибки определения сульфаниламидных препаратов минимальны при концентрации п - ДМАКА 4,57-10 5 - 4,57-10 4 моль, концентрациях DCNa4-10 3- моль и рН среды 2,0-4,0.

Исследован широкий круг лекарственных препаратов, которые могут быть назначены больным совместно с САП (табл.7).

Соотношение сульфаниламидных препаратов к мешающему компоненту было выбрано 1:1, согласно приписываемой рецептуре с лечебной целью, причем концентрация мешающего компонента взята на порядок больше, чем используют

в медицине. Результаты, приведенные в табл.7, свидетельствуют о том, что совместно применяемые с лечебной целью лекарст- венные препараты совершенно не оказывают мешающего действия на результэты определения сульфаниламидных препаратов..

Подчинимость системы САП-ДМАКА- DCNa закону Бугера-Ламберта-Бера наблюдается в интервале концентраций САП

0,05-5,0 мкг/мл.

Установлено, что по заявляемому способу определения сульфаниламидных препаратов возможно нахождения как больших, так и малых концентраций препаратов:

1)0,1-2,0 мкг/мл,

2)0,05-1,0 мкг/мл,

1) 1,0-50 мкг/мл,

2) 0,05-5,0 мкг/мл,

1) 1,0-50 мкг/мл,

2) 0,05-5,0 мкг/мл,

1)0,1-6,0 мкг/мл,

2) 0,05-1,0 мкг/мл,

1) 0,05-5,0 мкг/мл,

2) 0,05-1,0 мкг/мл,

1)0,05-2,0 мкг/мл,

2) 0,05-1,0 мкг/мл,

1)0,1-4,0 мкг/мл,

2) 0,054,0 мкг/мл,

1)0,1-2,0 мкг/мл,

2) 0,05-1,0 мкг/мл,

1)0,1-5,0 мкг/мл,

2) 0,05-1,0 мкг/мл.

В табл,8 представлены данные, показывающие преимущества предложенного способа.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.5

Пример 1. Построение градуировоч- ной характеристики для количественного фотометрического, определения больших количеств САП.

Точную навеску субстанции сухого пре- ТО парата, например, этазола (0,025 г) помещают в мерную колбу емкостью 25 мл и растворяют в 10%-ной соляной кислоте. Стандартный раствор содержит 1 мг/мл этазола, Для построения градуировочной характеристики в 15 мерные колбы емкостью 25 мл отмеряют 0,25 мл (1 мкг/мл) рабочего раствора зта- зола с концентрацией 100 мкг/мл, 0,12 мл (5 мкг/мл), 0,25 мл (10 мкг/мл), 0,5 мл (20 мкг/мл), 0,75 мл (30 мк.г/мл), 1,0 мл 20 (40 мкг/мл), 1,25 мл (50 мкг/мл), 2,5 мл (100 мкг/мл) стандартного раствора этазола с концентрацией 1 мг/мл, добавляют в каждую колбу по 0,1 мл 0,2%-ного раствора о - ДМАКА, по 1 мл. М рас- - 25 твора DCNa и доводят объем до метки цитратным буферным раствором с рН 4,0. Оптические плотности полученных растворов измеряют на.КФК-2, в кюветах с толщиной поглощающего слоя I 1 см при 30 А 540 нм, относительно раствора ср&вне- ния, содержащего 0,1 мл 0,2%-го раствора .п - ДМАКА и 1 мл М раствора DCNa, буферный раствор с рН 4,0; подкисленный 10%-ой соляной кислотой. По полученным 35 данным оптической плотности строят зависимость А f(C). Закон Бугера-Лэмберта-. Вера выполняется при концентрации этазола 1-50 мкг/мл. Аналогичны методики определения сульфадимезина и фталазола. 40 Методики определения уросульфата и суль- фолена отличаются лишь тем, что среда создается цитратным буферным раствором с рН 3,0 и 3,4 соответственно.

Пример 2. Построение градуировоч- 45 ной характеристики для количественного фотометрического определения малых количеств сульфаниламидных препаратов, .

Для построения градумровочной характеристики используют раствор уросульфа- 50 на с концентрацией 10 мкг/мл. 8 мерные колбы емкостью 25 мл отмеряют 0,12 мл (0,05 мкг/мл), 0,25 мл (0,1 мкг/мл), 1,25 мл (0,5 мкг/мл), 2,5 мл (1,0 мкг/мл), 5 мл (2,5 мкг/мл) рабочего раствора уросуль- 55 фана с концентрацией 10 мкг/мл, добавля- ют в каждую колбу по 0,1 мл 0,2%-ного раствора п - ДМАКА и по 1 мл 10 М раствора DCNa, доводят до метки цитратным бу- ферным раствором с рН 3,0, Оптические

плотности полученных растворов измеряют на КФК-2 в кюветах с толщиной поглощающего слоя I 5 см приЯ 540 нм, относительно раствора сравнения, содержащего 0,1 мл 0,2%-ного раствора п - ДМАКА, 1 мл М раствора DCNa и буферный раствор с рН 3,0. По полученным значениям оптической плотности строят зависимость А f(C). Закон Бугера Ламберта Бера выполняется при концентрации уросульфана 0,05-2,0 мкг/мл. Аналогичны методики определения малых количеств сульфалена. Для определения этазола, сульфадимезина, норсульфазола и фталазола используют цитратный буферный раствор с рН 4,0. Для определения сульфацила натрия, стрептоцида бело го (раств.), норсульфазола (раств.), сульфапи- ридизина используют цитратный буферный растворе рН 2,0.

Пример 3. Определение сульфаниламидных препаратов в лекарственных формах.

Для определения белого стрептоцида и сульфадимезина в таблетках, точную навеску растворяют в 3%-ном растворе соляной кислоты в мерной колбе емкостью 100 мл, при этом применяемые порошки полностью растворялись. Затем разбавляют дистиллированной, водой приблизительно до концентрации 0,1%-ного растворз. Далее прибавляют все растворы, как указано в примере 1,

Для определения белого стрептоцида в мази около 1 г мази помещают в стакан емкостью 50 мл, приливают 3 мл хлороформа, 10 мл разведенной соляной кислоты, помешивают стеклянной палочкой в течение 5 минут. Полученную жидкость переносят количественно через бумажный фильтр в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят до метки дистиллированной водой. После этого отбирают аликвоту (7,5 и 12,5 мл раствора, разбавленного в 100 раз водой), добавляют 0,1 мл 0,2%-ного раствора п - ДМАКА и 1 мл 10 п М раствора DCNa, доводят до метки буферным раствором с рН 2,5 и измеряют оптическую плотность на КФК-2 в кюветах с толщиной поглощающего слоя I 1 см. Результаты представлены в табл.9.

(Ф о р м у л а изобретения Способ количественного определения сульфаниламидных препаратов путем обработки анализируемой пробы п-диметилами- нокоричным альдегидом в кислой среде с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью снижения предела обнаружения и повышения селективности вироделения, n-диметиламинокоричный альдегид используют в количестве 4,57 - 4,57 М. обработку ведут в присутствии додецилсульфата натрия, взятого в количестве 4. - 4, М, в среде цитратного буферного раствора при рН 2,0-4,0.

Таблица 1

Определение содержания этазола при различной концентрации реагента п-диметиламино- коричного альдегида (Сдсма 1,Q M, моль, КФК-2, I 1 см)

Таблица 2

Определение содержания этазола при различной концентрации реагента д одецилсульфата натрия (СдмдкА 1,0 мл 0,2%-ного раствора или 4,57-10 5 моль, КФК-2, I 1 см)

Та б л и ц а 3

Доказательство диапазона определяемых содержаний на примере сульфапиридазина (для больших количеств) и уросульфана (для малых количеств) (Сдмдкд 1,0 мл 0,2%-ного рас,-1

твора, Сдс№ 1 мл 10 моль, рН 3,0-4,0)

рж ол

,-1

. . Таблица4

Зависимость значения предела обнаружения от концентрации реагента п-диметиламиноко- ричного альдегида(рН 2,0, Сдс№ 1мл моль, КФК-2,1 1 см,А 540 нм)

Т а б л и ц а 5

Зависимость значения предела обнаружения норсульфазола от концентрации ДСМа (рН 2,0, СДМАКА 4,57 М, КФК-2,/1 54.0 нм, I 1 см)

Продолжение табл. 3

Зависимость значения предела обнаружения от рН среды (СДМАКА 0,1 мл 0,2%-ного раствора, Сдсма 1 мл М, КФК-2, А- 54

54

Т а б л и ц а 7

Исследование влияния мешающих компонентов на результаты определения сульфакила мидных препаратов (на примере стрептоцида) с п-ДМАКА и ДС№ (рН 2,0,

пгЗ

СдмдкА 4,57- М. Сдсыа 4 10 , Смеш ;Ссдп 1:1, КФК-2,А 540 нм)

Таблица 6

ы 54

540 нм, I 1 см)

Показатели

Заявляемый способ

ых

в час

ы

0,05 мкг/мл

1-50 мкг/мл, 1 1 см 0,05-2,0 мкг/.мл, I 5 см

см. табл. 7

Цитратный буфер рН 2,0-4,0

а) Лекарственные формы

б) Возможно определение САП в присутствии других лекарственных форм

0,2,%-ный раствор п-диметиламинокоричного альдегида (п-ДМАКА)

с концентрацией в реакционной

смеси 4,57 моль

Додецилсульфат натрия (ДСМа) в

количестве 4 М

Продолжение табл. 7

Таблица8

Прототип с ДМБА

0,1 мкг/мл 0,1-5,0 мкг/мл, I 1 см

Сведения не приведены 1,5-3,0

Лекарственные формы

0,2%-ный раствор п-диме- тиламинобензальдегида (п-ДМАБА)

Таблица 9