Питательная среда для культивирования соматических структур макроскопических грибов РLеURотUS оSтRеатUS Советский патент 1991 года по МПК A01G1/04 C12N1/14 

Изобретение относится к биотехноло- (ии, а именно к средам для культивирования вегетативных тканей (мицелия) грибов классе Basldiomycetes - продуцентов биомассы рищевого назначения, а также биологически активных веществ, например, ферментов.

Цель изобретения - повышение биосинтетической активности грибов.

Пример 1. Питательную среду готовят следующим образом. Используя 90% воды от заданного объема, растворяют последовательно глюкозу, аммоний сернокислый, магний сернокислый и экстракт дрожжевой. Питательную среду стерилизуют в автоклаве при 112°С в течение 20 мин. Обе фосфорнокислые соли растворяют в 10% воды от заданного объема, стерилизуют отдельно при 121 °С в течение 30 мин и добавляют стерильно в среду перед посевом культуры

высших базидиальных грибов. После стерилизации и добавления фосфорных солей рН среды составляет 6,4-6,7.

Наилучшим вариантом состава предлагаемой питательной среды, при котором достигается поставленная цель, а затраты на приготовление среды в шесть раз меньше, чем затраты на приготовление среды-прототипа (табл. 1), является следующий, г/л:

Глюкоза

Аммоний сернокислый

Калий фосфорнокислый

однозамещенный

Калий фосфорнокислый

двузамещенный

Магний сернокислый

Экстракт дрожжевой

Вода

20,0 3,0

5,0

5,0

0,5

0,1

До 1л

О

ю

V4 О ГО VI

В среду после стерилизации и охлаждения до 26-28°С вносят инокулюм, например.

мицелий Pleurdtus ostreatus штамм HMBF - 1300 или BKMF - 2469 Д, выращенный в глубинных условиях на качалке, и проводят процесс культивирования в течение 6-9 сут. Биомассу отфильтровывают и высушивают при 50-60°С (табл. 1).

Биомасса на предлагаемой среде имеет светлую окраску, приятный грибной аромат, содержит общего продукта, 2012% истинного белка, 1,9% липидов, витамины группы В, мкг/г:

Тиамин12,0

Рибофлавин25,0

Ниацин280,0

Пиридоксин6,0

Биотин0,4

7% золы, в составе которой преобладают К и Р.

Пример 2. На питательной среде с максимальным содержанием питательных компонентов также получают повышенный выход биомассы гриба. Используя 90% воды от заданного объема, растворяют после-1 довательно глюкозу, аммоний сернокислый, магний сернокислый и экстракт дрожжевой при следующем соотношении компонентов, г/л:

Глюкоза30,0

Аммоний сернокислый5,0

Магний сернокислый1,0

Экстракт дрожжевой0,5

ВодаДо 1 литра

Питательную среду стерилизуют в автоклаве при 112°С в течение 20 мин. Каждый фосфорнокислый однозамещенный 10 г/л и двузамещенный 10 г/л растворяют в 10% воды от заданного объема и стерилизуют отдельно при 121°С в течение 30 мин. После охлаждения среды и раствора фосфорных солей до 26-28°С в питательную среду вносят раствор фосфорных солей и инокулюм Pleurotus ostreatus. например, штамм ИМВР - 1300, выращенный в глубинных условиях на качалке, в количестве 0,7-1,0 г/л и проводят процесс культивирования в ферментерах АНКУМ-2 при 26-28°С в условиях аэрации до 5 сут. Биомассу отфильтровывают и высушивают при 50-60°С.

Данные, иллюстрирующие процесс культивирования на известной среде - прототипе и предлагаемой среде приведены в табл. 2. На среде согласно изобретению продуктивность биомассы возрастает до 1,58 г/л/сут в сравнении с 0,64 г/л сут на изв естной среде.

Пример 3. Готовят питательную среду, как это описано выше, с минимальным значением компонентов, при следующем соотношении, г/л:

Глюкоза10,0

Аммоний сернокислый1,0

Калий фосфорнокислый однозамещенный2,5

Калий фосфорнокислый

двузамещенный2,5

Магний сернокислый0,25

Экстракт дрожжевой0,05

Водадо 1 л

Данные, иллюстрирующие результаты

культивирования на предлагаемой среде и

среде- прототипе, приведены в табл. 3,

Как видно из табл. 3, на среде с минимальным значением компонентов выход биомассы также превышает выход ее на известной среде. Среда согласно предлагаемому изобретению обеспечивает высокую скорость роста мицелия, который имеет выращенные морфологические признаки; на данной среде возможна прямая фотосъемка динамики роста, поскольку она прозрачна и не окрашена. Предлагаемая среды как в жидком, так и в агаризованном виде может быть использована также в различных физиологических и биохимических мсследо- ваниях, связанных с глубинным и поверхностным выращиванием базидиомицетов рода вешен кн.

Формула изЬбретения Питательная среда для культивирова- ния соматических структур макроскопических грибов Pleurotus ostreatus, содержащая глюкозу, калий фосфорнокислый одно- и двузамещенный, магний сернокислый, экстракт дрожжевой, источник азота и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения биосинтетической активности грибов, она в качестве источника азота содержит аммоний сернокислый при следующем соотношении компонентов, г/л:

Глюкоза10,0-30,0

Калий фосфорнокислый однозамещенный2,5-10,0

Калий фосфорнокислый

двузамещенный2,5-10,0

Магний сернокислый0,25-1,0

Экстракт дрожжевой0,05-0,5

Аммоний сернокислый1,0-5,0

ВодаДо 1 л

Таблица 1

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к средам для культивирования вегетативных тканей (мицелия) грибов класса Basigllomycetes - продуцентов биомассы пищевого назначения, а также биологически активных веществ, например ферментов. Целью изобретения является повышение биосинтетической активности грибов. Питательная среда содержит (в г/л) глюкозу 10,0-30,0; калий фосфорнокислый одно- и двузамещенный 2,5-10.0; сернокислый магний 0,25-1,0, экстракт дрожжевой 0,05-0,5 и в качестве источника азота аммоний сернокислый в количестве 1,0-5,0 г на 1 л среды и воду до 1 л. Среда обеспечивает высокую скорость роста мицелия, повышая выход биомассы Ьолее чем в 2 раза. Полученный мицелий имеет высокие органолеп- тичекие свойства и выраженные морфологические признаки, что важно для физиологических и биохимических исследований культуры. 3 табл.

Таблица 2

Таблицу 3