Способ определения активности нейтрофилов Советский патент 1992 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для диагностики инфекционно-воспалительных процессов у больных лейкозами.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Пример. Больная В., 34 лет, поступила в гематологическое отделение с жалобами на резкую общую слабость, повышение температуры тела, боли в горле при глотании. Больна в течение двух недель. При осмотре состояние больной тяжелое. Слизистая зева резко гиперемирована, миндалины разрыхлены, с гнойным отделяемым. Провели забор периферической крови, фиксировали свежеприготовленные на воздухе мазки в 60%-ном растворе ацетона в течение 60 с. Сливали ацетбн и высушивали мазки, на которые наносили на 2 ч при 37°С инкубационную смесь следующего состава: ЙАДФН

(никотинамидадениндинуклеотидфосфдт восстановленный) 4 мг; 0,1 М фосфатный буфер (рН 7,4) 0,8 мл; нитросиний тетразолий 1 мг/мл 1,0 мл; дистиллированная водд до 2,0 мл. Затем промывали мазки в дистиллированной воде, докрашивали ядра и высушивали. НАДФН-оссидаза при микроскопии локализуется в цлтоплазме клеток в виде синих гранул диформазана.

Оценка содержания НАДФН-оксидазы и активность ее проводили на основании подсчета 100 нейтрофилов с учетом интенсивности окраски по четырехбалльной системе:. интенсивная окраска соответствует высокому (-и-f), средняя - умеренному (-н-), слабая - незначительному (+) содержанию фермента. Отрицательная окраска обозначается 0.

Средний гистохимический коэффициент (CriQ вычисляли по формуле ЛетальдиВерга

ОГ.Л- ЗА+2Б-ИВ -ЮГ

СГК-100

где 3, 2, t и О - степень интенсивности окраски (от 4-н- до 0); буквы - число клеток с

ТОЙ или иной интенсивностью реакции; 100 - число подсчитанных клеток. Анализ крови: эр.2.9 Нв-78г/л; ц.п.0, тромб. 176,0 . лейк. 3,2 бласты 14%; палочкоядерные нейтрофилы 2%; сегментоядерные нейтрофилы (с/я) 10%, моноциты 2%, лимфоциты 68%, плазматические клетки 4%, СОЭ 48 мм/ч. Миелограмма: бласты 62%; с/я 1,0%; лимфоциты 31%; ретикулярные клетки 6,0%; плазматические клетки 1,0%.

На основании данных гемо- и миелограммы больной выставлен диагноз: острый миелобяастный лейкоз. Осложнение: фолликулярная ангина.

При исследовании активности НАДФНоксидазы получены следующие результаты: количество положительно реагирующих

клеток 78%, т.е. превышает норму (35-50%) в 2 раза, а интенсивность реакции (СГК) 1,52, т.е. превышает нормальные значения (0.43-0,57) в 3 раза.

Формул а изобретения Способ определения активности нейтрофилов путем постановки цитологической реакции и микроскопического исследования мазков крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, оценивают активность никотинамидаденйндинуклеотидфосфат оксидазы и количество реагирующих на фермент клеток и при

5 увеличении котлчел ва положительно реа гирующих клеток более чем в 2 раза и интенсивности реакции более чем в 3 раза констатмруют активность нейтрофилов.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики iинфекционно-воспалительных процессов у больных лейкозами. Целью изобретения является повышение точности способа. Эта цель достигается тем, что по способу определения нейтрофила путем постановки цитологической реакции и микроскопического исследования мазков крови оценивают активность никотинамидадениндииуклеотид- фосфат оксида и количество реагирующих на фермент клеток и лри увеличении количества положительно реагирующих клеток более чем в 2 раза и интенсивности реакции более чем в 3 раза констатируют активность нейтрофилов.