Способ получения сорбента для гемосорбции Советский патент 1992 года по МПК B01J20/22 

Изобретение относится к области получения сорбентов с полимерными покрытиями и может быть использовано в медицинской практике, а именно при очистке крови от токсинов.

Целью изобретения является повышение эффективности процесса гемосорбции за счет предотвращения образованя конгломератов гранул сорбента.

Предотвращение образования конгломератов угольных гранул достигается обработкой гранул раствором тромбина с концентрацией 1-3 мг/мл. удалением неабсорбированного тромбина, последующей обработкой гранул раствором фибриногена с концентрацией 35-45 мг/мл с последующим удалением остатка непрореагировавшего тромбина.

П р и м е р. В качестве исходного сорбента для покрытия фибринной пленкой берут флоконизированный гемосорбент СКН-1К крупнопористый. Размер сферических гранул 0,5-1 мм, Прочность гемосорбента не менее 80%, обьем сорбционных пор (по бензолу) не менее 0,9 см /г.

Флакон с углем откупоривают и отбирают гемосорбент из физиологического раствора, переносят гранулы в пластиковую пробирку с перфорированным дном до метки, соответствующей объему 1 см, дают физиологическому раствору стечь и в течен.ие 1 мин центрифугируют гранулы с пластиковой пробиркой для более полного удаления остатков физиологического раствора. Этот остаточный объем физиологического раствора измерен и составляет 0.4 мл. К подготовленным таким образом угольным

гранулам приливают 0,5 мл раствора тромбина соответствующей концентрации (т.е. объем немного превышает 0,4 мл). Раствор тромбина выдерживают с уг.ольными гранулами в течение 20-30 мин. За это время практически полностью осуществляется физическая сорбция тромбина в порах гранул. Затем угольные гранулы промывают от несорбированного тромбина пятнадцатикратным по сравнению с объемом угля объемом физиологического раствора. Гранулы повторно центрифугируют в течение 1 мин для удаления остатков физиологического раствора, чтобы не разбавлять концентрацию фибриногена в процессе следующей за центрифугированием стадией сорбции фибриногена.

Исходную концентрацию раствора фибриногена до сорбции готовят растворением навески- фибриногена в соответствующем объеме физиологического раствора, В данном случае объем раствора фибриногена составляет 0,4 мл на каждый 1 см угля СКН 1К, т.е. минимальный объем, необходимый только для смачивания пор угольных гранул.

Угольные гранулы выдерживают в растворе фибриногена в течение 5-10 мин. За это время в зависимости от концентрации фибриногена сорбируется и одновременно полимеризуется 65-90% фибриногена. Полученный гемосорбент, покрытый фибринной пленкой, промывают вновь пятнадцатикратным объемом по сравнению с объемом угля физиологического раствора, в который переходит несорбированный фибриноген. Объем промывочных растворов учитывают. Промывку ведут до полного Отсутствия в промывочных растворах следов несорбированного белка. Концентрацию несорбированного фибриногена определяют измерением оптической плотности промывочных растворов при длине волны 280 нм на спектрофотометре СФ-26. С помощью зависимости оптической плотности от концентрации фибриногена (калибровочному графику) находят концентрацию несорбированного фибриногена. Зная объем промывочных растворов и концентрацию фибриногена, определяют количество фибриногена в сливе после сорбции. По разнице количества фибриногена на входе в уголь(0,4мл)и в сливе определяют величину сорбции фибриногена.

Результаты исследований влияния концентраций растворов тромбина и фибриногена, а также последовательности сорбции

тромбины (Т) - фибриногены (Ф) или Ф-Т сведены в табл.1.

Из табл.1 следует, что сорбент, полученный с помощью обработки тромбин

(1-3 мг/мл) - фибриноген (35-45 мг/мл), обладают оптимальной для гемосорбции толщиной фибриновой пленки, предотвращающей слипание гранул.

Повыщение эффективности гемосорбции. Сорбенты СКН-1К промыщленного изготовления СКН-1К, покрытые фибринной пленкой по схеме Ф-Т из растворов фибриногена 35 и 45 мг/мл, а также покрытые фибринной пленкой по схеме Т-Ф из растворов фибриногена 35 и 45 мг/мл и концентрацией тромбина 2мг/мл, испытаны в лабораторных условиях на сорбцию средних молекул с помощью маркера средних молекул Pi2(M.в. 1350),

Для этого по 3 мл витамина Bi2, содержащих 600 мкг витамина, инкубируют в течение 1 ч с 1 см указанных сорбентов и периодически встряхивают. После инкубации из флакона отбирают надосадочную

жидкость и спектрофотометрируют для определения оптической плотности несорбированного витамина Bi2 на спектрофотометре СФ-26 при длине волны 361 нм. С помощью калибровочного графика зависимости оптической Г1лотности стандартного раствора витамина В12 от его концентрации определяют содержание несорбированного витамина Bi2. По разности содержания витамина до инкубации с сорбентами и после

находят величину сорбции. Результаты испытаний приведены в табл.2.

Из данных табл.2 видно, что сорбция . витамина Bi2 на сорбенте, полученного по схеме Т-Ф, на 3-9% больше, чем на

угле, покрытом фибриновой пленкой по схеме Ф-Т.

Формула изобретения Способ получения сорбента для гемосорбции, включающий обработку угольных гранул растворами тромбина и фибриногена, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности процесса гемосорбции за счет предотвращения образования конгломератов гранул сорбента, угольные гранулы обрабатывают раствором тромбина с концентрацией 1-3 мг/мл, затем удаляют i неабсор&1рованный тромбин и обрабатывают раствором фибриногена с

концентрацией 35-45 мг/мл с последующим удалением остатка непрореагировавшего фибриногена.

т а б ji и к « 1

Изобретение относится к получению сорбентов с полимерными покрытиями и позволяет увеличить эффективность гемосор- бции. Толщина фибринной пленки V,покрывающей 1 см угля, может изменяться варьированием концентрации тромбина 1- 3 мг/мл, фибриногена 35-45 мг/мл без обра- зования конгломератов при такой последовательности введения компонентов в процессе образования фибринной пленки: угольные гранулы, подготовленные к покрытию, центрифугируют до полного удаления фаз раствора, обрабатывают раствором тромбина концентрацией 1-3 мг/мл в течение 20-30 мин, удаляют избыток тромбина промывкой физраствором, повторно центрифугируют, затем обрабатывают раствором фибриногена концентрацией 35-45 мг/мл в течение 5-10 мин t/t полученный сорбент с фибринной пленкой промывают от избытка фибриногена физиологическим раствором. 2 табл.сл

Т а 6 Л и ц а 2