Способ моделирования гепатита Советский патент 1991 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии и терапии, и может быть использовано в научных исследованиях для изучения течения патологического процесса в печени и влияния на него различных гепатопротекторов.

Цель изобретения - повышение воспроизводимости острого продуктивного воспаления - достигается путем введения лекарственного препарата мышам, причем внутрибрюшинно однократно вводят каррагинан-каппа в дозе 10 мг/мышь, при этом острое продуктивное воспаление печени наступает через 24 ч и продолжается до 5 сут.

Последующая оценка на гистологических препаратах площади инфильтрации паренхимы печени, подсчет и дифференциров- ка клеток, входящих в состав инфильтрата, подтверждают наличие острого продуктивного воспаления печени.

Способ осуществляется следующим оо- разом.

Мышам СВА массой 18 - 20 г вводили внутрибрюшинно однократно каррагинан- каппа (Sigma, США) в дозе 10 мг/мышь (0,5 мг/кг). Животных забивали дислокацией шейный позвонков через 4, 6, 8, 10. 24 ч на 3, 5, 10-й день после окончания введения препарата. Кусочки печени заливали в парафин. Депэрафинированные срезы толщиной 5 мкм опрашивали гематоксилин-эозином. На гистологических срезах с помощью окулярной сетки Автандилова, содержащей 25 тест-точек подсчитывали в 40 .полях зрения количество точек сетки, приходящихся «а клетки инфильтрата, и вычисляли площадь инфильтрации (в процентах от общего числа точек на всем измеряемом поле) Клетки инфильтрата, пришедшиеся на точки сетки, дифферецированли на макрофаги, лимфоциты и нейтрофилы. Кроме того, в сыворотке крови животных, получавших 10 мг каррагинана-каппа на мышь, исс(Л

С

о ю

со XI VJ

ледовали активность аланинаминотрансфе- разы (АлТ), аспартатаминотрансферазы, (АсТ) и щелочной фосфатазы (ЩФ). У мышей, получавших кзррагинан-каппа в дозе 10 мг/мышь, достоверное увеличение площади инфильтрации паренхимы печени развивается уже через б ч после введения каррагннана-каппа. На гистологических препаратах печени отмечается явление иммиграции из сосудов лимфоцитов, нейтро- филов и моноцитов. К концу первых суток после введения каррагинана-каппа в печени развивается диффузная инфильтрация паренхимы макрофагами, лимфоцитами и нейтрофилами и жировая дистрофия гепа- тоцитов. Изменения в печени максимально выражены на 3-й день после введения каррагинана-каппа: площадь инфильтрации составляет 7,97% при 2,53% в контроле), количество макрофагов в инфильтрате увеличено в 3 раза, лимфоцитов г в 9 раз, ней- трофилов - более чем в б раз.

Жировая дистрофия гепатоцитов нередко принимает характер крупнокапель- 25 ной. Кроме того наблюдается гибель отдельных печеночных клеток и очаговое скопление вокруг макрофагов и лимфоцитов.

При биохимическом исследовании сы- 30 воротки крови мышей, получавших карраги- ман-каппа в дозе 10 мг/мышь, .обнаружено повышение активности Ал Т на 2-й день и. АсТ и ЩФ ка 3 - 5-й день после введения препарата.35

0

5

0

5

0 5

Количество нейтрофилов в инфильтрате уменьшается к 10-му дню после введения до уровня контроля, количество макрофагов и лимфоцитов остается достоверно повышенным, видимо, за счет очаговых инфильтратов, образующихся вокруг погибших гепатоцитов. Дистрофические изменения гепатоцитов на 70-й день после введения каррагинана-каппа практически не отмечаются.

Таким образом, при введении каррагинана-каппа в дозе 10 мг/мышь в печени развивается инфильтрация печени макрофагами, лимфоцитами и нейтрофилами жировая дистрофия гепатоцитов, моноцел- люлярные некрозы печеночных клеток, повышение активности печеночных ферментов в сыворотке кров, что можно расценивать как острое продуктивное воспаление печени.

Предложенный способ моделирования воспаления печени позволяет получить острое продуктивное ее воспаление, количественна оценить интенсивность и длительность реакции. Способ может быть использован для отбора (скрининга) различных гепатопротекторов,

Формула изобретения

Способ моделирования гепатита путем введения лекарственного препарата мыши, отличающийся тем, что, с целью повышения воспроизводимости ocrpd- го продуктивного воспаления, внутрибрю- шинно однократно вводят каррагинан- каппа в дозе 0,5 мг/кг.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для скрининга гепатопротекторов. Цель изобретения - повышение воспроизводимости острого продуктивного воспаления. Новизна изобретения состоит в том, что внутрибрюшинно однократно вводят карра- гинан-каппа в дозе 10 мг/мышь, при этом острое продуктивное воспаление печени наступает через 24 ч после введения и продолжается до 5 сут Получают продуктивное воспаление печени и осуществляют количественную оценку интенсивности и длительности воспалительной реакцмы.