Штамм гриба SтеRеUм нIRSUтUм-источник кормовой биомассы, обогащенной комплексом биологически активных веществ Советский патент 1990 года по МПК C12N1/14 C12N1/14 C12R1/66 

Изобретение относится к биотехнологии и касается нового щтамма гриба - источника кормовой биомассы, обогащенной комплексом биологически активных веществ, с использованием в качестве источника углерода уксуснокислого лигнина - побочного продукта органосальвентной варки древесины.

Цель изобретения - получение щтамма гриба Stereum hirsutum ВКПМ F-397 (БИМ Г-142л), обладающего повышенной способностью к синтезу лигнолитических ферментов, а следовательно и способностью к-.деструкции: субстрата - уксуснокислого лигнина, и накапливающего биомассу, обогащенную активными веществами.

Штамм гриба S.hirsututo ВКПМ F-397 получен методом секторального отбо- ра быстрорастущих и наиболее активньрс по синтезу белка вариантов. Исход - ной культурой служил щтамм гриба S.hirsutum Т-13 БИМ Г-104, хранящийся в музее Института микробиологии АН БССР о .Полученный штамм хранится на сусло-агаре при .

Штамм имеет следующую характеристику.

Культурально-морфологические при-. знаки.

На сусло-агаре колонии гриба быстрорастущие, пушистые, с возрастом войлочные, плотные. Обратная сторона колонии светло-оранжевая. Мицелий обладает грибным ароматом, септиро- ван, 2-4 мкм в диаметре. Мицелий гриба растет быстро, образуя колонию диаметром 8-9 см за 5-6 сут. Поверхность колонии вначале белоснежная, с возрастом светло-желтая. Мицелий вначале пушистый, затем становится войлочным, плотным. Вегетативные гифы двух типов: многочисленные скелетные гифы, ветвящиеся, без перегородок и пряжек диаметром 2,0-3,0 мкМ, генеративные гифы, часто ветвящиеся, с перегородками и пряжками диаметром 2,4-4,0 мкм;

На картофельно-глгокозном агаре характер роста;гриба такой, как и на сусло-агаре, однако :колония более плотная, диаметром 6-8 см. Вегетативные гифы двух типов: многочисленные скелетные гифы, ветвящиеся, без перегородок и пряжек и генеративные, часто ветвящиеся, с перегородками и пряжками.

На среде Чапека гриб растет значительно хуже. Воздушный мицелий практически отсутствует. Диаметр колонии 0,3 см на 5-е сутки роста,

Физиолого-биохимические признаки.

Отношение к источникам углерода: активно сбраживает арабинозу, ксилозу. Фруктозу, галактозу, рлюкозу, мальтозу, крахмал.

Отношение к источникам азота: активно усваивает азот органических соединений, хуже - нитритную и амин- ную формы азота.

Аэроб о Оптимальный рН 5,0-6,0, способен расти в интервале рН 4,07,0с

Растет в диапазоне температур 10- 32 Со Оптимальная температура роста 25-28 0.

Тесты на присутствие ферментов: штамм дает положительную реакцию на лакказу, тирозиназу и пероксидазу.

Использование нового метода получения целлюлозы водными растворами уксусной кислоты приводит к появлению в качестве отхода уксуснокислого лигнина

По химическому составу он резко отличается от аналогичных субстратов, в частности гидролизного лигнина, Укнина Класона. Легкогидролизуем полисахариды составляют всего 1,22%, В г идролизном же лигнин

с жание лигнина Класона составля 57,0-59,0%, целлюлозы 26,6-28, Биомасса гриба S.hirsutum В F-397, выращенного на среде с нокислым лигнином, характеризу

10 содержанием истинного белка до 23,0%, жира 4,7%, нуклеиновых лот 0,5%, линолевой кислоты в жира 38,1%, перевариваемостью 63,0%, перевариваемостью проду

15 57,5%, Содержанием флавоноидов препарате составляет 120-145 м

Отличительная особенность штамма - синтез на свету в сре уксуснокислым лигнином большог личества ( 5,9-7,0% в белке) ам лоты фенилаланин, кото рай явля предшественником синтеза грибо тероциклических пигментов - фл идов о

25 Аминокислотный состав белк ма гриба s,hirsutum ВКПМ F-397 веден в таблице.

30

20

35

40

45

50

Пример 1, Штамм S,hir ВКПМ F -397 культивируют в пита ной среде следующего состава, Уксуснокислый

20,0 4.0 2,0 0,5

м 0,06

лигнин

Ш4Шэ

KH,jP04

7HciO

Кукурузный

экстракт

55

Глюкоза

Вода водопроводная до

ного 2,0

1 л

рН среды 4,0-5,7; длительность тивирования 72 ч, аэрация 0,5

интенсивность перемешивания- суснокисльй лигнин содержит 92,4% лиг- 150 об/мин, температура .

нина Класона. Легкогидролизуемые полисахариды составляют всего лишь 1,22%, В г идролизном же лигнине содержание лигнина Класона составляет 57,0-59,0%, целлюлозы 26,6-28,0%. Биомасса гриба S.hirsutum ВКПМ F-397, выращенного на среде с уксуснокислым лигнином, характеризуется

содержанием истинного белка до .20,0- 23,0%, жира 4,7%, нуклеиновых кислот 0,5%, линолевой кислоты в составе жира 38,1%, перевариваемостью белка 63,0%, перевариваемостью продукта

57,5%, Содержанием флавоноидов в препарате составляет 120-145 мг%.

Отличительная особенность этого штамма - синтез на свету в среде с уксуснокислым лигнином большого количества ( 5,9-7,0% в белке) аминокислоты фенилаланин, кото рай является предшественником синтеза грибом 0-ге- тероциклических пигментов - флавоноидов о

Аминокислотный состав белка штамма гриба s,hirsutum ВКПМ F-397 приведен в таблице.

5

0

Пример 1, Штамм S,hirsutum ВКПМ F -397 культивируют в питательной среде следующего состава, г/л: Уксуснокислый

20,0 4.0 2,0 0,5

мл или 0,06 г аминлигнин

Ш4Шэ

KH,jP04

7HciO

Кукурузный

экстракт

Глюкоза

Вода водопроводная до

ного азота 2,0

1 л

рН среды 4,0-5,7; длительность культивирования 72 ч, аэрация 0,5 об/об.

5)6

После окончания процесса выращивания культуральную жидкость отделяют, а осадок высушивают.

Показатели полученного продукта и (биомасса гриба + остатки неутилизированного субстрата) процесса: выход продукта 17,0 г/л, протеин 30,0%; белок 23,0%; флавоноиды 120,0 мг%; лакказа 2,6 усл.ед., тйрозиназа 0,13 ед.; пероксидаза 0,04 ед,

Пример 2. Условия культивирования, как в примере 1, за исключением того, что в качестве дополнительного источника углерода в состав среды вводят вместо глюкозы

529

мелассу в количестве 1,2. г/л в расчете на редудирующие вещества.

Показатели полученного продукта (биомасса гриба + остатки неутилизог ванного субстрата) и процесса: выход продукта 19,2 г/л; сырой протеин в биомассе 28,5%{ истинный белок биомассы 20,0%; флавоноиды 145,0 мг%4 лакказа 3,4 усл.ед.; тйрозиназа 0,17 пероксидаза 0,05 ед.

Формула изобретения

,5 Штамм гриба Stereum hirsutum ВКПМ F-397 - источник кормовой биомассы, обогащенной комплексом биологически активных веществ .

10

Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма гриба - источника кормовой биомассы, обогащенной комплексом биологически активных веществ с использованием в качестве источника углерода уксуснокислого лигнина - побочного продукта органосальвентной варки древесины. Цель изобретения - получение штамма гриба STEREUM HIRSUTUM ВКПМ F-397 (БИМ Г-142Л), обладающего повышенной способностью к синтезу лигнолитических ферментов, а следовательно, и способностью к деструкции субстрата - уксуснокислого лигнина, и накапливающего биомассу, обогащенную биологически активными веществами. При выращивании на среде с 20 г/л уксуснокислого лигнина выход продукта (биомасса гриба + остатки неутилизированного субстрата) составляет 17,0-19,2 г/л, содержание истинного белка 20,0-23,0%. 1 табл.