Среда для криоконсервации гамет Советский патент 1991 года по МПК A01N1/02 

Изобретение относится к искусственному осеменению животных, в частности к средам для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных, например быка.

Цель изобретения - повышение выживаемости и оплодотворяемости деконсервированных гамет за счет снижения накопления в семени токсичных продуктов перекисного окисления липидов.

Указанная цель достигается тем, что известная среда дополнительно содержит мембранотропный препарат антиоксидант- ного действия сукцинат 2-этил-6-метил-3- оксипиридин (мексидол).

Пример. Для получения среды было подготовлено 5 вариантов состава (табл 1) следующим образом.

В кипяченую бидистиллированную воду вносили при 70-95°С соответствующее количество лактозы и мексидола, растворяли и стерилизовали 10 мин на кипящей водяной бане, а затем добавляли глицерин, охлаждали до 40-45°С, растворяли желток и

охлаждали до температуры семени. После разбавления семя криоконсервируют общепринятым методом

Указанные варианты испытывали в лабораторных условиях на подвижность, выживаемость и абсолютный показатель выживаемости деконсервированных гамет быка при 38°С (табл 2)

Оптимальный состав среды следующий, мас.%:

Лактоза8,8

Глицерин3,8

Желток куриного

яйца11.5

Мексидол0,0000255

Бидиг.тиллированная

водаДо 100

Эффективность среды оценивают по подвижности, выживаемости, абсолютному показателю выживаемости, сохранности ак- росом деконсервированных гамет быка и содержанию малонового диальдегида (токсичного продукта перекисного окисления липидов) в замороженно-оттаянном семени (табл.3).

Ё

О

со

4 Ю О 00

Результаты испытаний показывают, что среда на 12,5% повышает выживаемость деконсервированных гамет и на 29,7% снижает содержание в семени токсичных продуктов перекисного окисления липи- дов.

Криозащитный эффект мексидола заключается в первую очередь в ингибировании перекисного окисления липидов, которое усиливается при криоконсервации и оказывает негативное влияние на функциональную полноценность гамет. Он реагирует с перекисными радикалами липидов и гидро- ксильными радикалами пептидов и белков. Кроме того, мексидол хорошо фиксируется в липидном бислое мембран: в спектре липидов, выделенных из гамет после криоконсервации, появляется характерный для него максимум поглощения при 285 нм. Концентрация диеновых конъюгатов (первичных продуктов перекисного окисления липидов, поглощающих при 230-233 нм) снижается в гаметах по сравнению с контролем на 32,2%. Таким образом, мексидол обладает высоким мембранотропным действием. Он хорошо растворим в воде, не разрушается

при стерилизации кипячением, сохраняется при комнатной температуре не менее 2 лет.

Оплодотворяемость деконсервирован- ных гамет с использованием среды 68,0% при базовой 55,0±4,97%.

Формула изобретения Среда для криоконсервации гамет,

включающая лактозу, глицерин, желток куриного яйца и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выживаемости и оплодотворяемости деконсервированных гамет, среда дополнительно содержит

сукцинат 2-этил-6-метил-3-оксипиридин при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Лактоза7,5-9,6

Глицерин2.4-5,0

Желток куриного яйца11.5-16.7

Сукцинат 2-этил-6-метил-З-оксипиридин0,00000255-0,00255

Бидистиллированная

водаДо 100

Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. Целью изобретения является повышение выживаемости и оплодотворяемое™ деконсервированных гамет Среда содержит следующие компоненты, мас.%: лактоза 7,5-9,6. глицерин 2,4- 5,0, желток куриного яйца 11,5-16,7, сукцинат 2-этил-6-метил-3- оксипиридин 0.00000255-0,00255, вода до 100. Выживаемость семени 8.8±0,17 ч, оп- лодотворяемость 68% 3 табл.

Варианты состава среды

Физиологические показатели гамет в различных средах

Р 0,05 хх Р 0,01 ххх Р 0,001

Таблица 1

Таблица 2

Эффективность среды в сравнении с прототипом

Р 0,05

Таблица 3