Способ дифференциации географических рас туляремийного микроба Советский патент 1991 года по МПК C12Q1/04 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при экспресс-анализе циркулирующих в природе штаммов туляремийных микробов во время эпизоотологического или эпидемического обследований.

Цель изобретения - ускорение и упрощение способа.

Пример1.В пробирке с 1 мл дистиллированной воды готовят (1-10 млрд./мл) суспензию штамма Franciselfa tularensls Schu (неарктическая раса), добавляют фенолфталеинфосфат (500 мкг) и инкубируют при 37°С 10- 15 мин. Затем в реакционную смесь добавляют 1 н. раствор щелочи, например NaOH .(не менее 1 капли). Смесь окрашивается в малиновый цвет. Крнтроль- ные пробирки (с кипяченой в течение 10 мин

взвесью F.tularensis Schu ) остаются бесцветными.

П р и м е р 2. Способ выполняют аналогично примеру 1, но используют штамм F.tularensis 543 (среднеазиатская раса) и концентрацию субстрата 1000 мкг. В пробирке через 10-15 мин также появляется малиновое окрашивание.

П р и м е р 3. Способ выполняют аналогично примерам 1 и 2, но используют концентрацию фенолфталеинфосфата 1500 мкг. Малиновая окраска появляется после инкубации при ,

П р и м е р 4. Выполняют способ аналогично примеру 1, но используют штамм F. tularensis 503 (голарктическая раса) и концентрацию фенолфталеинфосфата 1000 мкг. После 10 - 15 мин инкубации и добавления

О

оп ел о со

о

щелочи окраска в пробирке не появляется и смесь остается бесцветной, как и в контрольной пробирке.

Таким образом, способ позволяет быстро (10-15 мин) и просто дифференцировать европейскую расу от американской и среднеазиатской. Способ ускоряет получение результатов (в 40 - 80 раз), упрощает процедуру определения разновидности F.tularensis (не требует сложного нингидри- нового реактива, не зависит от качества и точности его приготовления, не требует кипячения реакционной взвеси).

Предлагаемый способ может быть использован при работе с большим набором штаммов возбудителя, а также при работе в полевых условиях, при необходимости срочной характеристики выделенных культур F.tularensis из объектов внешней среды. В летнее время необходимость инкубации при 37°С отпадает, так как ракция может протекать и при комнатной температуре.

Формула изобретения

Способ дифференциации географических рас туляремийного микроба, включающий приготовление суспензии исследуемой культуры, инкубирование в присутствии субстрата, обработку реактивом с последующей дифференциацией штаммов американской и среднеазиатской рас от штаммов

голарктической разновидности по появлению малинового окрашивания реакционной смеси, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, исследуемую культуру суспензируют в дистиллированной воде, в качестве субстрата используют фенолфталеинфосфат в количестве 500 - 1500 мкг на 1 мл суспензии с концентрацией 1 - 10 млрд.микр.клеток, инкубирование проводят в течение 10 1-5 мин, а в к-ачестве реактива используют щелочь.

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при экспресс-анализе циркулирующих в природе штаммов туляремийных микробов во время эпизоотологического или эпидемического обследований. Цель изобретения - ускорение и упрощение способа. Из исследуемой культуры готовят суспензию в дистиллированной воде с концентрацией микр.клеток 1-10 млрд,/мл. К суспензии добавляют фенолфталеинфосфат из расчета 500 - 1500 мкг/мл суспензии, инкубируют 10 - 15 мин. Затем в смесь вводят щелочь и при появлении малинового окрашивания дифференцируют штаммы американской (неарктической) и среднеазиатской рас, а при отсутствии окрашивания - штаммы голарктической разновидности. fe