СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ СМЕСЕЙ ПОЛИСАХАРИДОВ Советский патент 1965 года по МПК C08B37/02 

Известен способ разделения смесей полисахаридов при помощи цетавлона. Принцип разделения заключается в том, что цетавлон осаждает боратные комплексы полисахаридов при разных значениях рН.

С целью расширения сырьевой базы предложено разделение смесей некоторых полисахаридов при помощи додекарбениумхлорида (додецилкарба мил метил бензил диметиламмонийхлорида). Для этого смесь полисахаридов растворяют в дистиллированной воде, добавляют водный раствор додекарбопиумхлорида и боратный буфер.

Принцип разделения заключается в том, что додекарбониумхлорид осаждает боратные комплексы нейтральных полисахаридов из растворов при разных значениях рН.

Пример. Разделяют следующие смеси:

а)очищенный маннан -|- гликоген (по 25 мл каждого),

б)очищенный маннан+ декстран (по 25.мл каждого).

Смесь полисахаридов растворяют в 3 мл дистиллированной воды и к раствору добавляют 3 мл 10%-ного водного раствора додекарбониумхлорида и 3 мл боратного буфера (рН 8,5). Выпавщий тут же осадок (фракция I) центрифугируют (6000 об/мин в течение 5 мин), промывают пебольщим количеством дистиллированной воды (1 мл), трижды по

5 Л1л этанолом (96°-ным) и дважды по 5 мл этиловым (серным) эфиром. Осадок представляет собой чистый маннан. Из тщательно отцентрифугированной жидкости осаждают гликоген добавлением 4 об. о/о (12 мл) lo/0-ного боратного буфера (рН 10). В случае осаждения декстрана к осадочной жидкости добавляют 2 об. % (6 мл) этанола (96%-ного). Получаемый осадок (фракция II) гликогена или декстрана промывают этиловым спиртом и этиловым эфиром так же, как указано выще. Осадки сущат при 37°С в течение суток. Выход полисахаридов при этом мг:

следующий

22,6

I (маннан) Из смеси а) -фракция 22 - фракция II (гликоген)

Из смеси б) - фракция I (маннан) 22,6 - фракция II (декстран) 22,6

20

Кроме искусственных смесей полисахаридов легко разделяется смесь природных полисахаридов, которые выделяют, например, из дрожжевых организмов Rhodotorula glutinis с помощью р-нафтола (см. П. П. Блинов. Сборник работ Г-й Всероссийской конференции врачей дерматовенерологов, М 96, 1958) .

добавляют равные объемы 5%-ного раствора додекарбониумхлорида и 0,5 М раствора буры (по 30 мл). Образуется плотный сгусток (фракция I), который отделяют центрифугированием и промывают 10 мл дистиллированной воды, а затем растворяют в 10 мл 2 и. уксусной кислоты. Полученный раствор вливают в этанол (96°) при последующем доведении рН раствора 10%-ным едким натром до 4. Образуется осадок (галактан), который промывают 2-3 раза этиловым спиртом (96°) и затем 2 раза серным эфиром. Осадок высушивают нри 37°С в течение суток. К осадочной жидкости (после центрифугирования) добавляют 2 об. 7о этанола (96°). При этом образуется осадок (фракция (II) глюкана, обрабатываемый и высушиваемый аналогичным образом.

При опытных проверках разделения 1 г природного полисахарида из Rhodotorula glutinis получено (в среднем):

Фракции I (галактана)0,5 г

Фракции II (глюкана)0,25 г

Состав выделенных индивидуальных поли сахаридов определяется хроматографией на бумаге после кислотного (2NH2SO4) гидролиза.

Предмет изобретения

Способ разделения смесей полисахаридов. при помощи четвертичных аммониевых соединений с применением боратного буфера, отличающийся тем, что, с целью расширения сырьевой базы, в качестве четвертичного аммониевого соединения применяют додецилкарбамилметилбензилдиметиламмонийхлорид.