Среда для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных Советский патент 1985 года по МПК A61D7/02 

Изобретение относится к искусственному осеменению животных, в частности к синтетическим средам для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных.

Известна среда для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных, включающая в свой состав липидные антиоксиданты 2,6-дибутил-п-крезол(бутилгидроокситолуол, БОТ), либо 2- (иЗ) -бутил-4-гидрооксианизол (бутилгидрооксианизол, БОА) 1.

Однако эта среда не обеспечивает продолжительной жизнедеятельности спермиев при замораживании-оттаивании вследствие ее низких защитных свойств.

Известна также среда для замораживания и хранения спермы баранов, в состав которой входит антиоксидант токоферолацетат 2.

Известна также среда для замораживания спермы животных, в которую в качестве липидного антиоксиданта включен 2,6-дитрет-бутил-1,4-крезол 3.

Недостатком известных сред для разбавления и замораживания семени с/х животных является то, что входящие в их состав антиоксиданты (БОТ, БОА, 2,б-ди-трет-бутия-1,4-крезол, токоферолацетат) не растворимы в воде, недостаточно ингибируют окислительные процессы в семени в процессе его подготовки к криоконсервации, в результате чего происходит накопление вредных продуктов перекисного окисления липидов, что при их высокой концентрации приводит к повреждению биомембран и акросом, а также К снижению функциональной полноценности спермы.

Наиболее близкой по технической сущности к изобретению является синтетическая среда для разбавления и замораживания семени хряка, включающая сахарозу, глюкозу, фруктозу, этилендиаминтетраацетат двунатриевый двуводный, цитрат натрия 5,5 водный, сульфат аммония, трис(оксиметил) аминометан, глицерин, желток куриного яйца и воду дистиллированную 4.

Недостатком известной среды является отсутствие в ней природных компонентов.

ингибирующих процесс перекисного окисления липидов в семени. Отсутствие таковых ведет к уменьщению антиокислительной активности липидов мембран, акросом, снижению функциональной полноценности спермиев.

Целью изобретения является повышение жизнеспособности спермиев при криоконсерации семени животных путем ингибирования процесса перекисного окисления липидов.

Указанная цель достигается тем, что известная среда дополнительно содержит бакланозид - природный триозид (25R )-фурост-5енЗД 22df, 26 триол -26-0- Д глюко5 пиранозид при следующем соотношении ингредиентов, мае. /о:

Сахароза3,5-4,5

Глюкоза0,6-0,7

Фруктоза0,6-0,7

Этилендиаминтетра0ацетат двунатриевый

двуводный (трилон Б)0,3-0,4

Цитрат натрия

5,5 водный0,2-0,3

Сульфат аммония0,1-0,2

5 Трис(оксиметил) аминометан0,04-0,06 Глицерин3,0-4,0 Желток куриного яйца4,0-5,0 Бакланозид 0,00003-0,00006 Вода бидистиллирован0 наяОстальное

Ярыжер, Среду для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных готовят следующим образом.

Кипятят бидистиллированную воду и охлаждают ее до 40°С. В 1 мл этой воды растворяют соответствующее количество бакланозида. В оставшемся количестве воды (999 мл) растворяют остальные компоненты, добавляют растворенный бакланозид, после чего в полученный раствор вводят желток куриного яйца. После этого среду делят пополам и во вторую часть добавляют глицерин.

Оптимальный состав среды для разбавления и замораживания семени хряковпроизводителей приведен в таблице.

Ингредиенты

Сахароза

Глюкоза

Фруктоза

Этилендиаминтетраацетат двунатриСодержание на 1 л

Вес.% бидистиллированной воды

4,29 0,69 0,69

СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ И ЗАМОРАЖИВАНИЯ СЕМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ, преимущественно хряков-производителей, включающая сахарозу, глюкозу, фруктозу, трилон Б, 11итрат натрия 5,5 водный, сульфат аммония, трис (оксиметил) аминометан, глицерин, желток куриного яйца и воду, отличающаяся тем, что, с целью улучщения сохранности семени при криоконсервации путем ингибирования процесса перекисного окисления липидов, среда дополнительно содержит бакланозид - природный триозид

Полученное семя выдерживают в течение 1 ч при комнатной температуре и разбавляют на половину конечной степени синтетической средой без глицерина в зависимости от концентрации семени в эякуляте. Приготовленную среду хранят при комнатной температуре. Разбавленную сперму охлаждают равномерно-замедленным способом до -f 15°С и выдерживают при такой температуре 3-4 ч, затем охлаждают в течение 1 ч до +4°С. Добавляют вторую среду, содержащую глицерин. После этого размешивают и замораживают сперму в форме гранул на фторопластовой пластине, предварительно охлажденной в жидйом азоте. Оттаивание семени проводят в водяной бане при +50°С. Результаты испытаний показывают, что после оттаивания подвижность сперматозоидов увеличивается на 50%, выживаемость в часах при 37°С - на 37,5% по сравнению с известной средой. Перекисное окисление липидов снижается на 9%. Высокая антирадикальная активность бакланозида объясняется большой подвижностью атома водорода гемикетальной гидроксильной группы при С-22 агликона и образованием стабильного промежуточного радикала-ингибитора. Оплодотворяемость свиноматок при использовании спермы хряков-производителей, разбавленной предлагаемой средой, по сравнению с известной повышается на 23%. Ожидаемый экономический эффект от внедрения предлагаемой среды составит 14,4 тыс. руб. на каждую 1000 свиноматок.