Способ получения биомассы РNеUмосYSтIS caRINII Советский патент 1991 года по МПК C12N1/10 

(Л

С

Изобретение относится к области медицины, а именно к паразитологии, и касается способов получения биомассы Pneumocystis carinii. которая может быть использована для изготовления диагностических тест-систем. Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта. Способ изобретения заключается в том, что в качестве животных используются минисвиньи и применяются дополнительное интраназальное введение Рл. carinii. Способ позволяет накопить при меньших затратах больше массы Pn. carinii

Изобретение относится к медицине, а именно к паразитологии, и касается способов получения биомассы Pn. carinii, которая может быть использована для изготовления диагностических тест-систем.

- Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта.

Поставленная цель достигается использованием в качестве животных минисвиней и дополнительным интраназальным введением РП. carinii.

П р и м е р 1. Минисвиньям вводят подкожно в область бедра ацетат кортизона 2 раза в неделю в течение 2 месяцев. На второй неделе с начала инъекций проводят интраназальное инфицирование испытуемых животных суспензией цист при концентрации 10 цист/мл.

Опыты проводят на 25 минисвиньях весом 1,5-2 кг в возрасте от 1 до 1,5 месяцев.

Животных разделяют на две группы: опыт и контроль. С целью снижения иммунитета, минисвиней из опытной группы подготавливают к инфицированию Pn. carinii введением подкожно в течение 2 недель дважды в неделю ацетата кортизона - разовая доза 75-100 мл на 1 кг массы. После чего на фоне продолжающихся введений ацетата кортизона проводят интраназальное заражение минисвиней. Для этого животным дают легкий эфирный наркоз, после чего закапывают паразитарную суспензию в количестве 3,0 мл в концентрации 10° мл Контрольная группа получает по той же схеме вместо ацетата кортизона 0,85% хлористого натрия. Вовремя эксперимента животных содержат на низкобелковой монотонной диете (овсяная каша на воде). Для предупреждения бактериальной инфекции в пищу добавляют тетрациклин из расчета 25 мг на 1 кг массы

О 00

ел

Ч)

о

животного. Эксперимент продолжается 2 месяца.

П р и м е р 2. Животных умерщвляют обескровливанием под эфирной анасте- зией, иссекают легкие и готовят из них мазки-отпечатки. Окраску препарата осуществляют по Романовскому и оценивают в световом микроскопе при увеличении х 7000.

Динамика внешней выраженности за- болевания минисвиней пневмоцистной пневмонией. У животных опытной группы внешние изменения наблюдаются на 4-5-й неделе: отмечается пассивность в поведении, ухудшение аппетита, остановка в при- бавке в весе, взьерошенность волосяного покрова. К 7-й неделе с начала эксперимента они худеют, учащается дыхание, появляются хрипы, начинается облысение. К 8-й неделе указанные симптомы нарастают, жи- вотные не подходят к кормушкам, отказываются от пищи.

Контрольная группа животных набирает в весе, активна, волосяной покров в норме.

Легкие, выделенные от больных минисвиней и крыс, увеличены в объеме, тяжелые, плотные, бледно-фиолетового цвета с серым оттенком.

Максимальная концентрация пневмо- цист, выделенных из легких крыс, составляет 15 в поле зрения при увеличении х 700, тогда как у.минисвиней достигает 30 цист.

Предлагаемый способ в сравнении с известным имеет следующие преимущества1 для получения 100 г инфицированных легких необходимо обработать ацетатом кортизона одну минисвинью или 50 крыс. Для этого потребуется 20 г ацетата кортизона на 50 крыс и 2 г 400 мл этого же препарата на одну минисвинью.

Формула изобретения

Способ получения биомассы Pneumocystis carinii, включающий инъекцию животным кортизона в дозе 75 мгАкг массы 2 раза в неделю в течение 2 месяцев, с последующим иссечением легких, их измельчением и выделением Pn. carlnll в градиенте плотности, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, в качестве животных используют минисвиней и через 2 недели после первой инъекции кортизона животных дополнительно инфицируют паразитарной суспензией Pn. carinll интраназально в дозе 3 мг на животное с концентрацией 10 цист/мл.