Способ количественного определения фурагина Советский патент 1991 года по МПК G01N21/78 G01N33/52 

(f

С

Изобретение относится к фармацевтической химии и может быть использовано для определения фурагина в лекарственных формах. Цель изобретения - повышение селективности определения. Пробу нагревают с концентрированной серной кислотой на водяной бане в течение 1 ч. Затем фотомет- рируют полученный раствор на длине волны 590 нм и по величине оптической плотности определяют содержание фурагина в пробе. 4 табл.

Изобретение относится к фармацевтической химии и может быть использовано для количественного определения фурагина как в таблетках, так и в сложных лекарственных формах.

Известен способ количественного определения фурагина в порошках и таблетках путем выполнения растворением анализируемой пробы в смеси диметилформамида и диоксана (1:1) с дальнейшим разбавлением полученной смеси. Фотометрирование полученного окрашенного продукта проводят при длине волны (Я) 403 нм.

Недостатком этого способа является большое количество операций и связанная с этим трудоемкость проведения опыта, а также использование большого количества реактивов, низкая стабильность полученной го окрашенного продукта.

Наиболее близким к предлагаемому является способ, согласно которому анализируемый препарат обрабатывают 50%-ной серной кислотой и оптическую плотность окрашенного продукта измеряют в ультрафиолетовой области спектра.

Однако при анализе содержания фурагина с помощью дан нога способа в лекарственных формах выявлены следующие недостатки: при спектрофотометрическом определении содержание исследуемого препарата в процессе нагревания его с 50%-ной серной кислотой опыт необходимо проводить в защищенном от света месте, окраска получаемого окрашенного продукта не стабильна, метод характеризуется большой относительной ошибкой { ± 2,5%).

Реакция не отличается специфичностью: определение всех производных 5-нит- рофуранов основано на измерении светопоглощения в ультрафиолетовой области спектра. Кроме того, при анализе лекарственных препаратов возможно влияние

о

43 00

VI а

примесей на измеряемую оптическую плотность получаемых окрашенных продуктов, что может привести к серьезным ошибкам при проведении аналитических исследований.

Цель изобретения - повышение селективности.

Поставленная цель достигается обработкой анализируемой пробы концентрированной серной кислотой с последующим нагреванием на кипящей водяной бане в течение 1 ч. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в помощью фо- тоэлектроколориметра КФК-2 при светофильтре 590± 10 нм в кювете с толщиной слоя 50,0 мм или с помощью спектрофотометра СФ-46 при длине волны Д 590 км в кювете с толщиной рабочего слоя 10,0 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту.

Выбор оптимальных условий проведения реакции фуратина с концентрированной серной кислотой

Предварительными исследованиями установлено, что присутствие в реакционной смеси даже минимальных количеств воды мешает взаимодействию, поэтому имполь- зуют концентрированную серную кислоту.

Выбор оптимального времени нагрева реакционной смеси

Исследования проводят на фото- электроколориметре КФК-2 при значении Дэфф 590 ± 10 нм, соответствующем максимальному значению оптической плотности полученных окрашенных растворов в кювете с толщиной рабочего слоя 50,0 мм. Значение оптической плотности приведено как среднее трех независимых измерений и выведено из значений величины пропускания.

Время нагрева Оптическая плот- минность, А

0.025 0,45 0,50 0,50 0,53 0,54 0,55 0,55 0,55 0,55 0,55

П р и м е р 1. Фотоэлектроколориметри- ческое определение фурагина в порошке.

Точную навеску порошка фурагина (около 0,01 г) количественно переносят в мерную колбу на 250 мл, растворяют в концентрированной серной кислоте и объем раствора в мерной колбе доводят концентрированной серной кислотой до метки (раствор А), 50,0 мл полученного раствора А переносят в мерную колбу на 250 мл и доводят до метки концентрированной серной кислотой (раствор Б). После тщательного перемешивания в мерную колбу на 50,0 мл

вносят по 1 мл исследуемого раствора Б, а 1 мл которого содержится 8 мкг фурагина, общий объем раствора доводят концентрированной серной кислотой до 25 мл. Раствор в мерной колбе на 50,0 мл нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают

и измеряют оптическую плотность раствора

с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2

при Лэфф 590 ± 10 нм вкювете на50,0мм.

В качестве раствора сравнения применяют концентрированную серную кислоту. Расчет содержания препарата в пробах вычисляют по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Построение калибровочного графика В колбы на 50 мл вносят по 1,0; 3,0; 5,0; 10,0; 20,0 мл стандартного раствора фурагина в концентрированной серной кислоте, содержащего 8 мкг фурагина в 1 мл (раствор Б), прибавляют недостающий до 25 мл объем концентрированной серной кислоты Содержимое колб тщательно перемешивают,

нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч и после охлаждения измеряют оптическую плотность полученных окрашенных растворов с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при АЭФФ 590 ± 10 нм в кю-

вете с толщиной слоя 50,0 мм, используя в качестве раствора сравнения концентрированную серную кислоту.

В табл. 1 приведена зависимость оптической плотности окрашенных растворов от

количества фурагина, взятого на реакцию, и расчет уравнения калибровочного графика для фотоэлектроколориметрического определения фурагина с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 в кюветах 50,0 мм при

светофильтре Аэфф 540 ± 10 нм.

Из данных приведенных в табл. 1, следует, что светопоглощение окрашенных растворов фурагина подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций 8-160 мкг в 25 мл конечного фотомет- рируемого раствора.

Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества взятого фурагина использованы для расчета параметров уравненияпрямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, имеющего общий вид

D кХ + Ь,

где D - оптическая плотность;

к - коэффициент пропорциональности, который равен тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсцисс:,

X - содержание определяемого вещества в анализируемой пробе, мкг;

b - константа, указывающая, в каком месте прямая пересекает ось ординат.

,С учетом рассчитанных параметров к и Ь уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика для фотоэлектроколориметриче- ского определения фурагина, имеет следующий вид:

D 0.002X + 0,029.

В табл, 2 приведена зависимость оптической плотности окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на реакцию, и расчет уравнения калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурагина с помощью спектрофотометра СФ-46 в кюветах 10,0 мм при длине волны Я 590 нм.

П р и м е р 2. Количественное определение фурагина в таблетках по 0,05 г.

Точную навеску хорошо растертой массы десяти таблеток фурагина (около 1 г) растворяют в химическом стакане в 50 мл диметилформамида. Полученный раствор фильтруют через предварительно обработанный диметилформамидом бумажный фильтр (красная полоса) в мерную колбу на 250 мл, тщательно перемешивают и общий объем раствора в колбе доводят диметилформамидом до метки. В колбу на 50,0 мл помещают 1-2 мл полученного раствора, диметилформамид выпаривают на кипящей водяной бане, к сухому остатку добавляют 25 мл концентрированной серной кислоты. Полученный раствор нагревают в течение 1 ч на кипящей водяной бане, охлаждают и окрашенный раствор фотометрируют с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при светофильтре АЭФФ 590 ± 10 нм в кювете на 10,0 мм, В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту.

Расчет содержания фурагина в анализируемых таблетках производят по калибровочному графику или по уравнению прямой,

соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

В табл. 3 приведены результаты количественного определения фурагина в таблет- 5 ках по 0,5 г фотоэлектроколориметрическим методом.

Из данных табл. 3 следует, что ошибка определения фурагина в таблетках по 0.05 г предлагаемым способом составляет 2,4%.

0 ПримерЗ. Спектрофотометрическое определение фурагина в порошке.

Точную навеску фурагина (около 0,01 г) количественно переносят в мерную колбу на 250 мл, растворяют в концентрированной

5 серной кислоте и объем раствора в мерной колбе доводят концентрированной серной кислотой до метки (раствор А). Раствор тщательно перемешивают. 1 мл полученного раствора А вносят в мерную колбу на 50 мл

0 и общий объем жидкости доводят концентрированной серной кислотой до 25 мл. Колбу нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают и измеряют оптическую плотность полученного окрашенного

5 раствора с помощью спектрофотометра СФ-46 при А 590 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту. Расчет содержания препа0 рата в пробах производят по предварительному построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

5

Построение калибровочного графика. В колбы на 50,0 мл вносят по 1,0; 3,0; 5,0; 10,0; 20,0 мл стандартного раствора фурагина в концентрированной серной кисло0 те, содержащего 40 мкг в 1 мл раствора. Во все колбы добавляют недостающий до 25 мл объем концентрированной серной кислоты. Содержимое колб нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают и про5 водят измерение оптической плотности окрашенных растворов с помощью спектрофотометра при А 590 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения концентрированную

0 серную кислоту.

Результаты опытов приведены в табл. 2. Как следует из данных табл. 2, светопогло- щение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах

5 концентраций 40-400 мкг фурагина в 25 мл конечного фотометрируемого раствора

Данные табл. 2 используют для расчета параметров к и Ь уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика методом наименьших квадратов.

Уравнение прямой, соответствующее калибровочному графику для спектрофото- метрического определения фурагина, имеет вид

D 0.0008Х + 0,020.

В табл. 4 приведены результаты количественного определения фурагина в порошке фотоэлектроколориметрическим и спектро- фотометрическим методами.

Данные, полученные при построении калибровочного графика для спектрофото- метрического определения фурагина, использованы для расчета значения удельного

Е )и молярного(е 1 )коэффициента светопоглощения окрашенного раствора, образующегося при взаимодействии фурагина с концентрированной серной кислотой.

Удельный коэффициент светопоглощения равен Е 1 2..) 201,08.

I СМ

Молярный коэффициент светопоглощения равен (е м) 5312,83.

Г р и м е р 4. Количественное определение фурагина в таблетках по 0,05 г спектро- фотометрическим методом.

Точную навеску хорошо растертой массы десяти таблеток фурагина (около 1 г) растворяют в химическом стакане 50 мл диметилформамида. Полученный раствор фильтруют через предварительно обработанный диметилформамидом бумажный фильтр (красная полоса) в мерную колбу на 250 мл. Нерастворившийся остаток в химическом стакане еще дважды обрабатывают новыми порциями ДМФ по 50 мл и получен- ные растворы фильтруют в ту же мерную колбу на 250 мл. Общий обьем раствора в колбе доводят диметилформамидом до метки. В колбу на 50,0 мл вносят 1-2 мл полученного раствора, диметилформамид выпаривают на кипящей водяной бане. К сухому остатку добавляют 25.0 мл концентрированной серной кислоты, полученный раствор нагревают в течение 1 ч на кипящей водяной бане, охлаждают и окрашенный раствор фотометрируют с помощью спектрофотометра СФ-46 при длине волны Я 590 нм в кювете на 10,0 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту. Расчет содержания фурагина в анализируемых таблетках производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой.

соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного определения фурагина в таблетках по 0,05 спектрофотометрическим методом представлены в табл. 3.

Данные, приведенные в табл. 3, позволяют сделать вывод о том, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в таблетках по 0,05 г с относительной ошибкой ±1,7%,

П р и м е р 5. Определение фурагина в моче.

При клинических исследованиях возникает необходимость определения концентрации фурагина в моче больного, Ниже приведены спектры фурагина в моче, обработанной по предлагаемому и известному способам. Для этого определенное количество анализируемой мочи (раствора препарата в моче) пускают на анализ (значение оптических плотностей приведены как среднее трех независимых измерений).

Предлагаемый

способ Я, нм А

Известный Я, нм А

0

5

0

5

200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380

0.662 0.455 0.341 0.311 0,297 0.288 0.277 0.263 0255

В результате приведенных примеров доказана селективность способа с использованием аппаратуры, которой располагают аптечные службы и клинические лаборато- рии.

Формула изобретения Способ количественного определения фурагина, заключающийся в обработке пробы серной кислотой, измерении оптической

плотности полученного раствора и определении концентрации фурагина по значению оптической плотности, отличающийся тем, что, с целью увеличения селективности,

6 X 435,6 -728 X 2.18 . n nft 6 х 150464 - 728

150464 X 2,18 - 728 X 435,6 Л Лоп в ° °29

D 0,002 X + 0,029 .

..,6X1016.08-2140 X 1.839 ппппа КU,UUUo .

6 1211600 -21402

1211600 X 1.839-2140 X 1016,08 Л по b2690 ° °2

D - 0.0008X + 0,02.

пробу нагревают на водяной бане с концентрированной серной кислотой в течение 1 ч, а измерение оптической плотности производят на длине волны 590 нм.

Таблица

Таблица 2

1.а.о.н.а.5..2.