Способ определения активности Т-лимфоцитов в организме Советский патент 1991 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для выявления активности интерлейкин-2-опосредованного Т-кле- точного звена иммунитета)

Цель изобретения - повышение точности способа путем выявления интерлейкин- 2-зависимого ответа лимфоцитов.

Способ осуществляют следующим образом.

Обследуемому пациенту проводят постановку трех внутрикожных проб на внутренней поверхности предплечья (в верхней, средней и нижней третях) на достаточном расстоянии для исключения взаимовлияния. В верхнюю треть предплечья после обра- Сотки 70°-ным спиртом вводят внутрикожно 0,1 мл фитогемагглютинина (ФГА) на физиологическом растворе в концентрации 20 мкг/мл. В среднюю и нижнюю трети предплечья аналогичным образом вводят такой же раствор митогена в объеме 0,1 мл и 0,1 мл циклоспорина А (ЦС) на физиологическом растворе в концентрациях соответственно 6,25 и 25 мкг/мя.

Учет проб производят через 24 ч путем измерения поперечного к оси введения диаметра пятна гиперемии в миллиметрах. Полученные значения подставляют в формулу для вычисления концентрации ЦС, инги- бирующей 50% интерлейкин-2-зависимого пролиферативного ответа реакции. Величина концентрации 50%-ной ингибиции может служить для оценки интерлейкин-2-зависи- мой активности Т-лимфоцитов у данного индивидуума, а при сравнении с контроль(

ю со о

Os

ной группой давать возможность оценочного критерия повышенной или пониженной активности у пациента.

На основании значений трех кожных проб рассчитывают концентрацию 50%- ной ингибиции по следующей формуле:

1

где ИДбО - концентрация ЦС, ингибирую- щая 50% пролиферативного ответа кожной пробы;

Омакс-диаметр пятна гиперемии пробы на ФГА, т. е. максимальная активность Т- популяции лимфоцитов пациентов у данного индивидуума на эту дозу митогена;

Дч и Д2 - диаметры пятен гиперемии кожных проб ФГА с ЦС в концентрациях соответственно 6,25 и 25 мкг/мл.

Величины ИДво могут служить критерием оценки и прогнозирования клинического течения некоторых заболеваний исходя из трактовки значимости интерлейкин-2-за- висимой активности Т-системы лимфоцитов в данном патологическом процессе.

Пример 1. Пациент Я., 27 лет. Диагноз: открытый травматический перелом нижней челюсти в области угла справа. ИДбо- 4,36 мкг/мл, что значительно ниже среднегрупповой величины для группы с переломами нижней челюсти (9,91 ± 0,66 мкг/мл) и ниже среднегрупповой величины для группы здоровых доноров (15,43 ± 0,65 мкг/мл), что говорит о сниженной интерлейкин-2- зависимой активности Т-системы лимфоцитов организма данного пациента и о возможности развития осложнений воспалительного характера. Через неделю у пациента развилась клиническая картина острого травматического остеомиелита.

Пример 2, Пациент А., 25 лет. Диагноз: открытый травматический перелом нижней челюсти в области углов.

ИДбо 17,49 мкг/мл, что говорит об нормальной активности интерлейкин-2-за- . висимой системы Т-лимфоцитов и о благоприятном возможном течении раневого процесса. Консолидация перелома без воспалительных осложнений.

Пример 3. Пациент Р., 40 л. Диагноз: системная красная волчанка в стадии обострения.

ИДзо 28,40 мкг/мл, что значительно выше, чем у здоровых, и свидетельствует об

активации интерлейкин-2-зависимого звена Т-системы лимфоцитов как негативного фактора при патогенезе данного заболевания,

П ри м е р 4, Пациент Т., 17 л. Диагноз:

системная красная волчанка вне обострения с тяжелым клиническим течением с выраженной дисфункцией суставов.

ИДбо 2,85 мкг/мл, что свидетельствует

о выраженном угнетении интерлейкин-2-за- висимой активности Т-системы лимфоцитов и одновременно об отсутствии активного процесса.

Пример 5. Пациент С., 42 г. Диагноз:

5 ревматоидный артрит с благоприятным течением процесса с сохранением достаточной амплитуды движений в суставах.

ИДбо 9,73 мкг/мл, что близко к величине ИДбо у здоровых. Это свидетельствует о

0 более благоприятном прогнозе в ближайшее время с учетом патогенеза данного заболевания.

Пример 6. Пациентка В., 20 л. Диагноз: ревматоидный артрит вне обострения с тя5 желым течением заболевания со значительным ограничением подвижности суставной системы.

ИД50 2,28 мкг/мл, что свидетельствует о значительном подавлении активности и в

0 прогностическом отношении может говорить о неблагоприятном течении процесса, Таким образом, предлагаемый способ позволяет выявлять и оценивать среди популяции Т-лимфоцитов интерлейкин-25 зависимую активность Т-лимфоцитов непосредственно в живом организме, что повышает точность кожных проб, расширяет их информативность и ценность в отношении прогнозирования течения ряда

0 заболеваний, а также может быть использован как скрининг-тест при массовых иммунологических исследованиях, особенно тех, при которых патогенез связан с избыточной активацией биосинтеза интерлейкина-2

5 или, наоборот, с его депрессией.

Способ прост в исполнении, не требует больших материальных затрат и дорогостоящего оборудования и может быть широко использован в клинической практике.

0

Формула изобрет Пия

Способ определения активности Т-лимфоцитов в организме, включающий внутри- 5 кожное введение фитогемагглютинина с последующим измерением зоны гиперемии, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления активности Т-лимфоцитов с интерлейкин-2-зависимым ответом,

дополнительно вводят внутрикожно одно-магглютинин циклоспорином и при увеливременно с фитогемагглютинином цикло-чении этого показателя по сравнению со

спорин и после измерения зоны гиперемииздоровыми определяют повышенную активвычисляют показатель 50%-ного подавле-ность Т-лимфоцитов, а при его снижении ния кожной реакции организма на фитоге-5 низкую активность.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для выявления активности интерлейкин-2-опосредованного Т-кле- точного звена иммунитета. Цель изобретения - повышение точности способа за счет выявления активности Т-лимфоцитов с ин- терлейкин-2-опосредованным ответом. Обследуемому пациенту вводят внутрикожно фитогемагглютинин и смесь фитогемагглю- тинина с циклоспорином. Измеряют зоны гиперемии и вычисляют величину 50%-ной ингибиции ответа на фитогемагглютинин. При повышении этой величины по сравнению со здоровыми определяют повышенную активность, а при ее снижении - низкую активность интерлейкин-2-зависимого ответа. В сравнении с прототипом увеличивается точность в определении активности Т-лимфоцитов, т. к. становится возможным определение активности популяции Т-лимфоцитов с интерлейкин-2-зависимым ответом. W Ё