Способ получения аминоацилполимеров Советский патент 1991 года по МПК C08F8/36 

Пример 2. К 200 мг хлорметилиро- ваяного сополимера стирола с 1 % дивинил- бензола (см. пример 1) добавляют раствор 42 мг (0,13 ммоль) цезиевой соли Вос-алани- на в 1,5 мл ДМФА и 42 мг(0,13 ммоль)ТБАБ, Суспензию встряхивают при комнатной температуре (15-25°С) в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения составляет 0,48 ммоль/г (выход 89%).

По данным прототипа выход 77%.

Пример 3. К 200 мг хлорметилиро- ванного сополимера (см.пример 1) Добавляют раствор 35 мг (0,13 ммоль) калиевой соли Вос-лейцина в 1,5 мл ДМФА и 57 мг (0,13 ммоль) трибутиленбензиламмонийброми- да. Суспензию встряхивают при 15-25°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения составляет 0,48 ммоль/г (89%).

По данным прототипа выход 87%.

Пример 4. К 200 мг хлорметилиро- ванного сополимера стирола с 1 % дивинил- бензола с содержанием активного хлйра 0,54 мэкв/г по данным анализа по фольгар- ду, что отвечает 0,108 мэкв подвижного хло- ра, добавляют раствор 78 мг (0,216 ммоль) цезиевой соли Вос-изолейцина в 1,5 мл ДМФА и 70мг (0,216 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при температуре 20°С в течение 48 ч. Полимер отфильтровывают, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения составляет 0,50 ммоль/г, что отвечает выходу связывания 93%.

Примеры 5-10. В условиях, аналогичных условиям примера 4, проводят реакцию 200 мг того же сополимера с цезиевой солью Вос-изолейцина при различных соотношениях реагентов. Результаты кратко суммированы в табл.1.

Пример 11.К 200 мг хлорметилиро- ванного сополимера стирола с 2% дивинил- бензола (содержание подвижного хлора 0,60 мэкв/г), что отвечает 0,12 мэкв подвижного хлора, добавляют раствор 52 мг (0,144 ммоль) калиевой соли Вос-изолейцина в 1,5 мл ДМФА и 46мг (0,144 ммоль) ТБАБ Реакцию и последующую промывку проводят как описано в примере 4. Получают степень замещения полимера 0,56 ммоль/г, что отвечает выходу связывания Вос-изолейцина 93%.

Из сопоставления с примером 5 видно, что результат замещения не зависит от типа использованного стирол-дивинилбензоль- ного сополимера.

Пример 12. К 200 мг хлорметилиро- ванного сополимера стирола с 1 % дивинил- бензола (см. примеры 1, 4) добавляют раствор 59 мг (0,13 ммоль) цезиевой соли

Вос-0-бензил-треонина в 1,5 мл ДМФА и 42 мг(0,13ммоль)ТБАБ. Суспензию встряхивают при 20°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием и промывают как описано в примере 1, высушивают в вакууме. Степень замещения 0,45 ммоль/г (выход 83%).

При использовании условий прототипа (без добавки ТБАБ, при 50°С) выход 59%. Пример 13. К 200 мг сополимера

(пример 1) добавляют раствор 56 мг (0,13 ммоль) цезиевой соли Вос-0-бензилсерина в 1,5 мл ДМФА и 42 мг (0,13 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при 20°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием,

промывают, как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения 0,46 ммоль/г (выход 85%).

При использовании условий прототипа выход 72%.

Пример 14. К 200 мг сополимера

(пример 1) добавляют раствор 48 мг (0,13 ммоль) калиевой соли Вое-/ -бензилового эфира аспзрагиновой кислоты в 1,5 мл ДМФА и 42 мг (0,13 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при 15-25°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения 0,42 ммоль/г (выход 78%).

При соблюдении условий прототипа вы- ход 67%.

Пример 15. К 200 мг сополимера (пример 1) добавляют раствор 46 мг (0,13 ммоль) калиевой соли Boc-S-бензилцистеина в 1,5 мл гексаметилфосфотриамида (ГМФТА) и 42 мг (0,13 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при 15-25°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают

в вакууме. Степень замещения 0,51 ммоль/г (выход 95%).

При соблюдении условий прототипа (в отсутствие ТБАБ. в растворе ДМФА при 50°С/ выход составляет 31 % в случае калиевой соли и 48% - в случае соли цезия.

Пример 16. К 200 мг сополимера (пример 1) добавляют раствор 43 мг (0,13 ммоль) калиевой соли Boc-S-ацетоксиме- тилцистеина в 1,5 мл ГМФТА и 42 мг (0,13

ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при 20°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения 0,46 ммоль/г (выход 85%). Тот

же выход получают с цезиевой солью данной ациламинокислоты,

В условиях прототипа (цезиевая соль в отсутствие ТБАБ, в растворе ДМФА при 50°С) получают выход 41 % при 1,2-кратном избытке реагентов по отношению к подвижному хлору и 44% - при соотношении реагентов 3:3:1.

Пример 17. К 200 мг сополимера (пример 1) добавляют раствор 60 мг (0,13 ммоль) калиевой соли Boc-Nimj-тозилгисти- дина в 1,5 мл ДМФА и 42 мг (0,13 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при 20°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения 0,45 ммоль/г (выход 83%).

В условиях прототипа получают выход 30% с применением цезиевой и 41 %-калие- вой соли.

Пример 18. К 200 мг сополимера (0.108 мэкв хлора) добавляют раствор 59 мг (0,13 ммоль) цезиевой соли Вое- Nq-нитро- аргининав 1.5(мл ДМФА и 42 мг (0,13 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при температуре 50°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения составляет 0.45 ммоль/г (83%).

При комнатной температуре степень замещения 0,15 ммоль/г (выход 28%) в случае цезиевой соли и 0,22 ммоль/г (41 %) - в случае калиевой соли.

В условиях прототипа (в отсутствие ТБАБ при 50°С, цезиевая соль) выход составляет 19% при соотношении реагентов 1.2:1.2:1 и 35% - при соотношении реагентов 3:3:1.

Пример 19. К 200 мг сополимера (0,108 мэкв хлора) добавляют раствор 82 мг (0,216 ммоль) цезиевой соли Вос-глутамина в 1,5 мл ДМФА и 70 мг (0,216 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при 20°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения составляет 0,30 ммоль/г (выход 56%).

При соблюдении условий прототипа выход составляет 17%.

Пример 20. К 200 мг сополимера (0,108 мэкв хлора) добавляют раствор 50 мг (0,13 ммоль) цезиевой соли Вос-глутамина в 1,5 мл ДМФА и 42 мг (0,13 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при 50°С в течение 24 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения составляет 0,37 ммоль/г (выход 69%).

Пример 21. К 200 мг сополимера (0,108 мэкв подвижного хлора) добавляют раствор 35 мг (0,13 ммоль) калиевой соли Вос-аспарагина в 1,5 мл М-метилпирролидо- на и 42 мг (0,13 ммоль) ТБАБ. Суспензию встряхивают при 20°С в течение 48 ч. Полимер отделяют фильтрованием, промывают

как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения составляет 0.40 ммоль/г (выход 74%).

При замене N-метилпирролидона на другие растворители получают выходы: в

гексаметилфосфотриамиде-74%, вдимети- лацетамиде - 70%, в диметилформамиде - 52%.

При соблюдении условий прототипа (в отсутствие ТБАБ. в диметилформамиде при

50°С) получают следующие выходы: при соотношении (молярном) цезиевой соли Вос- аспарагина, ТБАБ и подвижного хлора 1,2:1,2:1 - 13%. при соотношении 2:2:1 - 17%.

П ри мер 22. К 200 мг полимера (0,108 мэкв хлора) добавляют раствор 46 мг (0.13 ммоль) калиевой соли Boc-NG-нитроаргини- на в 1,5 мл гексаметилфосфотриамида и 42 мг (0,13 ммоль)ТБАБ. Суспензию встряхивают при 15°С в течение 48ч-. Полимер отфильтровывают, промывают как описано в примере 1 и высушивают в вакууме. Степень замещения составляет 0,37 ммоль/г (выход 69%).

Выход в условиях прототипа 19%.

Данные по примерам 23-28 приведены в табл.2.

40

Формула изобретения

Способ получения аминоацилполиме- ров путем обработки сшитого хлорметили- рованного сополимера стирола с дивинилбензолом солью ациламинокислоты в апротонном растворителе, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода аминоацилполимеров, процесс проводят в присутствии четвертичного органического основания, выбранного из группы,

состоящей из тетрабутиламмонийбромида, трибутилбензиламмонмйбромида и тетра- бутилфосфонийбромида, при молярном соотношениисолиациламинокислоты:четвертичного органического основания и количество подвижных атомов хлора в сополимере, равном (1-2);(1- 2):1, и температуре 15-50°С.

Таблица 1

Изобретение относится к области химии полимеров и может быть использовано в биотехнологии для твердофазного синтеза пептидов. Изобретение позволяет повысить выход ациламинополимера до 61 - 93%, что достигается обработкой сшитого хлорметилированного сополимера стирола с дивинилбензолом солью ациламинокислоты в присутствии четвертичного органического основания, выбранного из группы, состоящей из тетрабутиламмонийбромида, трибутилбензиламмонийбромида и тетрабутилфосфонийбромида при молярном соотношении солиациламинокислоты, четвертичного органического основания и количества подвижного хлора в сополимере, равном (1 - 2) : (1 - 2) : 1, и температуре 15 - 50°С. 2 табл.

- Опыт проводили при 50°С

Таблица 2