Способ получения липидов Советский патент 1990 года по МПК C12P7/64 C12N1/14 C12N1/14 C12R1/645 C12R1/66 C12R1/77 

Изобретение относится к технической микробиологии и касается способа получения липидов . П1кробиологическим синтезом. Микробные липиды могут быть использованы в качестве заменителей технических Ж1гров.

Цель изобретения - повышение содержания олеиновой кислоты в липидах.

Способ получения липидов осуществляют следующим образом.

Отаммы липигенных микроскопических грибов Cunninghamella japonica ВКМ F-1204, Aspergillus terreus DKM F-67, Fusariun oxysporum BKM F-137

или Alternaria cucumerina BKM F-1881 культивируют глубинным способом на питательной среде, содержащей сточные воды производства оливкового масла (отходы маслоэкстракционных заводов) в качестве источника углерода. Среда содержит также источник азота и фосфора, предпочтительно в виде фосфата аммония и стимулятор роста, например автолизат дрожжей.

Сточные воды производства оливкового масла содержат 3,0 - 3,8 сухих BepiecTB (СВ) следующего согтава, %:

PeflyiwpyKiuifie вещест- ва РВ40 - 50

Пектиновые вещества 16,5 - 20 Жиры 7,5 - 8,0

Клетчатка0,2

Общий азот0,2 - 0,3

в том числе белковый0,25 - 0,27 небелковый0,01 - 0,015 Сырой протеин1,2-1,8 Содержание РВ в сточных водах t,5 - 2,5%. РВ состоят в основном из глюкозы, фруктозы, caxapo3fji, ксилозы и арабинозы.

Процесс ведут при соотношении C:N равном 50:1, т.е. в условиях лимити- зации содержания азота в среде. Затем биомассу отделяют от жидкой фазы, сушат и экстрагируют из нее липпды.

Пример 1. Штамм микроскопического гриба Cunninghamilla japoni- са ВКМ F-1204 культивируют на питательной среде, содержащей 2,5% (по РВ) сточных вод, 0,1% (NH)2HP04 и 0,05% дрожжевого автолизата. Параллельно проводят выращивание на среде, содержащей 0,15% (NH4)z.MPO.

Среду разливают по 80 мл в колбы емкостью 500 мл, доводят рН до 6,0 и стерилизуют. Затем засевают 7-су- точной культурой, выращенной на сусло-агаровой среде. Процесс выращивания ведут при 26°С в течение 72 ч глубинным способом.

Полученную биомассу отделяют от жидкой фазы, промывают, сушат и экстрагируют хлороформом. Из экстракта липиды вьиеляют нод вакуумом.

Состав жирных кислот определяют методом газовой хроматограции на хроматографе Хром-4.

Полученные результаты приведены в таблице 1, 2.

Пример 2.В качестве микроорганизма используют штамм Altema- ria cucumerina ВКМ F-1881. Состав питательной среды идентичен примеру 1. C:N 50:1.

Выход биомассы 84% от РВ. Выход липидов 35% от абс. сухой биомассы

К{ир но кислотный состав липидов, % С«;о .9. C,4:o1,6j С,б;о9,7; С,е ,о 2,3, С 1ft.., 68,7,- ,г 11,6, Ь

Пример 3. Процесс ведут по гфимеру 2, но в качестве микроорга- . низма используют штамм Aspergillus terreus BKIl F-67.

Выход биомассы 66,4% от РВ, выход пипидов 30% от абс. сухой биомассы.

)1Сир но кислотный состав липидов, %: С11; о С,,;о 0,81; С(,:0 9,5; .о 2; С ig., 71,6; С 16 , 3 .

Пример 4. Процесс ведут по примеру 2, но в качестве микроорганизма используют штамм Fusarium oxys- porum ВКМ F-137.

Выход биомассы 66,6% от РВ, выход липидов 32% от абс. сухой биомассы.

Жирнокислотный состав липидов, %: CH-,O 0,3; 15,6; 5,3; 0 (в .-( 65,5; Сда 2. 12,2; С д-. 1,4.

Как следует из примеров 1 - 4, выход липидов 30 - 57%, содержание олеиновой кислоты 65,5 - 79,1%.

5 Формула изобретения

Способ получения липидов, вкпючаю- шцй глубинное культивирование микроорганизмов на .питательной среде, со- держащей источники углерода и азота при соотношении C:N, равном 50:1, а также источник фосфора и стимулятор роста, с последующим вьщелением целевого проду1ста, отличающийся тем, что, с целью повышения содержания в липидах олеиновой кислоты, в качестве источника углерода используют сточные воды производства оливкового -масла, содержащего 3,0 - 3,8% сухих веществ следующего состава, %:

Редуцирующие вещества40 - 50 Пектиновые вещества 16,5 - 20 Жиры7,5 - 8,0 Клетчатка 0,2 азот 0,2-0,3 в том числе белковый 0,25 - 0,27 небелковый 0,01 - 0,015 Сьфой протеин1, 2 - 1,8 а в качестве микроорганизмов - штамм .липогенньк микроскопических грибов Cunninghamella japonica ВКМ F-1204, или Aspergillus terreus ВКМ F-67, 55 или Fusarium oxysporum ВКМ F-137,или Alternaria cucumerina ВКМ F-1881.

5

0

45

50

Таблица 1

Изобретение относится к технической микробиологии, в частности к способам получения липидов микробиологическим синтезом. Микробные липиды могут быть использованы в качестве заменителей технических жиров. Цель изобретения - повышение содержания олеиновой кислоты в липидах. Штаммы липогенных микроскопических грибов CUNNING-HAMELLA, JAPONICA ВКМ F - 1204, ASPERGILLUS TERREUS ВКМ F-67, FUSARIUM OXYSPORUM ВКМ F-137 или ALTERNARIA CUCUMORINA ВКМ F-1881 выращивают глубинным способом на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, фосфора и стимулятор роста. Соотношение C:N равно 50:1. В качестве источника углерода используют сточные воды производства оливкового масла, содержащие 3,0-3,8% сухих веществ следующего состава, %: редуцирующие вещества 40-50

пектиновые вещества 16,5-20

жиры 7,5-8,0

клетчатка 0,2

общий азот 0,2-0,3

в т.ч.белковый 0,25-0,27

небелковый 0,01-0,015

сырой протеин 1,2-1,8. Содержание РВ в сточных водах 1,5-2,5%. Затем биомассу отделяют, сушат и экстрагируют из нее липиды. Выход липидов 30-57%. Содержание олеиновой кислоты в липидах 65,6-79,1%. 2 табл.