Способ подготовки костного мозга к трансплантации Советский патент 1990 года по МПК A01N1/02 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для низкотемпературного консервирования кроветворных клеток костного мозга с целью их последующей трансплантации.

Целью изобретения является повышение эффективности способа за счет повышения пролиферативной активности кроветворных клеток костного мозга.

Пример 1. Костный мозг замораживали с криолротектором 15%-ным ПЭО-400 по двухэтапной программе: от О до -20°С со скоростью 1°С/мин и от -20°С до -196°С со скоростью 300 С/мин. Затем ампулы с костным мозгом извлекали из жидкого азота и помещали в пары азота, где экспонировали в течение различного времени 5-40 мин. После этого ампулы опускали в водяную баню с температурой 30 С и отогревали в течение 50-60 с,

т.е. до полного оттаивания суспензии. Суспензию затем разводили до концентрации 1-10 кл./мл и культивировали. Учет формируемых структур (кластеров и колоний) в агаре определяли на седьмые и 14 сутки культивирования. Контролем служит иативкый костный мозг, культивируемый в дозе 1 -10 кл./мл.

Формирование максимального количества структур в агаре не на седьмые, а на 14 сут свидетельствует об ингибиции пролиферативной активности кроветворных клеток, максимальное количество структур в агаре формируется именно на 7-е сутки.

Пример 2. Костный мозг замораживали как в примере 1, экспонировали в парах азота 20 мин, а затем помещали в водяную баню с различной температурой и отогревали при посел

со со

О5

ю

со

тоянном перемешивании. Дальнейшие манипуляции проводили аналогично примеру 1. Контролем служит нативный . костный мозг.

Пролиферативная активность клеток повышалась при 20-25 мин выдерживания в парах азота и при размораживании в водяной бане при 28-32°С.

При подготовке костного мозга к трансплантации предлагаемым способом максимальное число структур в агаре формируется на седьмые сутки, а при известном способе - на 14 сут, при чтом сохранность клеток не падает.

Снижение (или полное отсутствие) ингибиции пролиферативной активности кроветворных клеток костного мозга обеспечивает возможность своевременного восстановления гемопоеза у реци

5

пиентов с криоконсервированным мие- лотрансплантатом.

Формула изобретения

Способ подготовки костного мозга к трансплантации путем поэтапного замораживания его с криопротектором полиэтиленоксидом-400 15%-ной концентрации вначале при температуре от 0 до -20°С со скоростью и затем от -20°С до -196°С со скоростью 300еС/мин с последующим размораживанием, отличающий- с я тем, что, с целью повышения эффективности способа за счет повышения пролиферативной активности кроветворных клеток, костный мозг перед размораживанием выдерживают в парах азота в течение 20-25 мин, а размораживание проводят при 28-32 С.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для низкотемпературного консервирования кроветворных клеток костного мозга с целью их последующей трансплантации. Целью изобретения является повышение эффективности способа за счет повышения пролиферативной активности кроветворных клеток костного мозга. Для этого костный мозг замораживают с криопротектором вначале от 0 до - 20°С, затем от - 20 до - 196°С, выдерживают в парах азота и размораживают в водяной бане при 28-32°С до полного оттаивания суспензии, которую разводят до концентрации 1^.10⁵ кл/мл и культивируют.