Штамм микромицета МоRтIеRеLLа Sp. для получения кормовой добавки из люцерны Советский патент 1989 года по МПК C12N1/14 A23K1/00 C12N1/14 C12R1/645 

1

Изобретение относится к микробиологии, в частности к получению кор- мовых добавок для животных, и касается нового штамма микромицета для получения кормовой добав ки.

Целью изобретения является полу-: чение нового штамма микромицета,разлагающего лигниноцеллюяозный ком- lineKc люцерны.

.Штамм микромицета Mortierella sp. вьщелен из почвы, идентифицирован п& определителям: Т. Халабуда Грибы рода Mortierella Coemaus, 1973, А.Н. Милько Определитель мукораль- ных грибов, 1974 и Н.М. Пидопличко,. А.В. Милько Атлас мукоральных грибов, 1971. Штамм депонирован во .Всесоюзной коллекции промышпенных микроорганизмов под № Р-2922Д.

Культурально-морфологические приз ;наки.

Воздудный мицелий белый. Споран- гиеносцы цилиндрически шаровидные, 150-350 |U длины, диаметр у верхушки 2-3 |ц со слегка вьшуклой поперечной перегородкой, с мелким зубовидным выступом, диаметр у основания 6-16|Ц с 2-3 боковыми веточка№1 вверху. Веточки спорангиеносцев прямые, простые или с 1-3 короткими веточками, иногда стерильные и тогда часто . профилируют длинной гифой. Спорангии шаровидные, 20-35 (Ц в диаметре, много- ; споровые, Спорангиоспоры округло-угловатые, частично эллиптически-шаровидные, в диаметре 4-10 |и,хламидо- споры немногочисленные, различной формы, окопо 20 (Ц в диаметре цри культивировании штамма при 28 с в , течение 5-7 сут.

На сусло-агаре образует войлочную ;колонию без зон, местами с редкими

4; о

а

САЭ

опастями, расположенными непрерывой розеткой, воздушный мицелий беый .

На среде Чапека-Докса - воздушный ицелий обильный, белый, более редий и низкий, чем при росте на сусо-агаре, почти без лопастей. На 7-й день культивирования колонии окрывают поверхности чашки Петри. При росте на среде с кукурузным экстрактом - мицелий белый, более пушистьй, с паутинистым краем, в центре колонии отмечается сгущение мицелия.

При росте на голодном агаре образует паутинистый налет, отмечает- .ся интенсивное плодоношение. Мицелий белый, часто пронизывающи субстрат или стелящийся на поверхности.

При росте на среде из почвы с агаром образуется редкий белый ми- целий, рост менее интенсивный, чем на других агаризованных средах, от-, мечается интенсивное плодоношение. При посеве на дистиллированной воде образуются светлые редкие хпоп- кообразные комочки, на которых отмечается плодоношение гриба.

При вьфаш вании на обычных агаровых средах: сусло-агаре и в среде Чапека-Докса при 24-28° С в течение 7 сут культивирования мицелий чаше всего спорангиев не образует. В условиях голодания (на стерильной дис,- тиллированной воде или слабом физиологическом растворе 0,2-0,3% NaCl в дистиллированной воде) при тех же условиях культивирования плодоношение культуры проявляется незначительно. Более интенсивно спорообразование отмечается при выращивании мицелия на вытяжке из почвы с агаром и на голодном агаре.

Физиолого-биохимические признаки. Растет аэроб при 10-37 С, оптимальная 20-28 С.

: Отйошение к рН: оптимум роста при 4,6-5,0.

Отношение к источникам углерода; ассимилирует глюкозу, мальтозу, крах мал,. целлюлозу и лигнин.

Маркерных признаков штамм не

имеет.

Гриб способен расти на различных средах: сусло-агаре, среде Чапека- Докса, содержащей в качестве единственного источника углерода фильт

5

0

5

ровальную бумагу, на льняном полотне и голодной среде.

Штамм поддерживают на сусло-агаре и агаризованной среде Чапека-Докса. Пересевы проводят 2 раза в год. Штамм хранят на сусло-агаре при .

Получение кормовой добавки. ,

Пример 1.0,5г измельченных сухих стеблей люцерны изменчивой (Medicago varia Martyn) помещают в пробирки, стерилизуют 0,5 часа при 0,5 атм. В каждую пробирку вносят по 1 МП 7-дневного инокулята гриба Mortierella sp. ВКМ Р-2922Д, выращенного на пивном сусле при 25-26 С, пробирки помещают во влажную камеру и выдерживают при 28-30 С в течение 20-30 сут...

Полученную массу используют как добавку к грубым кормам.

В кормовой добавке исследуют содержание белка и потери лигнина и целлюлозы.

Данные изменения содержания белка, целлюлозы и лигнина в люцерне изменчивой приведены в таблице.

Содержание белков, лигнина и целлюлозы в стеблях нативной люцерны изменчивой: 13,68; 12,10} 33% сухого- вещества соответственно. После куль- дс тивирования штамма в течение 20 сут содержание указанных веществ изменилось: 14,287; 7,713; 26,63% соответственно. После культивирования штам-; ма 30 сут. наблюдалось дальнейшее изменение содержания указанных веществ: 14,345; 7,241; 24,585%.

Удаление четвертой части лигнина из растительных субстратов увеличивает их перевариваемость от 15 до

60%.

П р-и м е р 2. Стебли люцерны желтой (Medicago falsata L.), подготовленные аналогичным образом, как и в примере 1, засевают грибом Mottie50

55

rella sp. BKM Р-2922Д и культиви- руют, как описано в примере 1.

После 25-30 сут культивирования обнаруживаются 39,37% потери лигнина и 28,76% целлюлозы и увеличение содержания белка (6,73% по сравнению с контролем).

Нативная форма стеблей люцерны желтой содержала 10,92% белка, 13,6% лигнина и 29,6% целлюлозы.После 25-30 сут культивирования обнаруживается изменение содержания белков, лигнина и целлюлозы: 11,65; 8,246; 21,085% соответственно.

Примерз. Способ получения стандартного препарата. Количество используемой люцерны изменчивой (стебли) 5 кг, ее влажность 60-65%, культивировалось в ферментере емкостью 10 л. При равном распределении посевного материала полное по

4707636

крытие стерильного субстрата мицелием при 28 С достигается на 7- 10 сут. Это удалось достигнуть при помощи интенсивной аэрации субстрата (расход воздуха 3 л/мин). Без аэрации такой рост достигается за 25-30 сут.

. Выход сухого вещества в полученном продукте 65,42%, содержащего,%: общий белок 14,345; истинный белок 9,25; целлюлоза 24,58; лигнин 7,24; редуцируюпме вещества .

Перевариваемоеть продукта увели- 5 чивается от 21,4-30,2% в зависимости от Сйока скармпивания и вида животных.

10

Формула изобретения

Штамм микромнцета Mortierella sp. BKM Р-2922Д для получения кормовой добавки из люцерны.

Изобретение относится к микробиологии, ,в частности, к получению кормовых добавок для животных, и касается нового штамма микромицета для получения кормовой добавки. Целью изобретения является получение нового штамма микромицита, разлагающего лигнино-целлюлозный комплекс люцерны.Штамм микромицета MORTIERELLA SP.ВКМ F- 2922Д депонирован во всесоюзной коллекции микроорганизмов. Штамм позволяет получить кормовую добавку из стеблей люцерны, содержащую 14,345% общего белка, 9,25% истинного белка, 24,58% целлюлозы,7,24% лигнина 4,73% редуцирующих веществ, и увеличить перевариваемость люцерны на 21,4-30,2%. 1 табл.