Способ количественного определения фурагина Советский патент 1993 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для количественного определения фурагина как в чистом виде, так и в лекарственных формах.

Известен способ количественного определения лекарственных препаратов. В нем цель достигается обработкой анализируемой пробы 50%-ным раствором серной кислоты. Оптическую плотность окрашенного продукта измеряют при длине волны А 227 нм. Однако при анализе фурагина этим методом в чистом виде и в лекарственных формах выявлены следующие недостатки: большой расход реактива, невысокая точность и чувствительность определения.

Наиболее близким техническим решением к изобретению является способ количественного определения гидантоина и его производных, где к раствору фурагина, приготовленного на концентрированной серной кислоте, прибавляют цветореагент, в качестве которого используют 0,2%-ный раствор хромотроповой кислоты, также приготовленный на концентрированной серной кислоте. Полученную смесь нагревают на масляной бане при температуре 170°С в течение 4 мин. Оптическую плотность полученного раствора измеряют при длине золны Я 540 нм. Однако при анализе фурагина этим методом в чистом виде и в лекарственных формах выявлены следующие недостатки: трудоемкость процесса, необходимость нагревания до температуры 170°С и низкая чувствительность (см. таблицу сравнительных характеристик методом

Ме1).

Целью изобретения является повышение чувствительности определения фурагина в чистом виде, в лекарственных формах. Цель достигается тем, что проба, содержащая фурагин, обрабатывается химическим реагентом с последующим фотометрирова- нием полученного окрашенного раствора. В качестве химического реагента используют водный раствор флороглюцина с обработкой пробы, содержащей фурагин, концентСО

с

VJ

00 ON О

ел

рированной серной кислотой. В качестве раствора сравнения используют раствор холостого опыта.

Сопоставительный анализ заявленного решения с прототипом показывает, что заявляемый способ отличается от известного тем, что с целью повышения чувствительности определения обработку продукта, содержащего фурагин, ведут вначале концентрированной серной кислотой, а затем водным раствором флороглюцина в следующем соотношении анализируемой пробы, кислоты, цветореагента 1,0:3,9:0,1 соответственно. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в диапазоне длин волн Я 470-490 нм. Таким образом, заявленный способ соответствует критерию новизна.

Сравнение заявляемого решения с прототипом и с другими техническими решениями в данной области химии позволило выявить в них признаки, отличающие данное решение от прототипа (см. табл, ), что позволяет сделать вывод о его соответствии критерию существенное отличие.

Данное техническое решение предлагает использование нового реагента водного раствора флороглюцина. Оптимальные условия количественного определения описаны ниже, соответствующие удельные и молярные коэффициенты светопоглощения приведены в табл. Ns1.

Химизм реакции количественного определения фурагина предположительно основан на образовании красителей Стенгауза. Цел-ый ряд работ указывают, что в среде 30%-ной серной кислоты при нагревании происходит раскрытие фуранового кольца, которое входит в состав фурагина, с образованием продуктов распада, содержащих альдегидные группы, которые определяются после добавления фенолов с образованием окрашенных растворов.

Условия количественного определения фурагина с рядом производных фенола, применение которых обеспечивает перевод фурагина в окрашенные растворы, соответствующие значения молярного и удельного коэффициентов светопоглощения приведены в табл. № 6.

Для фурагина оптимальным фенолом является флороглюцин.

Пример 1. Фотоэлектроколоримет- рическое определение фурагина на основе его реакции с флороглюцином.

1. Построение калибровочного графика.

В мерные колбы на 25,0 мл вносят 1; 2; 2,5; 4; 5 мл стандартного раствора фурагина, содержащего 8,0 мкг фурагина в 1 мл, доводят объемы до 5 мл дистиллированной водой, прибавляют по 19,5 мл концентрированной серной кислоты, по 0,5 мл 1%-ного водного раствора флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20

мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФК - 2 приАэфф. 490 ± 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм. В качестве раствора

сравнения используют раствор холостого опыта.

Зависимость светопоглощения полученных растворов, окрашенных от количества фурагина, взятого на выполнение

5 реакции, представлена в табл.2. Свето- поглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций от 8 до 40 мкг фурагина в 25 мл фотометрируемого раствора.

0 Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, использованы для расчета уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку

5 калибровочного графика, имеющего общий вид

D kx+ b,

0 где D - оптическая плотность;

к - коэффициент пропорциональности, который равен тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсцисс;

х - содержание препарата в анализиру- 5 емой пробе (мкг);

b - константа, указывающая, в каком месте прямая пересекает ось ординат.

С учетом рассчитанных параметров k и b уравнение прямой, соответствующей пря- 0 молинейному участку калибровочного графика для фотоэлектроколориметрического определения фурагина, имеет вид

45

D 0,02x + 0,01.

2. Фотоколориметрическое определение фурагина в порошке.

Точную навеску анализируемого порошка фурагина (около 0,01 г) количествен0 но переносят в мерную колбу на 250 мл, растворяют при нагревании в дистиллированной воде, охлаждают и общий объем раствора в мерной колбе доводят до метки дистиллированной водой. После тщательно5 го перемешивания определенный объем полученного раствора вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 0,5 мл дистиллированной водой, прибавляют 19,5 мл концентрированной серной кислоты и 0,5 мл 1 %-ного водного раствора флороглюцина, перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФК - 2 при светофильтре Аэфф. 490 ± 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор холостого опыта.

Расчет содержания фурагина в пробах производят по предварительно по- строенному калибровочному графику или уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного фотоэлек- троколориметрического определения порошка фурагина, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.4. Из данных табл.4 следует, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в порошке с относительной ошибкой А ± 2,09%.

3. Фотоэлектроколориметрическое определение фурагина в таблетках по 0,05 г.

Точную навеску порошка 10-ти тща- тельно растертых таблеток фурагина (около 0,01 г) растворяют при нагревании з дистиллированной воде в мерной колбе на 250 мл, охлаждают и доводят до метки дистиллированной водой, тщательно переме- шивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр синяя полоса, отбрасывая первый 20 мл фильтрата. Определенный объем фильтрата вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 5 мл дистиллирован- ной водой, прибавляют 19,5 мл концентрированной серной кислоты, 0,5 мл 1%-ного раствора водного флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность пол- ученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при светофильтре Аэфф. 490 ± 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор холостого опыта.

Расчет содержания фурагина в пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей пря- молинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного фотоэлек- троколориметрического определения фурэ- гина в таблетках по 0,05 г, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.5. Из данных табл.5 следует, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в таблетках по 0,05 г с относительной ошибкой А ±2,51%.

Пример 2. Спектрофотометрическое определение фурагина на основе его реакции с флороглюцином.

1. Построение калибровочного графика.

В мерные колбы на 25 мл вносят 1; 2; 2,5; 4; 5 мл стандартного раствора фурагина, содержащего 40 мкг фурагина в 1 мл, доводят объемы до 5 мл дистиллированной зодой, добавляют по 19,5 мл концентрированной серной кислоты, по 5 мл 1%-ного водного раствора флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью спектрофотометра СФ-46 при А 481 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор холостого опыта.

Зависимость светопоглощения полученных окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, представлена в табл. 3. Светопог- лощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций от 40 до 200 мкг фурагина в 25 мл конечного фотометрического раствора.

Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества взятого на выполнение реакции фурагина использованы для расчета параметров уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика. Оно имеет вид

D 0,0048х - 0,0056.

Данные, полученные при построении калибровочного графика для спектрофото- метрического определения фурагина, ис1°/, пользованы для расчета удельного EJA и

молярного ЈJCM коэффициентов светопсгло- щения определяемого раствора, образующегося при взаимодействии фурагина с флороглюцином (см. табл.1).

2. Спектрофотометрическое определение фурагина в порошке.

Точную навеску анализируемого порошка фурагииа (около 0,01 г) количественно переносят в мерную колбу на 25 мл, растворяют при нагревании в дистиллированной зоде, охлаждают и общий объем раствора в мерной колбе доводят до метки водой. После тщательного перемешивания определенный объем полученного раствора вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 5 мл дистиллированной водой, прибавляют 19,5 мл концентрированной серной кислоты и 0,5 мл 1 %-ного раствора флорог- люцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью спектрофотометра СФ-46 приЯ 481 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор холостого опыта.

Расчет содержит фурагина в пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного спектро- фотометрического определения порошка фурагина, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.4. Из данных табл.4 следует, что с помощью данного способа можно определять содержание фурагина в порошке с относительной ошибкой А ± 1,56%.

3. Спектрофотометрическое определение фурагина в таблетках по 0,05 г.

Точную навеску порошка 10-ти тщательно растертых таблеток фурагинз (около 0,01 г) растворяют при нагревании в воде в мерной колбе на 250 мл, охлаждают и доводят до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр синяя полоса, отбрасывая первые 20 мл фильтрата, Определенный объем фильтрата вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 5 мл дистиллированной водой, прибавляют 19,5 мл концентрированной серной кислоты, 0,5 мл 1 %-ного водного раствора флороглюцина, перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью спектрофотометра СФ-46 при Я 481 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В

качестве раствора сравнения используют раствор холостого опыта.

Расчет содержания фурагин, з пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного спектро0 фотометрического определения фурагина в таблетках по 0,05 г, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.5. Их данных табл.5 следует, что с помощью данного способа можно опреде5 лять содержание фурагина в таблетках по 0,05 г с относительной ошибкой А ±1,86%. Результаты количественного определения фурагина представлены в табл.1-6. Данные табл.1-6 позволяют сделать вывод о

0 том, что представленный способ целесообразно использовать для количественного определения фурагина в чистом виде в лекарственных формах.

Предлагаемый способ по сравнению с

5 прототипом повышает чувствительность и точность определения. Сравнительные характеристики предлагаемого и известного способов приведены в табл.1.

Формула изобретения

0Способ количественного определения фурагина, включающий обработку анализируемой пробы концентрированной серной кислотой, добавление цветореагента и измерение оптической плотности окрашенно5 го раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности определения, в качестве цветореагента добавляют 1%-ный водный раствор флороглюцина при следующем соотношении анализируе0 мой пробы, кислоты, цветореагента 1,0 : 3,9: : 0,1 соответственно, а оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в диапазоне длин волн Я 490 ±10 нм.

Использование: в аналитической химии при проведении фармакокинетических, химико-токсикологических и судебно-химиче- ских исследований. Сущность изобретения: пробу, содержащую фурагин, обрабатывают серной кислотой и водным раствором фло- роглюцина с последующим фотометрирова- нием полученного окрашенного раствора при длине волны 481 нм. 6 табл.

Таблица 1

Сравнительная характеристика методов количественного определения фурагина

Предлагаемый метод

31656,10

El& 1198,14 Я 481 нм

Ошибки методов определения фурагина в порошках, таблетках

порошок А ± 1,56 таблетки по 0,05 г А ± 1,86

Прототип

е1см 7473,20 Е$м 282,86 Я 580 нм

порошок А ±2,33 таблетки по 0,05 г А ± 2,30

Таблица 2

Зависимость оптической плотности окрашенного раствора от количества фурагина, взятого

на выполнение реакции, и расчет параметров k и b уравнения калибровочного графика для

фотоэлектроколориметрического определения фурагина.

п 5 68,04 -116 2,37

,37

К

0,02

В

,04 3344 2,37 - 116

68,04

0,01

5 344 - ( 116 )2 5 3344 - ( 116 )2

Таблица 3

Зависимость оптической плотности окрашенного раствора от количества фурагина, взятого на реакцию, и расчет уравнения калибровочного графика для спектрофотометрического

определения фурагина.

п „ 5 397,46 -580 2,752

,752

- 0,0048

В

5 83600 - ( 580 )2

83600 2.752 - 580 397,46 5 83600 -(580)2

-0,0056

Результаты определения фурагина в порошке

,04 3344 2,37 - 116

68,04

0,01

5 3344 - ( 116 )2

,46

2 83600

Таблица 4

Результаты определения фурагина в таблетках по 0,05 г

Продолжение табл. 4

Продолжение табл. 4

Таблица 5

Продолжение табл. 5

Продолжение табл. 5

Таблица 6

Сравнительная характеристика способов количественного анализа фурагина на основе его

взаимодействия с производными фенола