Препарат для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков Советский патент 1991 года по МПК C12Q1/00 C12Q1/14 C12Q1/56 

Изобретение относится к микробиологии и предназначено для ускоренного определения плазмокоагулирующей активности стафилококков при их идентификации.

Цель изобретения - улучшение качества препарата за счет повышения его чувст- вительности, упрощение и ускорение процесса определения, а также увеличение срока годности.

Используемый для определения плазмокоагулирующей активности твердофазный препарат- плазмокарандаш постоянно готов к быстрому применению на стекле, содержит сухую цитратную кроличью плазму и дополнительно полиэтиленгликоль, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении ингредиентов, мас.%: Сухая цитратная кроличья плазма36,54- 39,62

Полиэтиленгликоль

с мол. м, 4000 Бычий сывороточный

альбумин

Сахароза

Глицерин

35,85-40,38

3.84-5.66 3,77-5.77 Остальное

Твердый препарат имеет форму карандаша и обладает пишущими свойствами по стеклу, пластмассе, фарфору.

В качестве ингредиентов в препарате используют: сухую цитратную кроличью плазму - порошок белого цвета; полиэтиленгликоль с мол.м. 4000 - кристаллы белого цвета; бычий сывороточный альбумин - ли- офилизированный порошок белого цвета; сахарозу ЧДА - кристаллический порошок белого увета: глицерин чистый - бесцветную прозрачную жидкость.

Сухую цитратную кроличью плазму вводят в препарат в качестве специфического субстрата, полиэтиленгликоль - в качестве

Ё

ON

00

о VI

VI

твердофазного носителя субстрата, консерванта и стабилизатора, обусловливающего форму и пишущие свойства препарата, бычий сывороточный альбумин - в качестве связывающего агента, улучшающего пишу- 5 щие свойства препарата, сахарозу как стабилизатор и связывающий компонент и глицерин как агент, регулирующий консистенцию, пластичность и способствующий сохранению физико-химических свойств 10 препарата.

Препарат получают следующим образом.

В фарфоровую ступку последовательно вносят подиэтиленгликоль, сухую цитрат- 15 ную кроличью плазму, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и растирают до гюлуче- ния белой пудры, затем каплями добавляют глицерин и перемешивают до образования однородной массы вязкой консистенции, 20 которую формуют в виде карандаша, используемого впоследствии многократно для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков на предметном стекле.25

П р и м е р. В фарфоровую ступку последовательно вносят 2 г полиэтиленгликоля е мол.м. 4000, 2 г сухой цитратной кроличьей плазмы, 0,25 г бычьего сывороточного альбумина, 0,25 г сахарозы и тщательно расти- 30 рают в течение 20 мин до получения мелкой пудры. Затем каплями при постоянном перемешивании добавляют 0,75 мл глицерина до образования однородной массы вязкой консистенции, которой придают форму ка- 35 рандаша. Полученный плазмокарандаш вводят в пластмассовый футляр и хранят в холодильнике при 4°С, По мере надобности плазмокарандаш используют в работе (срок наблюдения 3 года).40

В табл. 1 приведены показатели качества плазмокарандаша в зависимости от содержания ингредиентов; в табл. 2 - оценка экономичности определения плазмокоагулирующей активности стафилококков с по- 45 мощью известного и предлагаемого репаратов; в табл. 3 - оценка скорости определения плазмокоагулирующей активности стафилококков с помощью известного и предлагаемого препаратов.50

Как видно из табл. 1, все плазмокаран- даши, содержащие ингредиенты в пределах граничных значений, обладают хорошими пишущими свойствами, пластичностью и длительной сохранностью.55

Плазмокарандаш применяют следующим образом.

На чистое предметное стекло наносят плазмокарандашом 2-3 пересекающихся

штриха, каждый длиной до 1 см. Затем на штрихи наносят каплю физраствора и в ней тщательно эмульгируют бактериальную петлю 18-24-часовой исследуемой культуры стафилококка. Контролем служат любые ко- агулазоотрицательные микробы. Предметное стекло помещают во влажную камеру и инкубируют в термостате при 37°С. Через каждые 15 мин учитывают результаты.

В опытной капле через 30-40 мин наступает частичная, а через 60-90 мин полная коагуляция плазмы. Окончательный результат можно учитывать через 2 ч. Контрольная капля через 2 ч остается жидкой.

Применение плазмокарандаша в качестве препарата для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков является более экономичным, чем применение сухой цитратной плазмы, так как позволяет использовать минимальное количество сухой цитратной плазмы и других реагентов без потерь, что снижает себестоимость препарата (табл. 2).

Кроме того, применение плазмокарандаша по сравнению с использованиемюухой цитратной плазмы позволяет ускорить выдачу окончательного ответа о плазмокоагулирующей активности исследуемой культуры в среднем в 5 раз (табл. 3).

Таким образом, технико-экономическая эффективность предлагаемого препарата состоит в уменьшении себестоимости препарата, увеличении срока его годности, упрощении и ускорении определения плазмокоагулирующей активности стафилококков.

Формула изобретения

Препарат для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков, содержащий сухую цитратную кроличью плазму, отличающийся тем, что, с целью улучшения качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощения и ускорения процесса определения, а также увеличения срока годности, он дополнительно содержит полиэтиленгли- коль с мол.м. 4000, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении компонентов, мас.%: Сухая цитратная

кроличья плазма36,54-39,62

Полиэтиленгликоль

с мол. м. 4000 35,85-40,38

бычий сывороточный альбумин3,84-5,66

Сахароза3,77-5,77

Глицерин Остальное

Таблица 2

Изобретение относится к микробиологии и предназначено для определения коагулирующей активности: стафилококков при их идентификации. Цель изобретения - улучшение качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощение и ускорение процесса определения, а также увеличение срока годности. Используемый препарат содержит сухую цитратную кроличью плазму, полиэтиленгликоль с мол.м. 4000, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении компонентов, мас.%: сухая цитратная кроличья плазма 36,54-39,62; полиэтиленгликоль 4000 35,85-40.38; бычий сывороточный альбумин 3,84-5,66: сахароза 3,77-5,77: глицерин остальное. 3 табл.

Критерии экономичности

Сухая цитратная кроличья плазма

2-3

Пробирки, пипетки

Растворение сухой плазмы,

ее разведение и разливка

в пробирки

До 25-30

2

После открытия ампулы 3-4 дня

Исследуемая культура

Золотистый стафилококк 209

243

Кован-Г Королев Иванов

12600 Смит

Эпидермальный стафилококк

Сапрофитовый стафилококк

Микрококк лизодейктикус

Кишечная палочка (0-55)

Плазмокарандаш

2-3

25-30

Предметные стекла

Нанесение штрихов на

стекло

До 3-5

Таблица 3

Время получения рез

льтата. f мин )

Сухая цитратная кроличья плазма (прототип)

Плазмокарандаш

62 48 66 74 74 82 85