Способ количественного определения фурадонина Советский патент 1992 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для количественного определения фурадонина как в чистом виде, так в лекарственных формах.

Известен способ количественного определения лекарственных препаратов на основе производных 5-нитрофурана . путем обработки пробы анализируемого вещества щелочью с последующим фотометрированием полученного раствора.

Однако данный способ характеризуется невысокой стабильностью окрашенного .продукта (4 мин) и связанной с этим трудностью получения воспроизводимых результатов.

. Наиболее близким к предлагаемому является метод, в котором поставленная цель достигается обработкой анализируемой пробы 50%-пым раствором серной кислоты: Оптическую плотность

окрашенного продукта измеряют при Ъ. 227 нм.

Однако при анализе фурадонина этим методом в чистом виде и в лекарственных формах выявлены большой расход реактива, невысокая точность и чувствительность определения.

Цель изобретения - повышение точности и чувствительности определения фурадонина в чистом виде и в лекарственных формах.

Поставленная цель достигается тем, что пробу, содержащую фурадонин, обрабатывают химическим реагентом с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора. В качестве химического реагента используют 0,2%- ный водный раствор пирогаллола А, обработку ведут в сернокислой среде. В качестве раствора сравнения используют раствор холостого опыта.

со со 1 ю

1719972

решение предлаого реагента - вора пирогаллодобавлением конкислоты.

оптимальные усопределения фущие удельные и светопоглоще-

10

ра 4, во 12 ло дя тщ де до Оп ше фо то с

Химизм реакции количественного определения фурадонина предположительно основан на образовании красителя Стенгауза. В среде 50%-ной серной кислоты происходит раскрытие фурано- вого кольца фурадонина и конденсация полученного продукта с пирогаллолом А с образованием окрашенного раствора.

В табл. 7 приведены условия количественного определения фурадонина с производными фенола, применение которых обеспечивает перевод фурадонина в окрашенное соединение, соответствующие значения молярного и удельног коэффициентов светопоглощения. Для фурадонина оптимальным фенолом явля- А.

ется пирогаллол

3

Количественное фотометрическое определение фурадонина.

Построение калибровочного графика.

Около 0,01 г Сточная навеска) порошка фурадонина количественно переносят в мерную колбу на 100 мл, прибавляют около 80 мл дистиллированной воды и нагревают на кипящей водяной бане до полного растворения.

Прсле охлаждения объем полученного 4 раствора доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Получают раствор А, в 1 мл которого содержится 100 мкг фурадонина.

20 мл полученного раствора А пе- реносят в мерную колбу на 100 мл и доводят объем раствора дистиллированной водой до метки. Получают раствор Б, в 1 мл которого содержится 20 мкг фурадонина.

Исходя из стандартного раствора Б готовят серию растворов с содержанием исследуемого вещества от 10

до 40 мкг. Для этого в мерные колбы на 25,0 мл помещают соответственно . 0,5; 1,OJ 1,25; 1t5 и .2,0 мл стандартного раствора Б и недостающий до 5,0 мл объем дистиллированной воды. К

5

5

0

5

0

5

0

растворам в колбах прибавляют по 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и по 12,0 мл концентрированной серной кислоты. Объем растворов в колбах доводят дистиллированной водой до метки, тщательно перемешивают. После охлаждения объем растворов в колбах снова доводят водой до метки и перемешивают. Оптическую плотность полученных окрашенных растворов измеряют с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при светофильтре 440+10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50,0 мм.

В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящую из 11,0 мл воды, 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл концентрированной серной кислоты.

В табл. 2 приведена зависимость оптической плотности продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллолом А от количества фурадонина, взятого на реакцию.

Расчет уравнения калибровочного графика для фотоэлектроколориметри- ческого определения фурадонина следующий:

- 125х2А09 5х3625 -(725)™

К

0,0169J

В

3625х2209 - 60,7х|25

- (125)2 -0,0045.

Из данных табл. 2 следует, что светопоглощение окрашенных растворов фурадонина подчинается закону Бугера- Ламберта-Бера в пределах концентраций 10,0 - 40,0 мкг фурадонина в 25 мл конечного фотометрируемого раствора. Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов фурадонина, взятого на выполнение реакции, использованы для расчета параметров уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, имеющего общий вид

D КХ - В,

где D - оптическая плотность;

К - коэффициент пропорциональности, равный тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсцисс;

51

X - содержание определяемого вещества в анализируемой пробе мкг

о

В - константа, указывающая в каком месте график пересекает ось ординат.

С учетом рассчитанных параметров К и В уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика для фотоэлектроколо- риметрического определения фурадонина имеет следующий вид:

D - 0,0169 X - 0,0045.

Фотоэлектроколориметрическое определение фурадонина в порошках.

В мерную колбу на 25,0 мл помещают 2,0 мл водного раствора фурадонина (10,0 мкг в 1 мл) и 3,0 мл дистиллированной воды. К полученному раствору добавляют 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл концентрированной серной кислоты, объем раствора в колбе доводят водой до метки, охлаждают. После охлаждения объем раствора в колбе доводят до метки водой и снова перемешивают.

Оптическую плотность полученного окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при светофильтре 1 440ЦО нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50,0 мм. В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящую из 11,0 мл дистиллированной воды, 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл концентрированной серной кислоты.

Расчет содержания препарата в пробах вычисляют по предварительно по- .строенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

В табл. 3 приведены результаты количественного определения фурадонина в порошках фотоэлектроколориметричес- ким методом.

Данные, приведенные в табл. 3, свидетельствуют о том, что с помощью данного способа можно определять содержание фурадонина в порошках с относительной ошибкой A i1,6%.

Фотоэлектроколориметрическое определение фурадонина в таблетках по 0,05 и по 0,1 г.

10

5

0

5

е

0

5

0

0

5

Точную навеску порошка растертых таблеток фурадонина количественно переносят в мерную колбу на 250,0 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и содержимое колбы нагревают на кипящей водяной бане до полного растворения. После охлаждения объем раствора в колбе доводят водой до метки и тщательно перемешивают. Необходимый объем пробы, полученный путем растворения навесок таблеток фурадонина по 0,1 или по 0,05 г помещают в мерную колбу на 25,0 мл, вносят до 5,0 мл дистиллированной воды, 4,0 мл 0,2%- ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают и доводят полученную смесь водой до метки. После охлаждения смесь снова доводят водой до метки и перемешивают.

Оптическую плотность полученного окрашенного раствора измеряют с помощью фотоколориметра КФК-2 при светофильтре Аэсрф 440±10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50,0 мм. В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящую из 11,0 мл дистиллированной воды, 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл концентрированной серной кислоты.

В табл. 4 и 5 представлены результаты количественного определения фурадонина в таблетках по 0,05 (серия 180187) и по 0,1 г (серия 260185) соответственно фотоэлектроколориметри- ческим методом.

Данные табл. 4 и 5 свидетельствуют о том, что ошибка определения фурадонина в таблетках по 0,05 или по 0,1 г предлагаемым способом не превышает А ±1,83%.

Количественное спектрофотометри- ческое определение фурадонина.

Построение калибровочного графика.

Исходя из стандартного раствора А готовят серию растворов с содержанием исследуемого вещества от 50,0 до 200,0 мкг. Для этого в мерные колбы на 25,0 мл помещают соответственно 0,5 1,0 1,2 1,5 и 2,0 мл стандартного раствора А и добавляют недостающий до 5,0 мл объем дистиллированной воды. К растворам в колбах , прибавляют по 4,0мл 0,2%-ного свеже- оприготовленного водного раствора пи : 1719972

А и по 12,0 мл концентриКву ро ри им

рованной серной кислоты. Объем растворов в колбах доводят до метки водой, тщательно перемешивают и охлаждают. После охлаждения объем растворов в колбах снова доводят водой до метки и перемешивают.

Оптическую плотность полученных окрашенных растворов измеряют с помощью спектрофотометра СФ-46 при длине волны 7 468 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10,.О мм. В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящую из 11,0 мл во- ды, 4,0 мл 2,0%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл концентрированной серной кислоты.

В табл. 6 представлена зависимость светопоглощения окрашенных растворов от количества фурадонина в пробах.

Расчет уравнения калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурадонина следующий:

5 331±97 з 620х2г299 5Г89400 - 7б2бУ2

0,00375

89400X2 299 - 620х3314 5789400 Тб2бУ™

97

-0,00465.

Из данных табл. 6 следует, что светопоглощение окрашенных растворов фурадонина подчиняется закону Бугера- Ламберта-Бера в пределах концентраций 50,0 - 400,0 мкг фурадонина в 25,0 мл конечного фотометрируемого раствора.

Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов фурадонина, взятого на выполнение реакции, использованы для расчета параметров уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, имеющего общий вил:

D КХ + В,

где D - оптическая плотность,1,

К - коэффициент пропорциональноети, равный тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсциссJ

X - содержание определяемого вещества в анализируемой пробе, мкг;

В - константаt указывающая в каком месте график пересекает ось ординат.

8

Q 5

0

5

0

5

Q

.,

С учетом рассчитанных параметров К и В уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурадонина, имеет следующий вид:

D 0,00375 - 0,00465.

Спектрофотометрическое определение фурадонина в порошке.

В мерную колбу на 25,0 мл помещают 2,0 мл водного раствора фурадонина, содержащего около 100 мкг препарата в 1 мл и 3,0 мл дистиллированной воды. К полученному раствору прибавляют 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 10,0 мл концентрированной серной кислоты. К полученному раствору добавляют 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола и 12,0 мл концентрированной серной кислоты. Содержимое колбы тщательно перемешивают, объем раствора в колбе доводят водой до метки, охлаждают. После охлаждения объем раствора в колбе доводят водой до метки и снова перемешивают.

Оптическую плотность полученного окрашенного раствора измеряют с помощью спектрофотометра СФ-46 при длине волны ft 8 нм в кювете с толщиной, рабочего слоя 10,0 мм.

В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящую из 11,0 мл дистиллированной воды, 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл концентрированной серной лоты.

Расчет содержания препарата в пробах вычисляют по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного определения фурадонина в порошках спектро- фотометрическим методом, представленные в табл. 3, позволяют сделать вывод о том, что с помощью данного способа можно определять содержание фурадонина в порошках с относительной ошибкой А ±1,29%.

i

Спектрофотометрическое определение фурадонина в таблетках (по 0,05 г и по 0,1 г) .

Точную навеску порошка растертых таблеток фурадонина количественно переносят Б мерную колбу на 250,0 мл; прибавляют 200 мл дистиллированной воды и содержимое колбы нагревают на кипящей водяной бане до полного растворения. После охлаждения объем раствора в колб.е доводят дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают .

Необходимый объем пробы, полученный путем растворения навесок таблеток фурадонина по 0,1 или по 0,05 г помещают в мерную колбу на 25,0 мл, вносят до 5,0 мл дистиллированной во ды, 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл дистиллированной серной кислоты, перемешивают и доводят полу- ченную смесь водой до метки. После охлаждения смесь снова доводят водой до метки и перемешивают.

Оптическую плотность полученного окрашенного раствора измеряют с помо- щью спектрофотометра СФ-46 при длине волны 468 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10,0 мм. В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящую из 11,0 мл дистиллированной воды, 4,0 мл 0,2%- ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола А и 12,0 мл концентрированной серной кислоты.

Результаты количественного определения фурадонина в таблетках по 0,05 или по О,1 г спектрофотометрическим методом представлены в табл. 4 и 5, данные которых свидетельствуют о TOMJ что ошибка определения фурадонина в таблетках по 0,05 и по О,1 г предлагаемым способом не превышает А 11,29%.

В табл. 8 приведена зависимость оптической плотности продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллолом А от последовательности добавления пирогаллола А и концентрированной серной кислоты.

Вывод табл. 8: на значение оптической плотности последовательность

10

5о-

7199721°

добавления реагента и концентрированной серной кислоты не влияет.

В табл. 9 показана зависимость оптической плотности продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллолом А в зависимости от количества пирогаллола А, взятого на реакцию.

Вывод табл. 9: оптическая плотность продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллолом А максимальна, если на анализ берется объем 0,2%-ного водного раствора пирогаллола А от 0,6 до 4,2 мл для 50,0 мкг фурадонина, и от 2,0 до 4,0 мл 0,2%-ного водного раствора пирогаллола А, если на анализ берется 200,0 мкг фурадонина.

В табл. 10 приведена зависимость оптической плотности продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллолом А в зависимости от количества концентрированной серной кислоты, взятой на реакцию.

Выводы табл. 10: оптическая плотность продукта взаимодействия фурадонина с 0,2%-ным водным раствором пирогаллола А максимальна, если на анализ берется концентрированная серная кислота в интервале 9 - 14 мл.

Данные табл. 1-10 позволяет сделать вывод о том, что предлагаемый способ целесообразно использовать для количественного определения фурадонина как в чистом виде, так и в лекарственных формах. Предлагаемый способ по сравнению с известным повышает чувствительность и точность определения.

Формула изобретения Способ количественного определения Фурадонина путем обработки анализируемой пробы химическим реагентом с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающий- с я тем, что, с целью повышения точности и чувствительности определения, обработку ведут сначала пирогаллолом А, затем концентрированной серной кислотой.

Таблица 1

Изобретение касается аналитической химии, в частности определения фурадонина в его лекарственных формах или в чистом виде. Цель изобретения - повышение точности и чувствительности анализа. Для этого пробу обрабатывают сначала пирогаллолом А, затем концентрированной серной кислотой с последующим фотометрированием полученного раствора. В этом случае ошибка анализа снижается с + 2,2 до ±2,9. 10 табл.

урадонин

м

23696,91

С - 925,01 468 нм

-. (

8061,47

it/ 314,68

ft 227 нм Ошибки метода Порошок А ±1,29Порошок А ±2,2

Таблетки по 0,01 А ± 1,8

10,0 20,0 25,0 30,0 40,0

,09 ,7.

-. (

8061,47

it/ 314,68

Таблетки по 0,05 A i 2,4

Таблица 2

13

1719972

14

Продолжение тябл. 3

15

Фурадоннн 1 Резорцин

Пирогаллол А

К 5,0 мл пробы прибавляют 0,5 мл 10%-ного водного раствора резорцина и 18,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и доводят общий объем до 25,0 мл ; . водой, фотометрируют против контроля478 783,32 20066,96

К 5,0 мл пробы в мерной колбе на 25,0 мл прибавляют 4,0 мл 0,2%-ного водного раствора пирогаллола Л и 12,0 мп концентрированной серной кислоты, объем доводят водой до метки, перемешивают, охлаждают и .снова доводят до метки водой, фотометрируют против контроля 468 925,-01 23696,91

Пирокате- К 5,0 мл пробы прибавляют

хин 2,0 мл 5%-ного водного раствора пирокатехина и 18,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и фото- . . метрируют против контроля 468 694,49 17791,55

Флороглю- К 5,0 мл пробы в мерной цин колбе на 25 мл прибавляют

1,0 мл 1%-ного водного раствора флороглюцина и 18,0 мл

концентрированной серной

кислоты, охлаждают и общий

объем в колбе доводят до

метки водой, фотометрируют

против контроля455 593,9 14448,30

1719972

16 , Таблица 6

Таблица 7

Фенол

Тимол

Гидрохинон

8 1-Нафтол

Пикриновая к-та

К 5 мл пробы прибавляют 2,0 мл 1%-ного водного раст- - вора фенола и 18,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и фотометриру- ют против контроля 468 768,01 19674,88

К 5,0 мл пробы в мерной колбе на 25,0 мл прибавляют 0,5 мл 1%-ного водного раст- вора тимола в 96%-ном .этаноле и 18,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и доводят до метки общий объем 96%-ным этанолом, фо- тометрируют через .15 мин против контроля468 496,10 12709,19

К 5,0 мл пробы в мерной колбе на 25,0 мл прибавляют 1,0 мл 5%-ногр водного раствора гидрохинона и 18,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и общий объем в колбе доводят водой до метки, фотометрируют против контроля495 414,82 10599,45

К 5,0 мл пробы в мерной колбе на 25,0 мл прибавляют 0,25 мл 0,1%-ного раствора 1-нафтола в 96%-ном этаноле, 5,0 мл 96%-ного этанола и 14,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и доводят общий объем до метки 96%-ным этанолом, фотометрируют против контроля 512 ; 145,13 3717,94

Реакция не идет

Примечание. Во всех случаях контролем является раствор холостого опыта.

Продолжение табл. 7

Таблица 8

Таблица 9

Числовые значения оптической плотности приведены как среднее из трех независимых переменных.

Продолжение табл. 9

I

Таблица 10

23

171997224

Продолжение табл. 10

Примечание, плотности здесь и далее нее из трех независимых

Числовые значения оптической по тексту приведены как сред- переменных.