Способ определения индивидуальной чувствительности больных ревматоидным артритом к иммунодепрессивным препаратам Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, в частности к ревматологии, и может быть использовано для лечения ревматоидного артрита.

Цель изобретения - повышение точ- ности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Периферические лимфоциты больного выделяют на градиенте плотности фи- колл-верографин, ресуспендируют в 2,0 мл среды 199 с 10% сыворотки КРС, помеиают в центрифужные пробирки по 0,5 МП, затем в одну из пробирок добавляют 0,1 мл раствора Хенкса,

в другие по 0,1 мл исследуемых препаратов в разведении 0,005 мг/мл, инку- бируыт при в течение 1 ч, однократно промывают средой 199, к осадку добавляют 50 мкл моноклональных антител ИКО-1, инкубируют 30 мин При З7 с добавляют люминесцирующую сыворотку против мышиных глобулинов, инкубируют 30 мин при 4 С, клетки отьываюг 3 раза средой 199, помещают яа предметное стекло, отсасывают среду, консервируют ,50%-ным глицерином на физиологическом растворе, закрывают клетки покровным стеклом, учитывают процент светя1чихся клеток на

сл

со

о:

флюоресцентном микроскопе при увеличении объектива 90x100, окуляра 2,5-10. В лрепарате просматривают 200 клеток, Устанавливают индекс чувствитель- с ности для больного путем разделения ИКО-1 положительных клеток в опыте на количество ИКО-1 положительных клеток в контроле Выбирают для. лечения тот препарат, который определяет ю индекс чувствительности, равный 2 и более единицамо

Пример 1 о Больная Д, 43 года, Диагноз; ревматоидный артрит, серопо- зитивный, активность II-III степени, is стадия III, НФС II, При поступлении жалобы на -сильные боли в суставах, выр аженную скованность, непроходящую к вечеру, припухлость и ограничение в проксимальных межфапанговых, локте- 20 вых, плечевых, голеностопных суста- вахо Страдает ревматоидным артритом в течение 8 лет,лечилась нестероидны- .ми противоревматическими, средствами. В похшедний год принимала преднизолон 25 курсами, прекратила за 1,5 месяца до поступления в клинику При поступлении получает 3 капсулы остофена,,

У больной из периферической крови выделены лимфоциты на градиенте шют- зо Iности фиколл-верографин, ресуспен,ци- рованы в 2,0 мл среды 199,. перенесе- ны в центрифужные пробирки по О,5 мл затем в одну из пробирок добавлен

0,1 ьш раствора Хенкса, в 5 0,1 МЛ метотрексата, В третью - 0,1 мп проспидина, в червертую - 0,1 мл цик- лофосфана (в разведении 0,003 мг/мл)„ Пробирки инкубировали при 37°С в течение 1 ч, обработанные клетки отмывали дО однократно средой 199, к осадку добавляли 50 мкл монокланальных антител ИКО-1, инкубировали 30 мин при 27°С добавляли .люминесцируюп1ую сыворотку против мышиных глобулинов, отмывапи 45 3 раза средой 199, клетки помещали на предметное стекло (20 мин), отсасывали среду, консервировали 50%-ным глицерином на физиологическом растворе, учитывали процент светящихся кле- ел ток на флюоресцентном микроскопе при .увеличении объектива 490x100, окуля- ра 2,5-10. В препарате прост- атрива- 1И 200 клеток„ Установлено, что в контроле количество клеток, содержа- с -щих la-подобные моноформные антигены составило 32%, г, опыте с метотрек- сатом - 30%, в опыте с проспидином - 15%, в опыте с циклофосфаном - 27%,

Индекс чyвcтвитeль rocти к метотрекса ту, проспидину и циклофосфану соотвественно 1,1; 2,1; 1,2; Следовательно препаратом выбора у этой больной является проспидин,который и был назначен по 0,1 ежедневно, внутримыш.ечнОс Клиническую эффективность препарата оценивали по стандартным критериям оценки противоревматических препаратов

Чере.з 7 дней после начала лечения состояние больного стало существенно улучшаться, уменьшились боли в суставах и утренняя скованность, больная стала активнее Спустя 12 дней в связи с прогрессирующим улучшением инъекции стали делать через 3 дня. Всего на курс больная получила 1,8 г препарата При выписке состояние больной вполне удовлетворительное Параллельно происходило улучшение и лабораторных показателей Не отмечено угнетающего действия препарата на картину периферической крови. Расстройств со стороны желудочно-кишечного тракта, кожного покрова также не отмечалось

Результаты слепого испытания способа, который состоял в том, что у 9 больных ревматоидным артритом определяли индекс чувствительности лимфоцитов с 1а-подо.бными антигенами на иммунодепрессивпые препараты, заключались в следующем Иммунодепрессивны препараты назначали парентерально в определенном порядке (первому больному - метотрексат, второму - проспидин третьему - циклофосфан, четвертому - метотрексат и )о Через месяц сопоставляли результаты к препаратам Результаты лечения выражали в индексе эффективности препарата

Установлено, что из 9 больных эффект отмечен у 5 Лимфоциты этих больных были чувствительны именно к тому препарату, который был назначен В остальных 4 случаях эффект не выявлен У этих больных не отмечена чувствительность лимфоцитов с la-подобными моноформными антигенами к препарату, которую они- получали.

Таким образом, предложенный способ пригоден для индивидуального подбора и lмyнoдeпpeccивнoгo препарата в лечении ревматоидного артрита и позволяет снизить вероятность возникновения побочных действий препарата.

51559776:

Формула изобретения повьшения точьости способа, лимфоциты ку11ьтивируют в 11рисутствии иммуноСпособ определения иидивидуальной депрессантов и определяют количест- чувствительиости больных ревматоидным , во ИКО-1 положитапьных клеток и при артритом к иммуиодепрессивным препа- снижении их количества по сравнению ратам путем исследования лимфоци- с контролем без иммунодепрессантов тов периферической крови, о т л и - определяют чувствительность к препа- чающийся тем что, с целью рату.

Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии. Цель изобретения - повышение точности способа. Цель достигается тем, что перед назначением лечения исследуют в условиях культуры чувствительность лимфоцитов с Ла-подобными моноформными антигенами к исследуемому препарату и определяют чувствительность по степени наибольшего снижения уровня ИКО-1 положительных клеток. Способ существенно повышает эффективность лечения ревматоидного артрита и снижает число побочных осложнений.