Способ определения токсичности водных сред Советский патент 1990 года по МПК G01N33/18 

Изобретение относится к охране окружаклчей , а именно к способам определения токсичности водных сред, и может быть использовано при определении токсичности исходных, очирденных сточных вод, мутных (не- , прозрачных), окрашенных, содержагщх загрязняюпще вещества в раствореннсГм, коллоидном, взвешенном состоянии, отдельных компонентов сточных вод, а также при контроле работы очистных сооружений по токсикологическому показателю.

Цель изобретения - повьшение точности, сократцение времени и снижение трудоемкости определения .Способ определения токсичности водных сред проводят путем предварительного культивирования тест-объекта инфузории Tetrahymena pyfi formis - в термостате при 25 С, с частотой пе ресева один раз в 10 дней, в стерильных условиях, на среде следукхцего состава (на 100 мл дистиллированной воды), г: петон 2-глюкоза 0,5; дрожжевой экстракт Ojlj морская соль 0,1;. рН среды 7-7,5.

В опыте используют культуру Tetra- hyraena pj riforpiis на третьи сутки после пересева на свежую питательную .среду. Культуру Tetrahymena pyri- formis смегаивают в микробиологических пробирках с исследуемой средой (опыт) и пептонной средой (контроль) и экспонируют инфузорий при 25°С в термостате в течение 60 мин. После этого часть содержи:мого пробирок в опыте и контроле при помощи вакуум- | ного отсоса поочередно, начиная с контроля, перекашивают в проточную стеклянную электрол -гтическую ячейку длиной 100 мм, внутренним диаметром

О

:О

Ч

1чЭ Ю

2 мм,солержа1 ую на концах члектролмт- ные камерм с элект Л-тмл, на которые от Йгтс1411лг а постоянного тока напряжение 7П-100 В, при этом создается напряженность постоянного электрического поля 7-1П В/см, и проводят визуальное (под стерео- скопи еским микроскопом) определение скоростей движения каждой из десяти произвольно выбранных клеток, вручную включая секундомер, как только выбранная для наблюдения клетка достигает стартовой линии, нанесенной на измерительную шкалу окуляра микроскопа,и выключая секундомер по достиже- клеткой фини1иной линии (конца шкалы).

Строго прямолинейное движение инфузорий Tetrahymena pyriformis обеспечивается в интервале напряженности постоянного электрического поля 7-10 В/см, при этом не оказьгоается отрицательное влияние на жизнедеятельность тест-объектов в течение . 10-минутного непрерьюного воздействи электрического поля. При значении напряженности ниже указанного интервала движения инфузорий непрямолинейно, при превьпчении напряженности Ю В/см скорость прямолинейного движения резко возрастает, затем падает до нуля, погибгаие клетки Т. pyri-- formis электронетттральны.

Критерием токсического действия исследуемой среды является достоверное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий в опыте.

Пример 1. Определяют токсичность исходной UlPOba 1 } и 04Iiщенной (гфоба 2) сточной воды маипшо строительного завода.Пробы характеризуются следую р ми основными показателями: I

проба 1: РН - 9,8, прозрачность 4,0 248 мг/л , БПК 111 мг/л, фосфаты 5,4 мг/л, фенолы 0,02 мг/л, нефтепродукты 0,035 мг/л, взвешенные вег ества 200 мг/л, СПАВ анионо- активные 1,67 мг/л, никель 0,06 мг/л jxpoM 0,05 мг/л;

проба 2: рП 7,4, прозрачность 32 см. ХПК 31 мг/л, БПК-57 мг/л, фосфаты 5,2 мг/)1, (Ьенол1 1 0,003 мг/л, нефтепродукты 0,004 мг/л, взвешенные частицы 11,0 мг/л, СПАВ анионоактив- ные 0,41 мг/л, никель н/о, хром н/о

5

0

5

0

5

0

45

50

55

В NOiKpofinojioniuecKne гцюбирки емкс1СТ,ю 25 мп поме1цают 19 мл ис- следуемо среды (пробы 1 и 2) , в контрол1 ную пробирку - 19 мл пептон- ной среды. К 19 мл исследуемой среды в каждую пробирку добавляют 1 мл культуры Tetrahymena pyriformis с кон- центраш ей клеток 6000 кл/мл (цри большей исходной концентрации клеток культуру разбавляют пептонной средой) и перемеимвают содержимое пробирок вращательными движениями. После 60- минутной экспозиции тест-объектов в исследуемых средах и контроле проводят измерение скорости прямолинейного движения Tetrahymena pyriformis в постоянном электрическом поле с напряженностью 7 В/см,

Проба. 1 токсична, поскольку вызывает достоверное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий. Проба 2 нетоксична, поскольку не вызывает достоверного отклонения от контроля скорости прямолинейного движения ин фузорий (табл. 1) .

Пример 2. Способ осуществляют аналогично примеру 1, но измерение проводят при напряженности 8,5 В/см. Проба 1 токсична, поскольку вызывает достоверное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий. Проба 2 нетоксична, поскольку не вызьшает достоверного отклонения от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий.

Пример 3. Способ осуществляют аналогично примеру 1, но измерение прово/т т при напряженности 10 Б/см.

Проба 1 токсична, поскольку вызывает достоверное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий. Проба 2 нетоксична, поскольку не вызьгоает достоверного отклонения от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий.

Пример 4. Исследуют токсичность раствора двуххромовокислого калия в концентрации иона Сг 0,04 мг/л.

В микробиологической пробирке емкостью 15 мл готовят рабочую концентрацию двуххромовокислого калия,используя /цтя разбавления пептонную среду. В пробирку поме1иают 9 мл раствора двуххромовокислого калия с концентра р- ей иона Сг 0,045 мг/л, затем приливают 1 мл культуры инфузорий Tetrahymena pyriformis с концентрацией клеток 3000 кл/мл и перемеишвают вращательHMMif дв11жент ям1г. К о п 1тиги | ттроПирке сог дается коицеитрат;т1я поил Сг 0,04 мг/л. В контрольную пробирку помелчают 9 мл пептонной среды н 1 мл культуры иифузорн |. После бО-минутно экспозиции инфузории b исследуемой среде и контроле проводят измерение скорости движеш-1я Tetrahymena pyriformis в постоянном электрическом поле с напряженностью 10 В/см, Кон11;ентрация иона ,04 мг/л токсична, поскольку вызывает достовеное отклонение от контроля скорости прямолинейного движения инфузорий

В табл.1 приведены результаты определения токсичности для Tetrahymena pyrifornis сточных вод маил1ностро тельного завода по показателю скорости прямолинейного движения и клеток инфузорш в постоянном электрическом поле (t5{ 2,57).

Пример 5. Исследуют токсичность раствора двуххромовокислого калия с концентрацией иона Сг 0,001 мг/л. Способ осуществляют аналогично примеру 2. Концентрация иона Сг 0,001 мг/л нетоксична, поскольку не пызьшаеТ достоверного откло

инфузорий и, сле,довате.пьно, пс)ЯГ(ле- тт возможности непосррдстисниого и- мерений его скорости (в то )ремя, как в известном решении проводилась косвенная регистрлгц1я с :орости хаотичного движения nyTpNf определен1тя скорости осветления водной среды, что снижает точность определения), сокращает время и трудоемкость определения за счет осуР1ествления процесса в проточном режиме, обеспечивает возможность более Точной обработки результатов.

Кроме того, преимут1;еством является расширение области применения способа для о-пределения токсичности мутных (не прозрачных) окрашенных водных сред, содержапщх загрязнякхцие вещества в растворенном, коллоидном и взвешенном состоянии,в том числе сточ- ных вод любого состава.

изобретения 25Способ определения токсичности

родных сред, предусматривающий помещение тест-объекта - инфузории Tetrahymena pyriformis - в емкости с чистой - контроль и исследуемой

Изобретение относится к охране окружающей среды и водной токсикологии. Целью изобретения является повышение точности, сокращение времени и снижение трудоемкости определения. Инфузорий TETRAHYMENA PYRIFORMIS помещают в стеклянную электрооптическую ячейку с чистой (контрольной) и исследуемой (опытной) водой и подвергают воздействию постоянного электрического поля напряженностью 7-10 В/см. Регистрируют скорость прямолинейного движения инфузорий. В случае достоверного отклонения значения скорости движения инфузорий в опыте от контроля считают исследуемую воду токсичной. 2 табл.

нения от контроля скорости прямолиней- зо опыт средой, выдерживание в них, реного движения инфузорий.

В табл,2 приведены результаты определения токсичности для Tetrahymena pyriforrnis по показателю скорости прямолинейного движения клеток инфузорий н постог.тпюн улектрическом поле при напряженности 10 В/см (t 2,57).

При 60-минутной экcпoзиly и, одновременном исследовании 10 различных сред в 5 параллельных сериях и 10 измерениях в каждой серии экспресс- ность.способа 90 мин.

Предлагаемьпн: способ определения водных сред по сравнению с известным повышает точность за счет обеспечения прямолинейного характера движения

35

40

45

гистрацию параметра двигательной активности инфузории в опыте и контроле и отнесение -исследуемой среды к токсичной при достоверном отклонении данных в опыте от контрольных, о т- личаюр1Ийся тем, что, с целью повьшения точности, сокращения времени и снижения трудоемкости определения, тест-объект из обеих ёмкостей после его выдерживания помещают в стеклянную проточную электролитическую ячейку.и подвергают 15оздейст- вию постоянного электрического поля напряженностью 7-10 В/см, а в качестве параметра двигательной активности регистрируют скорость прямолинейного движения тест-объекта.

5

0

5

гистрацию параметра двигательной активности инфузории в опыте и контроле и отнесение -исследуемой среды к токсичной при достоверном отклонении данных в опыте от контрольных, о т- личаюр1Ийся тем, что, с целью повьшения точности, сокращения времени и снижения трудоемкости определения, тест-объект из обеих ёмкостей после его выдерживания помещают в стеклянную проточную электролитическую ячейку.и подвергают 15оздейст- вию постоянного электрического поля напряженностью 7-10 В/см, а в качестве параметра двигательной активности регистрируют скорость прямолинейного движения тест-объекта.

1597722

Таблица 1

Таблица 2