Способ определения токсичности водорастворимых веществ Советский патент 1991 года по МПК G01N33/48 

Описание патента на изобретение SU1656454A1

Изобретение относится к микробиологическим исследованиям и токсикологии и может быть использовано при сравнительной токсикологической характеристике водорастворимых веществ и препаратов, а также на промышленных предприятиях для биологического контроля за токсичными водорастворимыми веществами.

Цель изобретения - повышение чувствительности способа и сокращение времени определения

Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа определения токсичности водорастворимых веществ путем экспозиции исследуемого вещества с инфузориями Fetrahymena pyriformis подсчет количества погибших клеток осуществляют после воздействия на культуру сублетальной температуры

Способ осуществляют следующим образом

Суточную культуру инфузорий Tetrahymena pyriformis культивированную в глюкоэно-дрожжевой среде (рН 7,1) и содержащую определенное количество особей в 1 мл, разливаю в пробирки. В эти же пробирки добавляют исследуемое вещество в нескольких концентрациях (максимальная из концентраций, вносимых в культуру, допжна не вызывать гибели инфузорий после тридцатиминутного контакта с веществом при температуре культивирования, но вызывать их гибель, близкую к 100%, после пятиминутного воздействия при сублетальной температуре) Культуру с

О СП

о

-N СЛ i.

добавленным исследуемым веществом выдерживают 30 мин в термостате при температуре культивирования, после этого пробирки помещают на 5 мин в термостат с сублетальной температурой и проводят подсчет количества погибших клеток. Далее высчитывают процент погибших клеток от начальной плотности культуры. Исследовав таким образом ряд концентраций веществ, строят график зависимости процента погиб- ших клеток от концентрации на пробит-ло- гарифмической сетке и графически находят концентрацию вещества, вызывающую 50%-ную гибель инфузорий. Данные заносят в таблицу для сравнения степени токсич- ности различных веществ путем сравнения концентраций, вызывающих 50%-ную гибель клеток.

Пример 1. Суточную культуру инфузорий Tetrahymena pyriformis, культивиро- ванную в глюкозно-дрожжевой среде (0,1 г дрожжевого экстракта, 1,5 г глюкозы, 0,1 г NaCI, 100 мл дистиллированной воды, рН 7,1) при 27°С и содержащую 69 тыс. особей в 1 мл, в количестве 1 мл помещают в 5 пробирок и добавляют исследуемое вещество - 1,2-дихлорэтан в пяти концентрациях: 0,6 мг/мл, 0,65 мг/мл, 0,7 мг/мл, 0,91 мг/мл и 1,3 мг/мл (по предварительным опытам концентрация 1,2-дихлорэта- на 1,3 мг/мл не вызывает гибели инфузорий после 30-ти минутного контакта при 27°С, а при 38°С в течение 5 мин наблюдается почти 100%-ная гибель инфузорий). Пробирки помещают в термостат и инкубируют в течение 30 мин при 27°С. После этого пробирки помещают в термостат при 38°С на 5 мин. Затем проводят подсчет количества погибших клеток в камере Горя- ева и высчитывают процент погибших клеток от начальной плотности культуры. Так, после воздействия сублетальной температуры в пробирке с концентрацией 1,2-дихло- рэтанаО,60мг/мл погибло 15594 особей, что соответственно от первоначальной плотности составляет 22,6%. Аналогично определяют процент погибших инфузорий при других концентрациях.

Данные по проведенным экспериментам приведены в табл. 1.

Получают пять точек, по которым методом пробит-анализа графическим путем находят концентрацию 1,2-дихлорэтана, вызывающую 50%-ную гибель инфузорий - 0,62 мг/мл.

Пример 2. Постановку опыта и подсчеты проводят также, как в примере 1, но исследуют другие вещества - диметил- формамид и ацетонитрил.

Результаты проведенных экспериментов представлены в табл. 2.

Формула изобретения Способ определения токсичности водорастворимых веществ путем инкубации исследуемого вещества с инфузорией и подсчета количества погибших клеток, о т- личающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и сокращения времени определения, перед подсчетом на инфузорию воздействуютеублетальнойтемпературой.

Таблица 1

Похожие патенты SU1656454A1

название год авторы номер документа
Способ определения генотоксичности водорастворимых веществ 1990
  • Усенко Елена Владимировна
  • Божков Анатолий Иванович
  • Калиман Павел Авсентьевич
SU1755194A1
Способ определения токсичности водных сред 1988
  • Карасев Сергей Георгиевич
  • Новосадова Татьяна Григорьевна
  • Стручкова Нина Леонидовна
SU1597722A1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ ПОЧВЫ МЕТОДОМ БИОТЕСТИРОВАНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ РАВНОРЕСНИЧНЫХ ИНФУЗОРИЙ PARAMECIUM CAUDATUM EHRENBERG 2011
  • Сычев Виктор Гаврилович
  • Лунёв Михаил Иванович
  • Черемных Елена Григорьевна
  • Баранов Александр Павлович
  • Шафаревич Сергей Александрович
RU2482478C2
Способ определения токсичности водорастворимых веществ 1983
  • Этлин Семен Наумович
SU1257518A1
Способ определения токсического воздействия химических веществ, содержащихся в водной среде, на культуру планктонных гидробионтов 1987
  • Бегма Анатолий Андреевич
  • Власенко Виталий Валерьевич
  • Пеньков Федор Михайлович
  • Паничев Александр Георгиевич
  • Мацкивский Владимир Иванович
SU1688161A1
СПОСОБ ОЦЕНКИ ТОКСИЧНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ АНТИГЕНОВ 2004
  • Жукова Светлана Ивановна
  • Адельшин Фарид Касимович
  • Храпова Наталья Петровна
  • Пивень Николай Николаевич
  • Прошина Ольга Борисовна
  • Засядкина Анна Владимировна
  • Плеханова Наталья Геннадиевна
RU2281507C2
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ ПИЩЕВЫХ ИНГРЕДИЕНТОВ С ПОМОЩЬЮ КЛЕТОЧНЫХ ТЕСТ-СИСТЕМ 2015
  • Клабукова Дарья Леонидовна
  • Машенцева Наталья Геннадьевна
  • Никонов Илья Николаевич
  • Фисинин Владимир Иванович
  • Чеботарёва Светлана Егоровна
  • Чеботарёв Иван Изотович
RU2604802C1
Питательная среда для культивирования инфузорий ТетRанYмеNа рYRIFоRмIS 1990
  • Лахонина Галина Мороевна
  • Мадоян Анаит Гарниковна
SU1717035A1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ РАСТИТЕЛЬНЫХ МАСЕЛ 2009
  • Францева Татьяна Петровна
  • Прудникова Татьяна Николаевна
  • Широкорядова Ольга Владимировна
RU2415417C1
Среда для поддержания культурыиНфузОРий 1978
  • Корнеева Нина Андреевна
  • Игнатьев Александр Дмитриевич
SU810813A1

Реферат патента 1991 года Способ определения токсичности водорастворимых веществ

Изобретение относится к микробиологическим исследованиям и может быть использовано для экспрессной сравнительной токсикологической характеристики водорастворимых веществ и препаратов, а также на промышленных предприятиях для биологического контроля за токсичными водорастворимыми веществами Цель изобретения - повышение чувствительности способа и сокращение времени определения Для этого культуру инфузории Tetrahymena pynformis выдерживают с добавленным исследуемым веществом при температуре культивирования, воздействуют из нее сублетальной температурой и подсчитывают количестоо погибших клеток. Строят график зависимости процента погибших клеток от концентрации исследуемого вещества 2 табл. Ё

Формула изобретения SU 1 656 454 A1

Таблица 2

Определено графическим путем методом пробит-анализа.

Продолжение табл. 2

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 1991 года SU1656454A1

Способ определения токсичности водорастворимых веществ 1983
  • Этлин Семен Наумович
SU1257518A1
Печь для непрерывного получения сернистого натрия 1921
  • Настюков А.М.
  • Настюков К.И.
SU1A1
Игнатьева А.Д
Шаблий В.Я
Использование инфузорий тетрахимена пириформис как тест-обьекта при биологических исследованиях о с/х М., 1978, с
Устройство для усиления микрофонного тока с применением самоиндукции 1920
  • Шенфер К.И.
SU42A1

SU 1 656 454 A1

Авторы

Ирлина Инга Семеновна

Лахонина Галина Мороевна

Мадоян Анаит Гарниковна

Месропян Арина Юрьевна

Этлин Семен Наумович

Даты

1991-06-15Публикация

1989-03-23Подача